[发明专利]培育富硒北冬虫夏草的方法

权利要求书

1.一种培育富硒北冬虫夏草的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）冬虫夏草菌种对硒的耐受性驯化；（2）富硒培养基的配制和接种；（3）对子实体的富硒培养。

2.根据权利要求1所述的培育富硒北冬虫夏草的方法，其特征在于：所述进行硒的耐受性驯化的培养基除了基础培养基外，还包括浓度为1～50 mg/kg的含硒物质。

3.根据权利要求2所述的培育富硒北冬虫夏草的方法，其特征在于：所述含硒物质为亚硒酸盐、硒酸盐、高硒植物或微生物中的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的培育富硒北冬虫夏草的方法，其特征在于：所述进行硒的耐受性驯化的培养基为液体培养基，其配方为粉状葡萄糖20 g、黄豆粉10 g、维生素 B1 50 mg、硫酸镁2 g、磷酸二氢钾3 g、食用味精1g、食盐2 g、水1000 ml，并加入硒浓度为1～50 mg/kg的亚硒酸钠。

5.根据权利要求1所述的培育富硒北冬虫夏草的方法，其特征在于：所述富硒培养基中的硒源物质是经过二次生物转化的高硒植物材料。

6.根据权利要求5所述的培育富硒北冬虫夏草的方法，其特征在于：所述富硒植物材料可以是天然或经人工强化的高硒小麦粉、高硒玉米粉、高硒黄豆粉、高硒西兰花粉、高硒紫云英粉或高硒苜蓿花粉中的一种或几种混合。

7.根据权利要求1所述的培育富硒北冬虫夏草的方法，其特征在于：所述富硒培养基的配方为：大米、硒酸盐、谷蛋白水解液；其中谷蛋白水解液系是富含蛋氨酸、胱氨酸和半胱氨酸的麦类或稻米谷蛋白的酶解水溶液；按重量分数比：大米重量分数20～25份，谷蛋白水解液30～35份，富硒植物材料粉1～10份，其形成的培养基硒浓度为1～20 mg/kg。

8.根据权利要求1所述的培育富硒北冬虫夏草的方法，其特征在于：所述对子实体富硒培养的方法为：在富硒培养基内接入经过硒驯化的原种，培养时间40～50天，其中的发菌期管理：菌丝培养温度控制在10～25℃，空气湿度60%～70%，完全黑暗条件培养；转色期管理：培养温度在18～26℃，每天光照时间10小时以上，同时进行连续变温刺激，昼夜温差在10～20之间；子实体生长阶段管理：料面上出现菌蕾后，温度适当降低，控制在19～23℃，空气湿度80%～90%，光照刺激，促进子实体形成，且生长强壮、色泽鲜艳；采收：当子实体高度达到5—8㎝，约50%子实体顶端膨大即可采收烘干。

9.根据权利要求1所述的培育富硒北冬虫夏草的方法，其特征在于：进行冬虫夏草菌种对硒的耐受性驯化之前在PDA固体培养基进行菌种活化，冰箱中保存的优良菌种，每两个月在PDA固体培养基上活化一次。

10.根据权利要求1所述的培育富硒北冬虫夏草的方法，其特征在于：包含以下步骤：(1)在PDA固体培养基进行菌种活化；(2)北冬虫夏草菌种的硒驯化：利用一系列的含硒浓度为1～50 mg/kg的液体培养基对北虫草菌种进行硒驯化，最后得到耐受浓度下的北冬虫夏草菌种，然后在硒浓度为20 mg/kg的液体培养基中扩大培养作为栽培料原种；其中液体培养基的配方为：粉状葡萄糖20 g、黄豆粉10 g、维生素 B1 50 mg、硫酸镁2 g、磷酸二氢钾3 g、食用味精1g、食盐2 g、水1000 ml；然后根据设计的液体培养基的硒浓度加入2.19～109.5 mg的亚硒酸钠形成硒浓度为1～50 mg/kg的液体培养基；(3)富硒北冬虫夏草的栽培料添加剂的制备：采用富硒玉米粉作为原料，经过粉碎、筛选、干燥作为栽培过程中的硒源，在此基础上设计出栽培富硒北冬虫夏草所需的栽培料添加剂；(4)子实体富硒培养：a、子实体富硒培养基的配方如下：它由大米、硒酸盐、谷蛋白水解液组成；谷蛋白水解液系是富含蛋氨酸、胱氨酸和半胱氨酸的麦类或稻米谷蛋白的酶解水溶液；按重量分数比：大米重量分数20～25份，谷蛋白水解液30～35份，富硒玉米粉1～10份，其形成的培养基硒浓度为1～20 mg/kg；b、子实体富硒培养方法：在上述配方的子实体富硒培养基内接入上述经过硒驯化的原种，培养时间40～50天，其中的发菌期管理：菌丝培养温度控制在10～25℃，空气湿度60%～70%，完全黑暗条件培养；转色期管理：培养温度在18～26℃，每天光照时间10小时以上，同时进行连续变温刺激，昼夜温差在10～20之间；子实体生长阶段管理：料面上出现菌蕾后，温度适当降低，控制在19～23℃，空气湿度80%～90%，光照刺激，促进子实体形成，且生长强壮、色泽鲜艳；采收：当子实体高度达到5—8㎝，约50%子实体顶端膨大即可采收烘干。