[发明专利]冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂及其制备方法。

背景技术

癌症是危害人类生命与健康的严重疾病。近年来，癌症发病率和死亡率已呈明显上升趋势。据统计，全球每年新发病的恶性肿瘤约635万，其中原发性肝癌30万，占4.7％。我国是世界上肝癌高发国家之一，肝癌年发病人数逾13万人，占全世界肝癌年死亡人数的43.7％。

目前临床上的癌证治疗一般视手术、放疗、化疗为三大支柱，但由于肝癌起病隐匿，恶性程度高，发展变化快，患者就诊时往往已进入中晚期，失去了最佳手术时机。因此，在肝癌的临床治疗中广泛应用的是化学药物疗法。大多数化疗药物虽可抑制肿瘤细胞过度增生，但其毒副作用大，对正常细胞组织也有很强的杀伤作用，部分病人因身体极度虚弱已无法耐受西药的治疗。中药在治疗肝癌方面因其独特的优势而被临床广泛采纳，其在治疗局部的同时，重视全身治疗，能够改善和提高病人的生活质量，延长生命周期，并且副作用小。比较当前的肝癌一线治疗药物，不难发现，多数中药只定位于癌肿的辅助治疗用药，这种现象很可能与中药本身缺乏强有力的针对癌肿局部脏器药物靶点治疗有关。为此，有必要研究中药有效组分的分子治疗技术，将有效治疗用药物分子，直接输送到肿瘤细胞内，提高药物靶向性，大幅度提高中药针对局部肿瘤脏器的治疗效果。

冬凌草甲素(Oridonin，ORI)为唇形科香茶菜属植物冬凌草(Rabdosia rubescens)的主要抗癌有效成分，分子中与环外亚甲基共轭的环戊酮结构是其抗癌活性中心。冬凌草甲素属四环二萜类化合物，分子式C₂₀H₂₈O₆，如图1所示，分子量364，为无色棱柱状结晶，熔点248-250℃，味道极苦，不溶于水，溶于甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、醋酸乙酯、1，2丙二醇和二甲基亚砜等有机溶剂。冬凌草甲素属于贝壳杉烯型二萜，它具有与肉瘤毒素相类似的抗癌活性中心α-亚甲基环戊酮。如果环外双键变成饱和键或裂环，则抗癌活性消失，因此也认为具有双功能，烷化烯酮O＝C-C＝CH₂系统则有抗癌活性。

经查阅文献，ORI抗癌谱较广，可通过多种途径诱导癌细胞凋亡，对人肝癌BEL-7402细胞，非小细胞肺癌组织NCI-H520、NCI-H460、NCI-H1299，人白血病HL-60细胞，食管癌CaES-17细胞及结肠癌HCT8细胞等均有明显细胞毒作用，临床上也显示了一定疗效。但由于冬凌草甲素水溶性差，体内生物半衰期短，目前有关制剂的抗癌疗效尚不理想，因此需要寻求新的制剂以克服这些问题。

冬凌草制剂有片剂和糖浆剂，因属于粗制剂，所以冬凌草甲素的含量较低，片剂含量为1.189％，糖浆剂含量为0.566％，加之冬凌草甲素为二萜类成分，几乎不溶于水，因此上述剂型口服后血药浓度较低，肿瘤细胞周围的冬凌草甲素浓度更低，很难达到有效治疗浓度，从而影响冬凌草甲素的抗癌效果。单纯以冬凌草甲素制成的制剂仅有“癌得宁”注射液一种，虽然其抗癌的临床疗效高于片剂和糖浆剂，但“癌得宁”注射液主要采用有机溶剂加表面活性剂的办法增加冬凌草甲素的溶解度，长期静脉滴注宜引起血管发炎、疼痛等副作用，从而限制了冬凌草甲素注射液的应用。CN1994293公开了冬凌草甲素在制药中的应用，是目前有关冬凌草甲素的唯一专利，还未出现制剂方面的专利。

纳米粒(nanoparticles)具备：较高的载药量；较高的包封率；有适宜的制备及提纯方法；有适当的粒径与形状；可控制药物的释放；有较长的体内循环时间，减少药物被网状内皮吞噬系统(RES)吞噬，增加对病变部位的暴露时间，从而增加疗效；载体材料可生物降解，毒性较低或没有毒性。

壳聚糖，又名甲壳质，是自然界普遍存在的一种多糖，主要来源于虾蟹的外壳中，化学名称为β-(1-4)-2-氨基-2-脱氧-D-葡聚糖，是由2-氨基-2-脱氧-D-葡萄糖以β-1，4糖苷键缩合而成。分子中大量氨基的存在赋予壳聚糖许多独特的性质，加之其生物相容性好，毒性小，价廉易得，因此近年来壳聚糖在医药领域中的应用越来越受到广泛关注。微粒、纳米制剂是近几年逐渐发展的新型药物传递系统，与其他传统剂型相比微粒纳米制剂具有改善药物的功效，提高药物稳定性，控制药物释放，降低药物毒性及改善患者的顺应性等优点。壳聚糖可溶于酸或酸性水溶液，无毒无抗原性，在体内能被溶菌酶等酶解，具有优良的生物降解性，在体内可溶胀成水凝胶，具有良好的成球性能，可以作为微粒给药载体用来控释和输送药物。壳聚糖纳米粒除了具有壳聚糖本身的性质外，还可以提高药物稳定性，使药物到达病灶部位，达到靶向治疗的目的。