[发明专利]位点特异性丝氨酸重组酶和它们的使用方法

权利要求书

1.在真核细胞中获得位点特异性重组的方法，所述方法包括：提供包含第一重组位点和第二重组位点的分离的真核细胞；将所述第一和第二重组位点与原核重组酶多肽接触，从而在所述重组位点之间产生重组，其中所述重组酶多肽能够介导所述第一和第二重组位点之间的重组，所述第一重组位点是噬菌体基因组重组附着位点(attP)或细菌基因组重组附着位点(attB)，所述第二重组位点是attB或attP，所述重组酶选自化脓性链球菌（Streptococcus pyogenes）噬菌体重组酶或枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）噬菌体重组酶，条件是当第一重组附着位点是attB时，所述第二重组附着位点是attP；当第一重组附着位点是attP时，第二重组附着位点是attB。

2.在真核细胞中获得位点特异性重组的方法，所述方法包括：提供包含第一重组位点和第二重组位点的分离的真核细胞；将所述第一和第二重组位点与原核重组酶多肽接触，从而在所述重组位点之间产生重组，其中所述重组酶多肽能够介导所述第一和第二重组位点之间的重组，所述第一重组位点是attP或attB，所述第二重组位点是假附着位点，所述重组酶选自化脓性链球菌噬菌体重组酶或者枯草芽孢杆菌噬菌体重组酶。

3.权利要求1或2的方法，其中所述重组酶多肽选自SF370.1重组酶或者SPβc2重组酶。

4.权利要求1或2的方法，其中所述重组酶多肽由可操纵性地连接至启动子的多核苷酸所编码，所述启动子介导所述多核苷酸在所述真核细胞中的表达。

5.权利要求1或2的方法，其中，通过编码所述重组酶多肽的多核苷酸的表达，将所述重组酶多肽导入所述真核细胞中。

6.权利要求1或2的方法，其中所述重组酶多肽作为多肽被导入所述真核细胞中。

7.权利要求1或2的方法，其中，借助编码所述重组酶多肽的信使RNA，将所述重组酶多肽导入所述真核细胞中。

8.权利要求1或2的方法，其中所述位点特异性重组导致DNA的整合、删除、倒位、易位或交换。

9.获得具有稳定整合的多核苷酸序列的真核细胞的方法，所述方法包括：将多核苷酸导入包含第一重组attB或attP位点的真核细胞，其中所述多核苷酸包含核酸序列和第二重组attP或attB位点；将所述第一和所述第二重组位点与原核重组酶多肽接触，其中所述重组酶多肽能够介导所述第一重组位点和第二重组位点之间的位点特异性重组，并且所述重组酶选自化脓性链球菌噬菌体重组酶或者枯草芽孢杆菌噬菌体重组酶，条件是当所述第一重组位点是attB时，所述第二重组位点是attP；当所述第一重组位点是attP时，所述第二重组位点是attB。

10.获得具有稳定整合的多核苷酸序列的真核细胞的方法，所述方法包括：将多核苷酸导入包含第一重组假附着位点的真核细胞，其中所述多核苷酸包含核酸序列和第二重组attP或attB位点；将所能够介导所述第一重组位点和所述第二重组位点之间的位点特异性重组，并且所述重组酶选自化脓性链球菌噬菌体重组酶或者枯草芽孢杆菌噬菌体重组酶。

11.权利要求9或10的方法，其中所述重组酶多肽选自SF370.1重组酶或者SPβc2重组酶。

12.权利要求9或10的方法，其中所述编码重组酶的多核苷酸可操纵性地连接至启动子，所述启动子介导所述多核苷酸在所述真核细胞中的表达。

13.权利要求9或10的方法，其中，通过编码所述重组酶多肽的多核苷酸的表达，将所述重组酶多肽导入所述真核细胞中。

14.权利要求9或10的方法，其中所述重组酶多肽作为多肽被导入所述真核细胞中。

15.权利要求9或10的方法，其中，通过编码所述重组酶多肽的RNA的表达，将所述重组酶多肽导入所述真核细胞中。