[发明专利]一种黄色短杆菌及其应用及发酵制备赖氨酸的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种黄色短杆菌(Brevibacterium flavum)(该菌株于2011年10月14日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)(保藏单位的缩写为CGMCC)，保藏编号为CGMCC5341)及其应用，以及采用该黄色短杆菌作为发酵菌种发酵制备赖氨酸的方法。

背景技术

赖氨酸是人和动物营养的八种必需氨基酸之一。它对调节体内代谢平衡、提高体内对谷类蛋白质的吸收、改善人类膳食营养和动物营养、促进生长发育均有重要作用。

目前主要用于医药、食品和饲料工业，从消费结构上看，赖氨酸在饲料中的消费占了近90％，而在食品及医药中间体的消费仅占10％。

赖氨酸多是通过微生物发酵来制备，一般通过将赖氨酸发酵菌种在种子罐培养后接种至发酵罐中发酵产生赖氨酸，黄色短杆菌是一种常用的赖氨酸发酵菌种。为了提高赖氨酸的生产能力，进行菌株改良，开发具有高产率的菌株是重点的研究方向。

发明内容

本发明的目的是为了提高发酵法生产赖氨酸的生产能力，提供一种新的黄色短杆菌及采用该黄色短杆菌作为发酵菌种发酵制备赖氨酸的方法。

为了实现上述目的，一方面，本发明提供了一种黄色短杆菌，其特征在于，所述黄色短杆菌的保藏编号为CGMCC5341。

另一方面，本发明提供了一种如上所述的黄色短杆菌在发酵制备赖氨酸中的应用。

第三方面，本发明提供了一种发酵制备赖氨酸的方法，其特征在于，所述方法包括在生成赖氨酸的条件下，将如权利要求1所述的黄色短杆菌接种至发酵培养基中进行发酵培养。

本发明提供的黄色短杆菌，保藏编号为CGMCC5341，采用该黄色短杆菌作为发酵菌种发酵制备赖氨酸，可提高终点赖氨酸含量、单罐供酸量和转化率。

本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

生物保藏

本发明的菌株被命名为黄色短杆菌(Brevibacterium flavum)，并于2011年10月14日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)(保藏单位的缩写为CGMCC)，保藏编号为CGMCC5341。

具体实施方式

以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。

一方面，本发明提供了一种黄色短杆菌，该黄色短杆菌的保藏编号为CGMCC5341。

将该黄色短杆菌在30-32℃下，在固体培养基(含有1重量％蛋白胨，1重量％酵母膏和0.5重量％NaCl的pH7.0的琼脂培养基)上培养24-30h，在显微镜下观察，发现：该菌株在琼脂培养基上形成1.0-1.4mm厚的菌膜，细胞短杆近球形，不形成孢子，无鞭毛，不运动。

该菌株最适生长温度为25-32℃，革兰氏染色阳性，G+，在水中为均匀悬浮液，菌落圆形，奶油色，边缘光滑，菌落产生非水溶性黄色素。

本发明中的黄色短杆菌菌株是通过将黄色短杆菌FB21(购自江南大学)作为出发菌株，经N⁺注入诱变技术得到的。

该N⁺注入诱变技术是将培养24h后的出发菌株用0.85％生理盐水从培养基上洗脱下来，用生理盐水适当稀释至菌悬液浓度约10⁸-10⁹个/mL。取适量菌悬液涂布于灭菌冷却后的载玻片上，以在显微镜下观察无相互重叠的细胞为宜。自然干燥后立即进行N⁺注入。将制得的样品载片置于离子注入机载台上进行N⁺注入诱变。注入能量为20kev，剂量为0.01-3.0×10¹⁸个离子/s，注入靶室的真空度为10^-3Pa，离子束流量为1mA。