[发明专利]小鼠黄嘌呤氧化酶转录水平定量用PCR引物组合及PCR方法无效
| 申请号： | 201210006099.7 | 申请日： | 2012-01-10 |
| 公开（公告）号： | CN102758003A | 公开（公告）日： | 2012-10-31 |
| 发明（设计）人： | 张才;王宏伟;何万领;杨自军;王雪莹;朱重伟;王亚垒;尚泽松 | 申请（专利权）人： | 河南科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人： | 牛爱周 |
| 地址： | 471003 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 小鼠 黄嘌呤 氧化酶 转录 水平 定量 pcr 引物 组合 方法 | ||
1.一种小鼠黄嘌呤氧化酶转录水平定量用PCR引物组合，其特征在于：该核苷酸序列为：
正向：5’-TATGGCCCCGAGGTAAAAAC-3’
反向：5’-GGGCGGCCTGTCTTGTATGC-3”。
2.一种小鼠黄嘌呤氧化酶转录水平定量实时荧光定量PCR方法，其特征在于：以样品总RNA反转录成的cDNA为模板，利用PCR引物组合进行实时荧光定量PCR扩增，根据反应体系中荧光的变化情况定量黄嘌呤氧化酶转录水平。
3.根据权利要求2所述的小鼠黄嘌呤氧化酶转录水平定量实时荧光定量PCR方法，其特征在于：所述的扩增序列为：
tatggccccgaggtaaaaatcgagaaaggagatctcaagaaaggcttttctgaagctgacaatgttgtctcaggaga
attatatattggtggccaggagcacttctatctggagacccactgcaccattgccgtgccgaaaggcgaggcaggcg
agatggagctcttcgtgagcacacagaacaccatgaaaacccagagctttattgcaaagatgttgggtgttccagac
aacagaattgtagtccgagtgaaaagaatgggtggaggctttggagggaaggagacccggagcactctgatatccac
agcagtggccttggctgcatacaagacaggccgccc
4.根据权利要求2所述的小鼠黄嘌呤氧化酶转录水平定量实时荧光定量PCR方法，其特征在于：所述的PCR扩增体系为：25μL体系2×SYBR Mix 12.5μL，10μmol/L正向、反向引物各0.5μL，cDNA模板2μL，9.35μL去离子水，TaqDNAPolymerase 0.15μL，三步法对样品进行扩增，在荧光定量PCR仪上获取CT值。
5.根据权利要求4所述的小鼠黄嘌呤氧化酶转录水平定量实时荧光定量PCR方法，其特征在于：所述的三步法为：95℃3min，95℃30sec，60℃30sec，72℃31sec，40个循环。
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