[发明专利]58Fe氯高铁血红素、其制备及其在药动学研究中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及药物合成和药动学研究领域，具体涉及一种含稳定性同位素⁵⁸Fe的氯高铁血红素及其合成方法。

背景技术

氯高铁血红素是血红素(铁卟啉)的稳定形态。它是国际上公认的防治缺铁性贫血最有效的药物。其主要特点为含铁量高，无胃肠道刺激性，易于为人体所吸收、生物利用度好，进入人体后直接以分子形式在胃肠道中被吸收，吸收速率较快，补铁效果明显；所以很多科研人员都将其看作替代目前市场上占主导地位的无机补铁剂的最优选择。除此之外，氯高铁血红素还广泛的应用于食品行业中，作为多种食品的添加剂，起着治疗缺铁性贫血的功能性作用。

目前制备氯高铁血红素纯品的方法主要是从天然的动物血液中提取纯化得到氯高铁血红素；之前已有学者对于金属卟啉及其衍生物的合成做出了研究报导，但这些报道大多叙述简单模糊，缺乏严谨，难以重现；同时，关于利用铁的稳定性同位素⁵⁸Fe进行氯高铁血红素合成的实验尚未见报导。

在药动学研究领域，由于铁是人体的内源性物质，随着时间的不同，血液中铁的浓度也会出现较大程度的波动。故在对含铁药物，如氯高铁血红素的补铁效果和体内过程进行研究时，如何尽量排除机体内源性铁的干扰，得到能准确反映外源性铁的体内过程实验数据，便成为了研究人员最为关心的问题。许多学者也曾经对此做出过种种尝试，但至今仍未找到一种有效的研究方法。

发明内容

本发明公开了一种利用⁵⁸Fe合成同位素标记的氯高铁血红素(I)及其制备方法，可用于定量研究氯高铁血红素这种内源性药物，同时也为建立一种新的定量研究其他含铁药物的体内过程提供物质基础。

本发明的以⁵⁸Fe标记的氯高铁血红素，结构式(I)如下：

本发明的⁵⁸Fe标记的氯高铁血红素的制备方法，包括：

a、将同位素⁵⁸Fe粉用过量的稀盐酸氧化，生成同位素氯化亚铁溶液，将得到的氯化亚铁溶液旋转蒸发挥去水分，真空干燥制得同位素氯化亚铁晶体；

b、将制得的同位素氯化亚铁晶体与酸化的原卟啉二钠反应，控制反应前体系pH为5～7；

c、蒸去大部分反应溶剂后，水洗，加入无机酸调节体系pH为1～2，超声振荡，静置后抽滤，即得。

上述方法还进一步包括重结晶。

其中b步骤反应温度优选110℃～150℃，反应时间优选0.75～11个小时。

其中同位素氯化亚铁晶体与酸化的原卟啉二钠摩尔比优选1.2∶1～20∶1。

其中b步骤的反应溶剂优选N，N-二甲基甲酰胺。

其中原卟啉二钠与N，N-二甲基甲酰胺溶液的用量优选1∶100～1∶200g/ml。

更优选的制备方法包括：

a向装有同位素⁵⁸Fe粉和无氧水的烧瓶中通入刚生成的HCl气体直至铁粉完全消失，得到⁵⁸FeCl₂溶液；将得到的⁵⁸FeCl₂溶液在N₂保护环境中旋转蒸发挥去溶剂，真空干燥12h制得同位素氯化亚铁晶体；

b以N，N-二甲基甲酰胺(DMF)为溶剂，将制得的同位素氯化亚铁晶体与酸化的原卟啉二钠进行络合反应，反应前控制体系呈弱酸性pH为5～7，以薄层色谱监测，待原料原卟啉消失或不再减少时，停止反应。

c反应结束后旋转蒸发仪上除去大部分溶剂，水洗，加入无机酸调节体系pH呈强酸性pH为1～2，超声振荡30min，静置后抽滤，通过重结晶和柱层析法，纯化得到同位素氯高铁血红素纯品。

上述步骤a中同位素氯化亚铁晶体的制备过程，其中盐酸优选由氯化钠/氯化铵和浓硫酸反应生成氯化氢气体溶解于无氧水中而得；在蒸发挥去溶剂过程中，必须以N₂保护整个过程以避免亚铁被氧化成高铁。

上述步骤b中原卟啉二钠与反应溶剂N，N-二甲基甲酰胺的比例优选为1∶100～1∶200(g/ml)。所述的反应前体系的pH应严格的控制在5～7，回流温度为110～150℃，反应时间为0.75～11h。酸化试剂选择为浓盐酸或者稀盐酸。

上述步骤c中水洗后应控制体系pH值为1～2，超声振荡充分以保证多余的无机铁离子的溶解。调节酸性的试剂选择为浓盐酸。

为了提高产品纯度和产率，还优选将上述制备的产品进一步包括将抽滤后的产品通过重结晶和/或柱层析法纯化。