[发明专利]在白喉杆菌中稳定复制的表达载体及含该载体的白喉杆菌无效
| 申请号： | 201210259907.0 | 申请日： | 2012-07-25 |
| 公开（公告）号： | CN102766647A | 公开（公告）日： | 2012-11-07 |
| 发明（设计）人： | 朱涛;段磊;宇学锋;邵忠琦;毛慧华;邱东旭 | 申请（专利权）人： | 天津康希诺生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/77 | 分类号： | C12N15/77;C12N1/21;C07K14/34;C12R1/16 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 陆艺 |
| 地址： | 300457 天津市滨海*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 白喉 杆菌 稳定 复制 表达 载体 | ||
1.一种在白喉杆菌中稳定复制的表达载体，其特征是所述载体包括：由SEQ ID NO.1所示的在白喉杆菌中稳定复制的复制起点DNA序列或具有与SEQ ID NO.1所示DNA序列功能相同的且相似度为90%以上的DNA序列，能表达SEQ ID NO.2所示导肽蛋白序列的DNA序列和SEQ ID NO.3所示的CRM197重组蛋白编码基因的DNA序列。
2.一种携带权利要求1在白喉杆菌中稳定复制的表达载体的白喉杆菌。
3.一种重组CRM197蛋白的表达方法，其特征是包括如下步骤：
a.将在白喉杆菌中稳定复制的表达载体通过结合转移的方法导入宿主白喉杆菌中；
b.筛选得到携带在白喉杆菌中稳定复制的表达载体的白喉杆菌；
c.将步骤b获得的白喉杆菌进行蛋白表达和分泌，得到重组CRM197蛋白；所述在白喉杆菌中稳定复制的表达载体包括：由SEQ ID NO.1所示的在白喉杆菌中稳定复制的复制起点DNA序列或具有与SEQ ID NO.1所示DNA序列功能相同的且相似度为90%以上的DNA序列，能表达SEQ ID NO.2所示导肽蛋白序列的DNA序列和SEQ ID NO.3所示的CRM197重组蛋白编码基因的DNA序列。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征是所述宿主白喉杆菌为编号为ATCC 39255的白喉杆菌，ATCC 43145的白喉杆菌或CMCC 38007白喉杆菌或白喉杆菌CMCC 38007。
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