[发明专利]一种IgG含量的检测方法无效
| 申请号： | 201110362205.0 | 申请日： | 2011-11-16 |
| 公开（公告）号： | CN102507958A | 公开（公告）日： | 2012-06-20 |
| 发明（设计）人： | 张慧东;卜英俊;王彬;陈芳;顾培华 | 申请（专利权）人： | 江苏星驰生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/531 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 柏尚春 |
| 地址： | 215500 江苏省苏州市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 igg 含量 检测 方法 | ||
1.一种IgG含量的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)将标准IgG溶于缓冲液中配制成多个浓度的标准溶液，并分别检测每个标准溶液中的红细胞基数后制作标准曲线图；
(2)将样品IgG与过量浓度的SPA混合反应，制备IgG-SPA复合物；
(3)将IgG-SPA复合物与过量猪血清补体反应，产生的补体结合物与红细胞发生溶血反应，计算红细胞基数，与标准曲线对照即得样品IgG含量。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中标准曲线图的制作方法如下：首先制备IgG标准溶液：在缓冲液中溶解IgG标准物质分别配制成为1mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.1mg/ml、0.05mg/ml的标准溶液，然后通过IgG-SPA结合反应及补体结合反应得到红细胞数量，从而制备标准曲线图。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(2)中制备IgG-SPA复合物的方法为：首先采用缓冲液配制与步骤(1)中标准溶液对应浓度的样品溶液，放入超声波清洗机中超声2-20min，精确吸取20-200ul样品备用；然后采用缓冲液配制5倍以上IgG样品溶液浓度的SPA溶液，放入超声波清洗机中超声2-20min，精确吸取20-200ul SPA备用；将备用的IgG与备用的SPA溶液进行对应混合，反应生成IgG-SPA复合物。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(3)中将IgG-SPA复合物与过量猪血清补体反应，产生的补体结合物与红细胞发生溶血反应的步骤为：首先采用缓冲液配制5倍以上IgG样品溶液浓度的血清补体溶液，放入超声波清洗机中超声2-20min，精确吸取20-200ul血清补体溶液备用；然后将步骤(2)中的IgG-SPA复合物与备用的血清补体溶液反应生成补体结合物；再精确吸取20-200ul补体结合物与标准红细胞发生溶血反应。
5.根据权利要求1至4任一项所述的检测方法，其特征在于：所述的缓冲液为PH＝6.0的0.2mol/L磷酸盐缓冲液。
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