[发明专利]一种制备天冬氨酸氨基转移酶的方法及应用

权利要求书

1.一种制备天冬氨酸氨基转移酶的方法，其特征在于，该方法包括:

1）改造全基因合成人源化天冬氨酸氨基转移酶编码基因序列，去除大肠杆菌稀有密码子；

2）将步骤1）中改造后的天冬氨酸氨基转移酶编码基因序列插入表达载体中，并用大肠杆菌菌株转化表达；

3）将转化表达菌株接种于LB培养基，IPTG诱导；

4）所得菌体破菌，离心分离，过Ni-NTA柱纯化；

其中，步骤1）中改造后的全基因合成人源化天冬氨酸氨基转移酶编码基因序列为：

atggctctgc tgcattctgg tcgtgtactg cctggtattg ctgctgcatt ccacccgggc

ctggccgcgg cggcttctgc acgtgcatcc tcctggtgga ctcatgtaga aatgggtccg

ccagatccga tcctgggtgt taccgaggcg ttcaaacgcg ataccaattc caagaagatg

aacctgggtg tgggcgcgta ccgtgacgac aatggcaaac cttacgtact gccatctgtg

cgtaaagcag aagcgcaaat cgcggctaaa aacctggaca aagaatatct gccaatcggc

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ggtgcttctt ttctgcaacg tttcttcaaa ttctctcgtg acgtgttcct gccgaagccg

acgtggggca accacacccc gatttttcgc gatgcgggca tgcaactgca aggttaccgc

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ttcttcgaca tggcctacca gggcttcgcg tctggtgacg gtgataagga cgcgtgggcg

gttcgccact tcattgaaca aggtatcaat gtatgtctgt gccagagcta cgccaaaaac

atgggcctgt acggcgaacg tgtgggcgcc ttcaccatgg tttgcaaaga tgctgatgag

gctaaacgtg tggaatctca gctgaaaatt ctgatccgcc cgatgtacag caacccacct

ctgaacggcg ctcgtattgc ggctgccatt ctgaacaccc cggacctgcg taaacagtgg

ctgcaggagg taaaagttat ggctgatcgt atcattggta tgcgtactca gctggtttct

aacctgaaga aggaaggctc cacccataac tggcagcata tcaccgatca gatcggcatg

ttctgtttca cgggtctgaa accggagcag gtggagcgtc tgatcaaaga gtttagcatt

tatatgacca aggatggccg tatcagcgta gcaggtgtta cctccagcaa cgttggctat

ctggctcatg ctatccatca agtaaccaag tag

2.如权利要求1所述制备天冬氨酸氨基转移酶的方法，其特征在于，步骤

2）中所述表达载体为：pRSF Duet，pET表达系列。