[发明专利]一种永生化淋巴细胞的制备方法

权利要求书

1.一种永生化淋巴细胞的制备方法，其特征在于：用动物白血病病毒感染同种动物脾脏产生的淋巴细胞，对前述感染白血病病毒的淋巴细胞进行培养，获得永生化淋巴细胞。

2.根据权利要求1所述的永生化淋巴细胞的制备方法，其特征在于：动物可以为小鼠、家兔、鸡、猫、牛、羊或猴。

3.根据权利要求2所述的永生化淋巴细胞的制备方法，其特征在于：感染白血病病毒的淋巴细胞可以通过如下方式获得：

步骤一：对动物进行特异抗原免疫；

步骤二：向动物腹腔注射同种动物白血病病毒；

步骤三：通过动物的脾脏获得感染白血病病毒的淋巴细胞。

4.根据权利要求3所述的永生化淋巴细胞的制备方法，其特征在于：步骤三中，通过如下方法获得淋巴细胞：

取脾，无菌研磨管中用淋巴细胞分离液将脾脏研磨，研磨后筛网过滤；把悬有脾脏细胞的分离液立即转移到离心管中，覆盖培养基，离心；吸出淋巴细胞层，再加入培养基，离心收集细胞；倾倒上清液，用淋巴细胞培养基重悬细胞，细胞计数后，常规培养。

5.根据权利要求2所述的永生化淋巴细胞的制备方法，其特征在于：感染白血病病毒的淋巴细胞还可以通过如下方式获得：

步骤一：对动物进行特异抗原免疫；

步骤二：通过动物脾脏获得淋巴细胞；

步骤三：用同种动物白血病病毒感染步骤二获得的淋巴细胞。

6.根据权利要求2所述的永生化淋巴细胞的制备方法，其特征在于：感染白血病病毒的淋巴细胞还可以通过如下方式获得：

步骤一：选取被白血病病毒自然感染的动物，取出该动物的脾脏；

步骤二：通过脾脏获得感染白血病病毒的淋巴细胞。

7.根据权利要求5或6任何一项所述的永生化淋巴细胞的制备方法，其特征在于：步骤二中，通过如下方法获得淋巴细胞：

取脾，无菌研磨管中用淋巴细胞分离液将脾脏研磨，研磨后筛网过滤；把悬有脾脏细胞的分离液立即转移到离心管中，覆盖培养基，离心；吸出淋巴细胞层，再加入培养基，离心收集细胞；倾倒上清液，用淋巴细胞培养基重悬细胞，细胞计数后，常规培养。