[发明专利]一种顺铂长循环脂质体及其制备方法

说明书

技术领域：本发明涉及顺铂长循环脂质体及其制备方法。

背景技术：顺铂自1978年被批准为抗肿瘤药物后，在临床的应用非常广泛。顺铂可以单独或与其他药物联合使用来治疗不同的癌症，如膀胱癌、卵巢癌、头颈癌以及肺癌等。顺铂具有较高的细胞毒性，一般认为，其在进入细胞内部后被水解，形成具有高活性的水合顺铂。水合顺铂与DNA形成共轭物，从而导致DNA二级结构发生变化，阻碍DNA的转录和复制，最终导致细胞的凋亡。然而，顺铂对肿瘤细胞缺乏特异性，它在病灶杀灭肿瘤细胞的同时，也杀伤体内的正常细胞，产生严重的毒副作用。

脂质体作为药物载体安全无毒、生物相容性好。具有合适粒径，高载药量的脂质体可以被动靶向肿瘤组织，降低药物毒性。而长循环脂质体更是能够避免脂质体被巨噬细胞吞噬，使脂质体顺利到达肿瘤组织。因此，长循环脂质体具有越来越高的实际应用价值。将顺铂制备成长循环脂质体能够降低顺铂毒副作用，然而顺铂脂质体的制备面临两个难题。第一，顺铂亲脂性差且水溶性不佳，在水中的溶解度4℃时约1mg/ml；第二，顺铂只能通过被动的方法载入脂质体内，无法参照已上市的阿霉素脂质体Doxil等进行pH梯度主动载药。上述两个原因通常造成顺铂脂质体的载药量较低。目前已经进入临床试验的顺铂脂质体SPI-077通过加热增加顺铂的溶解度。SPI-077制备过程中，水化温度为65℃。在此温度下，顺铂具有较高的溶解度，约为8mg/ml。但是此方法制备的顺铂长循环脂质体载药量依然较低，到达肿瘤部位后释药不足，导致抗肿瘤活性降低。有人将顺铂转化成顺铂衍生物CDDP3，它具有较高的水溶性，且在氯离子存在下容易转化为CDDP。然后通过静电作用力将CDDP载入脂质体或其他载体中。这一方法不仅解决了顺铂溶解性的问题，同时静电作用力能够提高脂质体的载药量，但是制备方法相当繁琐。有专利报道，带正电荷的水合顺铂与带负电荷的磷脂酰甘油衍生物在适当比例的乙醇水溶液中形成胶束，再将胶束用磷脂材料包裹形成脂质体，该专利产品Lipoplatin目前已进行临床三期试验。因此，利用带负电荷的磷脂酰甘油衍生物来通过静电作用力实现顺铂高载药量的目的是可行的。

发明内容：本发明的目的是提供具有较高载药量的顺铂长循环脂质体及其一种更为简单易行的制备方法。该脂质体的制备建立在Lipoplatin的基础上，省略胶束的制备过程，直接制得脂质体。该脂质体的高载药量是通过带负电荷的磷脂材料与带正电荷的水合顺铂静电作用实现的。

本发明提供的顺铂长循环脂质体的制备方法：

先得到带有负电荷的磷脂材料，再制备带正电荷的水合顺铂溶液，最后在水相体系中，将带正电的水合顺铂和带负电荷的磷脂材料通过静电作用，制得顺铂长循环脂质体。

上述顺铂长循环脂质体，其特征在于，带负电荷的磷脂材料中含有带负电荷的磷脂酰甘油脂质衍生物。

顺铂长循环脂质体，其特征在于，上述磷脂酰甘油脂质衍生物选自于以下一种或几种的组合：二棕榈酰基磷脂酰甘油(DPPG)、二肉豆蔻酰基磷脂酰甘油(DMPG)、二癸酰基磷脂酰甘油(DCPG)、二硬脂酰基磷脂酰甘油(DSPG)和二油酰基磷脂酰甘油(DOPG)。

顺铂长循环脂质体，其特征在于，带负电荷的磷脂材料的用量为20％～50％。

顺铂长循环脂质体，其特征在于，磷脂材料还包含电中性组分：胆固醇、大豆磷脂酰胆碱(SPC)、甲氧基聚乙二醇磷脂酰乙醇胺(mPEG-DSPE)。

顺铂长循环脂质体，其特征在于，胆固醇用量为7％～15％，SPC用量为30％～60％，mPEG-DSPE用量为7％～15％。

顺铂长循环脂质体，其特征在于，带正电荷的水合顺铂的制备，是将顺铂溶解于双蒸水中，搅拌使其充分水合制得，或者是将顺铂与硝酸银溶于双蒸水中，反应后弃去沉淀制得。

更具体的，本发明提供一种顺铂长循环脂质体的制备方法：

a)将适量的DPPG，SPC，胆固醇，mPEG-DSPE置于250ml的茄形瓶中，加入适量氯仿∶甲醇＝2∶1的混合溶液使磷脂材料溶解，将茄形瓶接入旋转蒸发仪，最大转速旋转蒸发除去有机溶剂，形成磷脂薄膜。磷脂膜真空干燥过夜，除尽有机溶剂。

b)将摩尔比DPPG∶顺铂为1～2.5∶1量的顺铂置于西林瓶中，加入适当体积的双蒸水，在50℃，转速为300rpm条件下恒温磁力搅拌器中搅拌4h。或者将摩尔比2∶1的硝酸银溶液与顺铂溶液反应，弃去沉淀，得水合顺铂。

c)将上述所得水合顺铂溶液加入磷脂膜中，50℃水化30min得顺铂长循环脂质体。

附图说明：