[发明专利]一种多酶协同提高玉米秸秆酶解产糖量的方法

权利要求书

1.一种多酶协同提高玉米秸秆酶解产糖量的方法，其特征在于，操作步骤包括：

①纤维素酶液的制备：

用pH4.8的HAC-NaAC缓冲液稀释纤维素酶，配制纤维素酶液；

②麦芽酶液的制备：

取大麦种子，采用浸四断八工艺浸麦，然后干燥、粉碎，按照每10g粉碎好的种子加100mL的10倍稀释的pH4.8HAC-NaAC缓冲液的比例混合；于40℃水浴、搅拌1h；再4000r/min离心15min，取上清液备用；

其中，所述的浸四断八工艺是指，湿浸4h，干浸8h，浸麦度达到45％；总浸种子时间为48h，发芽时间为120h；培养温度为16℃；

③玉米秸秆的处理：

玉米秸秆粉碎至40-60目；再按固液比1g∶20ml，向玉米秸秆中加入蒸馏水，混合均匀后，于190℃保温20min；过滤得到不溶性固体，蒸馏水洗到中性后，密封备用；

④酶解实验：

按下述比例称取酶解反应物并进行酶解反应：称取1g步骤③制备的玉米秸秆粉作为反应底物，加入5mL步骤②制备的麦芽酶液，再按酶用量为4～24IU/g_底物的比例加入步骤①制备的纤维素酶液，混合均匀后，用pH4.8的HAC-NaAC缓冲液补充至总体积50mL；于50℃恒温水浴中振荡酶解1～72h。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤④所述的振荡酶解时间为8～16h。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的振荡酶解时间为12h。

4.根据权利要求1、2或3中任一项所述的方法，其特征在于步骤④中，加入酶用量为10～15IU/g_底物的步骤①制备的纤维素酶液。

5.根据权利要求5所述的方法，其特征在于加入酶用量为12IU/g_底物的步骤①制备的纤维素酶液。

6.根据权利要求1、2或5中任一项所述的方法，其特征在于，步骤②所述的干燥是指，用滤纸吸干麦芽表面的水；所述的粉碎是指在粉碎机中粉碎。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤②所述的浸麦是指液面超过种子10cm。

8.根据权利要求1或7所述的方法，其特征在于，步骤①所述的纤维素酶液的酶活为5.56IU/mL。