[发明专利]一种丹红注射液质量控制方法

权利要求书

1. 一种丹红注射液质量控制方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）丹红注射液HPLC指纹图谱的建立和测定

①丹红注射液对照样品溶液的制备：

精密移取丹红注射液2 mL，置于10 mL量瓶中，用体积比为50:50的乙腈-0.5%甲酸溶液定容至刻度，摇匀，经0.45 μm的微孔滤膜滤过，即得；

②丹红注射液成品指纹图谱的测定：

精密吸取供试品溶液注入高效液相色谱仪，测定，得到丹红注射液对照指纹图谱，色谱条件：十八烷基硅烷键和硅胶为填料，梯度洗脱，流速0.5~1.5 mL/min；流动相：A为0.5%甲酸水溶液，B为乙腈；采用程序可变波长扫描；柱温20~40 ℃；

（2）丹红注射液HPLC多指标含量测定方法的建立和测定

①丹红注射液对照样品溶液的制备：

精密称取丹参素钠、原儿茶醛、咖啡酸、阿魏酸、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸A适量，置于量瓶中，用体积比为50:50的乙腈-0.5%甲酸溶液定容至刻度，摇匀，过滤，即得对照品溶液；

②丹红注射液供试品溶液的制备：

精密移取丹红注射液2 mL，置于10 mL量瓶中，用体积比为50:50的乙腈-0.5%甲酸溶液定容至刻度，摇匀，经0.45 μm的微孔滤膜滤过，即得；

③丹红注射液供试品溶液的测定：

精密吸取供试品溶液注入高效液相色谱仪，测定，得到丹红注射液中丹参素钠、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸A含量，色谱条件：十八烷基硅烷键和硅胶为填料，梯度洗脱，流速0.5~1.5 mL/min；流动相：A为0.5%甲酸水溶液，B为乙腈；采用程序可变波长扫描；柱温20~40 ℃；

（3）将所述的待测产品的指纹图谱与HPLC含量测定结果结合，综合评价注射液产品质量；

采用matlab7.11.0对得到的指纹图谱数据进行处理，计算不同批次样品指纹图谱与对照指纹图谱之间的夹角余弦、相关系数、比率定性相似度以及定量相似度，同时，测定丹红注射液中以丹参素为主的8种有效成分含量，根据结果对注射液质量做出评价；

步骤（1）、（2）中所述的色谱条件为：Agilent Zorbax C₁₈，5 μm，10 mm                                                4.6 mm；流动相A为0.5%甲酸水溶液，流动相B为乙腈，柱温35 ℃，梯度洗脱程序为：0-15 min，98%-90% A；15-20 min，90%-83% A；20-45 min，83%-72% A；45-48 min，72%-40% A；程序可变波长扫描条件为：0-18 min，280 nm；19-48 min，326 nm。

2.根据权利要求1所述的一种丹红注射液质量控制方法，其特征在于：所述的步骤（1）中指纹图谱方法应用于丹红注射液成品定性相似度测定中的19个共有特征峰，其峰面积之和占总峰面积90%以上，其中2号峰丹参素钠为参照峰。

3.根据权利要求1所述的一种丹红注射液质量控制方法，其特征在于：步骤（3）所述的指纹图谱定性相似度计算采用夹角余弦S_F、比率定性相似度及相关系数综合评价，计算P、M值得到定量相似度。

4.根据权利要求3所述的一种丹红注射液质量控制方法，其特征在于：所述的定量相似度P值的计算公式为，其中S_F为夹角余弦值，R为样品指纹图谱共有指纹峰总积分面积与对照指纹图谱的共有指纹峰总积分面积的比值；定量相似度M值的计算公式为，其中n为共有峰数量，样品与对照指纹图谱中第i个特征峰的积分面面积之间的比值。

5.根据权利要求3所述的一种丹红注射液质量控制方法，其特征在于：所述的指纹图谱相似度计算采用Matlab7.11.0进行数据处理。

6.根据权利要求1所述的一种丹红注射液质量控制方法，其特征在于：所述的步骤（3）中HPLC含量测定结果中丹参素钠、原儿茶醛的含量总和大于0.35 mg/mL，夹角余弦、相关系数、比率定性相似度均大于0.95，定量相似度P在0.80~1.20之间，则认为所述的丹红注射液待测产品的质量合格。