[发明专利]一种姬菇菌种的液体发酵培养方法

说明书

技术领域

本发明属于食用菌培植技术领域，具体涉及一种姬菇菌种的液体发酵培养方法。

背景技术

姬菇(Pleurotus cornucopiae)又叫黄白侧耳、紫孢侧耳、紫孢平菇、姬平菇。姬菇口感好，质地脆嫩，味道鲜美营养价值高，蛋白质含量高于一般蔬菜，含有人体所必需的八种氨基酸，其子实体入药有滋补强壮作用，可治疗多种疾病。姬菇不是分类上的名称，也不是菌种名，而是一种商品名，指采收子实体菌盖直径小于3厘米的一类平菇。姬菇一直使用固体菌种进行生产，但固体菌种具有明显的缺陷，主要表现在生长周期长、菌龄不一致、发菌速度慢、栽培种需用量大、生产成本高等方面，显然不能满足大规模栽培使用需求。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在的不足，本发明的目的是提供一种姬菇菌种的液体发酵培养方法，以满足高效培育姬菇的使用需求。

技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

一种姬菇菌种的液体发酵培养方法，包括以下步骤：

(1)取活化的0.5cm²斜面母种接种到装有60～120mL液体培养基的250mL培养瓶中，控温21～27℃，90～180rpm振荡培养5～7d得一级摇瓶菌种，按接种量为5～10％转接一级种子到二级培养液进行培养，再将培养好的二级摇瓶液体菌种转接到三级液体培养液进行培养，相同方法依次进行各级培养得种子液；其中，各级摇瓶培养条件相同，液体培养基配方为：碳源，氮源10～20g，KH₂PO₄ 1～3g，MgSO₄·7H₂O 0.5～1.5g，VB₁ 10mg，水1000mL，pH5～7；碳源为20～30g的可溶性淀粉、乳糖、果糖、葡萄糖、甘露醇或蔗糖；氮源为酵母膏、蛋白胨、玉米粉、氯化铵、硫酸铵或尿素；

(2)将步骤(1)所得的种子液按5％的接种量接种至装有6L发酵培养基的10L发酵罐进行发酵培养，25℃培养5～6d，即可；其中，发酵培养基配方为：甘露醇30g，酵母膏10g，玉米粉10g，KH₂PO₄ 2g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，pH值6.0，水1000mL。

步骤(1)中，碳氮比优选为18～20∶1；碳源优选为果糖或甘露醇，更优选为甘露醇。

步骤(1)中，氮源优选为酵母膏、蛋白胨或氯化铵，更优选为酵母膏。

步骤(1)中，液体培养基优选配方为：30g甘露醇，10g酵母膏，玉米粉10g，2g KH₂PO₄，0.5g MgSO₄·7H₂O，VB₁ 10mg，水1000mL，pH6。

步骤(1)中，优选培养条件：装液量为90mL，控温25℃，150rpm振荡培养5～6d，接种量为5％。

有益效果：与现有的固体培养姬菇菌种方法相比，本发明的姬菇菌种的液体发酵培养方法具有的明显优势包括：生产周期短、菌龄一致、生产成本低、接种简便，液体菌种生长速度明显优于固体传统栽培种，菌种瓶中菌丝生长满瓶时间为16d，时间明显缩短，液体菌种接种的生长速度明显提高75％，完全可以在工厂生产中实际应用，具有很好的实用性，能够产生很好的经济效益和社会效应。

附图说明

图1是碳源对菌丝球生长量结果图；

图2是氮源对菌丝球生长量结果图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明。

以下实施例所使用的材料和方法为：

试验材料：菌种为姬菇。

按照有机肥料中国人民共和国农业行业标准NY525-2002测定各种原料含碳量和含氮量。

菌丝体生物量测定：将生长良好、无污染的摇瓶培养发酵液，经4层纱布过滤，菌丝球生物量湿重为沥干后取固体物在电子天平上称重，菌丝球生物量干重则是直接过滤烘干称重。

菌球直径测定：取1mL发酵液用水稀释10倍，随机取20个菌球在培养皿中沿固定的直线排成一行，用卡尺测定总长度，重复3次，求其平均值。

菌球密度测定：取1mL均匀的发酵液用水稀释10倍，于培养皿下垫置黑色方格纸计数。

pH值测定：采用型酸度计测定pH值。