[发明专利]一种展库酸A的提取方法

说明书

技术领域

本发明属于天然物质的提取技术领域，涉及一种展库酸A的提取方法。

背景技术

展库酸A（Zhankuic acid A），分子式为C₂₉H₄₀O₅，分子量为468.63，是从多孔菌科(Polyporaceae) 玉桂薄孔菌Antrndia cinnamomea Chang & Chou,sp.nov.子实体中分离得到的一种活性成分。研究发现，展库酸A对淋巴白血病细胞P388呈细胞毒活性，IC50为1.8μg/ml。 

经文献检索，国内尚未发现展库酸A的工业提取方法相关报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种高效、环保的展库酸A的提取方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

（1）以玉桂薄孔菌子实体为原料，于65℃干燥至恒重，粉碎，加入闪式提取器中，以95%乙醇溶液为提取溶剂，进行闪式提取，过滤得到提取液；

（2）提取液浓缩后得到粗提物，用双水相溶剂系统进行萃取，收集有机相萃取液，减压回收溶剂得浓缩液；

（3）将浓缩液用高速逆流色谱分离纯化，以氯仿-甲醇-水两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，根据图谱收集成分，低温浓缩干燥即得展库酸A。

所述步骤（1）中闪式提取电压为140-160V，提取时间为90s-120s。

所述步骤（2）中双水相溶剂系统为乙醇/硫酸铵双水相体系，称取22g硫酸铵加入65ml水中，溶解结束加入32ml无水乙醇。

所述步骤（3）中氯仿-甲醇-水体积比为（12-14）：（8-10）：（5-8）。

本发明的有益效果是：（1）本发明采用闪式提取法，快速高效、低耗能、环保；（2）本发明所用乙醇/硫酸铵双水相体系可以回收、重复利用，节约了试剂，降低了成本；（3）本发明利用高速逆流色谱分离展库酸A，分离过程无产品损失，高效，制备周期短。

具体实施方式：

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

实施例1：

取玉桂薄孔菌子实体100g，于65℃干燥至恒重，粉碎，加入闪式提取器中，以95%乙醇溶液为提取溶剂，提取电压为150V，提取时间为100s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液浓缩后得到粗提物；称取22g硫酸铵加入65ml水中，溶解结束加入32ml无水乙醇，建立乙醇/硫酸铵双水相体系，将粗提物加入3L乙醇/硫酸铵双水相体系中，振荡摇匀，静置，收集上相，减压回收溶剂得浓缩液；取氯仿、甲醇、水按13:8:7比例混合，静置分层，取上相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为900rpm，同时把下相以2.5ml/min流速泵入，注入浓缩液，紫外检测器监测，监测波长为266nm，收集流分，减压浓缩后，干燥即得展库酸A，含量96.4%。

实施例2：

取玉桂薄孔菌子实体100g，于65℃干燥至恒重，粉碎，加入闪式提取器中，以95%乙醇溶液为提取溶剂，提取电压为160V，提取时间为120s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液浓缩后得到粗提物；称取22g硫酸铵加入65ml水中，溶解结束加入32ml无水乙醇，建立乙醇/硫酸铵双水相体系，将粗提物加入2.5L乙醇/硫酸铵双水相体系中，振荡摇匀，静置，收集上相，减压回收溶剂得浓缩液；取氯仿、甲醇、水按14:9:8比例混合，静置分层，取上相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为850rpm，同时把下相以3ml/min流速泵入，注入浓缩液，紫外检测器监测，监测波长为266nm，收集流分，减压浓缩后，干燥即得展库酸A，含量94.6%。

实施例3：

取玉桂薄孔菌子实体100g，于65℃干燥至恒重，粉碎，加入闪式提取器中，以95%乙醇溶液为提取溶剂，提取电压为160V，提取时间为90s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液浓缩后得到粗提物；称取22g硫酸铵加入65ml水中，溶解结束加入32ml无水乙醇，建立乙醇/硫酸铵双水相体系，将粗提物加入3L乙醇/硫酸铵双水相体系中，振荡摇匀，静置，收集上相，减压回收溶剂得浓缩液；取氯仿、甲醇、水按12:10:5比例混合，静置分层，取上相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为800rpm，同时把下相以3ml/min流速泵入，注入浓缩液，紫外检测器监测，监测波长为266nm，收集流分，减压浓缩后，干燥即得展库酸A，含量94.9%。

实施例4：

取玉桂薄孔菌子实体100g，于65℃干燥至恒重，粉碎，加入闪式提取器中，以95%乙醇溶液为提取溶剂，提取电压为140V，提取时间为120s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液浓缩后得到粗提物；称取22g硫酸铵加入65ml水中，溶解结束加入32ml无水乙醇，建立乙醇/硫酸铵双水相体系，将粗提物加入2L乙醇/硫酸铵双水相体系中，振荡摇匀，静置，收集上相，减压回收溶剂得浓缩液；取氯仿、甲醇、水按13:10: 5比例混合，静置分层，取上相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为850rpm，同时把下相以3ml/min流速泵入，注入浓缩液，紫外检测器监测，监测波长为266nm，收集流分，减压浓缩后，干燥即得展库酸A，含量95.5%。