[发明专利]一种双歧杆菌微胶囊及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于益生菌制品制备技术领域，具体涉及一种双歧杆菌微胶囊及其制备方法。

背景技术

双歧杆菌是人和动物肠道内重要的益生菌，具有调节肠道菌群平衡、提供营养、降低胆固醇和抗癌等特性。然而它专性厌氧，对氧气、pH、温度、湿度等外界不良环境极为敏感，在生产、贮存和运输过程中很难保持活性；而且干菌粉经口服食用时，无法耐受低pH值的胃酸、胆盐等环境，难以保证有大量的存活菌到达肠道而定殖于肠粘膜上。

发明内容

本发明的目的是提供一种能有效延长双歧杆菌保藏期的双歧杆菌微胶囊及其制备方法，解决了液体双歧杆菌制剂中活菌含量大幅度下降及不耐胃酸的问题。

本发明所采用的技术方案是；

一种双歧杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于：

由以下步骤实现：

步骤一：在37℃的温度条件下，将活化的双歧杆菌在液体培养基中厌氧培养24 小时，离心收集菌体，用0.85%的生理盐水洗涤制备菌悬液；

步骤二：制备保护剂，每1000 mL保护剂添加有1.23 g胶原蛋白、11.50 g糖类物质和4.65 mL甘油，其余为蒸馏水；

步骤三：将经过灭菌处理的保护剂与菌悬液按2:1的体积比混合均匀，静置30分钟，在-20℃的温度条件下预冻2 小时，然后在-50℃、真空度为50-100 毫托的真空冷冻干燥箱中干燥48小时，制备得到冻干菌粉；

步骤四：向质量分数为1-2%的海藻酸钠溶液中加入0.1 g冻干菌粉，冻干菌粉与海藻酸钠质量比为1∶（3-5），混合均匀后得到菌胶混合液；

步骤五：将菌胶混合液逐滴加入到含有0.2%的吐温-80的大豆油中，菌胶混合液与大豆油的体积比为1∶5，乳化并快速加入到摩尔浓度为0.1 mol/L的氯化钙溶液中，静置30分钟；

步骤六：离心收集微胶囊，用质量分数为0.85%的生理盐水洗涤，将制备好的微胶囊置于真空冷冻干燥箱中干燥。

所述的步骤二中，胶原蛋白为动物源胶原蛋白或类人胶原蛋白；

所述的步骤二中，糖类物质为海藻糖或蔗糖。

所述的步骤五中，乳化的搅拌速度为300-500 rpm/min，乳化时间为5-15分钟，CaCl₂溶液的加入速度为20 mL/s。

所述的步骤六中，离心收集微胶囊的条件为350 g，10分钟，4℃；

所述的步骤六中，真空冷冻干燥的条件为-20℃预冻2小时，然后在-50℃、真空度为50-100毫托的真空冷冻干燥箱中干燥12 小时。

所述的一种双歧杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于：

由以下步骤实现：

步骤一：在37℃的温度条件下，将活化的双歧杆菌在液体培养基中厌氧培养24 小时，离心收集菌体，用0.85%的生理盐水洗涤制备菌悬液；

步骤二：制备保护剂，每1000 mL保护剂添加有1.23 g类人胶原蛋白、11.50 g海藻糖、以及4.65 mL甘油，其余为蒸馏水；

步骤三：将经过灭菌处理的保护剂与菌悬液按2:1的体积比混合均匀，静置30分钟，在-20℃的温度条件下预冻2 小时，然后在-50℃、真空度为75毫托的真空冷冻干燥箱中干燥48小时，制备得到冻干菌粉；

步骤四：向质量分数为1.5%的海藻酸钠溶液中加入0.1 g冻干菌粉，冻干菌粉与海藻酸钠质量比为1∶4，混合均匀后得到菌胶混合液；

步骤五：将菌胶混合液逐滴加入到含有0.2%的吐温-80的大豆油中，菌胶混合液与大豆油的体积比为1∶5，乳化并快速加入到摩尔浓度为0.1 mol/L的氯化钙溶液中，静置30分钟；乳化的搅拌速度为400 rpm/min，乳化时间为10分钟，CaCl₂溶液的加入速度为20 mL/s；

步骤六：离心收集微胶囊，用质量分数为0.85%的生理盐水洗涤，将制备好的微胶囊置于真空冷冻干燥箱中干燥；离心收集微胶囊的条件为350 g，10分钟，4℃；真空冷冻干燥的条件为-20℃预冻2小时，然后在-50℃、真空度为75毫托的真空冷冻干燥箱中干燥12 小时。

如所述的一种双歧杆菌微胶囊。

本发明具有以下优点：

本发明的双歧杆菌微胶囊具有耐胃酸性、耐胆盐性和肠溶性的优点，菌体的存活率高，制备方法简单，实用性强，便于工业化大生产；微胶囊的贮藏稳定性良好，解决了益生菌制剂保藏期短的问题。

附图说明

图1为双歧杆菌微胶囊人工胃液的耐受性测试结果。

图2为菌粉人工胆盐的耐受性测试结果。