[发明专利]甘蔗锈病检测用引物及其检测方法无效
| 申请号： | 201110349220.1 | 申请日： | 2011-11-08 |
| 公开（公告）号： | CN102367481A | 公开（公告）日： | 2012-03-07 |
| 发明（设计）人： | 王晓燕;李文凤;黄应昆;罗志明;尹炯 | 申请（专利权）人： | 云南省农业科学院甘蔗研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 昆明正原专利代理有限责任公司 53100 | 代理人： | 陈左 |
| 地址： | 661600 云南省红河*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 甘蔗 锈病 检测 引物 及其 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种甘蔗锈病检测用引物,其特征在于由正向引物和反向引物组成，正向引物的核苷酸序列为:
PM1：5’-ATCATCTGTGGGTCAAAC-3’，
反向引物的核苷酸序列为：
PM2：5’-AATAAAGCCAGAGTA AGC-3’，
目的条带大小为593bp。
2.一种采用权利要求1所述甘蔗锈病检测用引物的检测方法，其特征在于步骤如下：（1）以样品总DNA为模板，利用权利要求1所述的PM1和PM2引物对进行PCR扩增，（2）反应结束后根据特异性扩增DNA片段的位置判定结果。
3.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于PCR反应中PCR扩增的过程如下：在PCR管里加入：2×Taq PCR MasterMix 6.0ul，PM1（20umol/L）1.0ul，PM2（20umol/l）1.0ul，DNA模板1.0ul，灭菌ddH2O 16ul，加完后短速离心8～10秒后放进PCR仪，94℃预变性5min；94℃变性1min，53℃退火50s,72℃延伸1min,34个循环；72℃延伸5min，4℃保存。
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