[发明专利]一种快速鉴定耐盐绒毛白蜡的分子检测方法无效
申请号: | 201210006281.2 | 申请日: | 2012-01-10 |
公开(公告)号: | CN102517398A | 公开(公告)日: | 2012-06-27 |
发明(设计)人: | 夏阳;燕丽萍;李双云;刘翠兰;束靖 | 申请(专利权)人: | 山东省林业科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 李健康 |
地址: | 250014 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 鉴定 绒毛 白蜡 分子 检测 方法 | ||
1.一种快速鉴定耐盐绒毛白蜡的分子检测方法,步骤是:
(1)应用SEQ ID NO.1所示核酸序列为SCAR标记,以绒毛白蜡植物DNA为模板,利用所述SCAR标记的两条引物在54~56℃的退火温度下,进行PCR扩增,其中:所述SCAR标记的两条引物分别是:
引物1:5’TGCTTGGTTTGTTCGTGG 3’;
引物2:5’CGTGCAACCTAAAGTTGAG 3’;
(2)将上述PCR扩增产物在1.0%琼脂糖凝胶电泳上分离,观测PCR结果;
(3)鉴定是否为耐盐绒毛白蜡植株;如果PCR结果扩增出一条592bp的DNA条带,判定为耐盐植株;如果PCR结果扩增不出592bp的DNA条带,判定为盐敏感植株。
2.根据权利要求1所述快速鉴定耐盐绒毛白蜡的分子检测方法,其特征在于:步骤(1)所述的PCR反应总体积为25微升,2×Taq PCR MasterMix 12.5μl,引物1(10μmol/L)1μl,引物2(10μmol/L)1μl,20ng基因组DNA 2μl,ddH2O 8.5μl。
3.根据权利要求1所述快速鉴定耐盐绒毛白蜡的分子检测方法,其特征在于:步骤(1)所述的PCR反应参数为94℃预变性4min,94℃变性30s,55℃退火45s,72℃1.5min,循环30次,72℃延伸10min。
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