[发明专利]一种双歧杆菌微胶囊及其制备方法

权利要求书

1.一种双歧杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于：

由以下步骤实现：

步骤一：在37℃的温度条件下，将活化的双歧杆菌在液体培养基中厌氧培养24 小时，离心收集菌体，用0.85%的生理盐水洗涤制备菌悬液；

步骤二：制备保护剂，每1000 mL保护剂添加有1.23 g胶原蛋白、11.50 g糖类物质和4.65 mL甘油，其余为蒸馏水；

步骤三：将经过灭菌处理的保护剂与菌悬液按2:1的体积比混合均匀，静置30分钟，在-20℃的温度条件下预冻2 小时，然后在-50℃、真空度为50-100 毫托的真空冷冻干燥箱中干燥48小时，制备得到冻干菌粉；

步骤四：向质量分数为1-2%的海藻酸钠溶液中加入0.1 g冻干菌粉，冻干菌粉与海藻酸钠质量比为1∶（3-5），混合均匀后得到菌胶混合液；

步骤五：将菌胶混合液逐滴加入到含有0.2%的吐温-80的大豆油中，菌胶混合液与大豆油的体积比为1∶5，乳化并快速加入到摩尔浓度为0.1 mol/L的氯化钙溶液中，静置30分钟；

步骤六：离心收集微胶囊，用质量分数为0.85%的生理盐水洗涤，将制备好的微胶囊置于真空冷冻干燥箱中干燥。

2.根据权利要求1所述的一种双歧杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于：

所述的步骤二中，胶原蛋白为动物源胶原蛋白或类人胶原蛋白；

所述的步骤二中，糖类物质为海藻糖或蔗糖。

3.根据权利要求2所述的一种双歧杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于：

所述的步骤五中，乳化的搅拌速度为300-500 rpm/min，乳化时间为5-15分钟，CaCl₂溶液的加入速度为20 mL/s。

4.根据权利要求3所述的一种双歧杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于：

所述的步骤六中，离心收集微胶囊的条件为350 g，10分钟，4℃；

所述的步骤六中，真空冷冻干燥的条件为-20℃预冻2小时，然后在-50℃、真空度为50-100毫托的真空冷冻干燥箱中干燥12 小时。

5.根据权利要求4所述的一种双歧杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于：

由以下步骤实现：

步骤一：在37℃的温度条件下，将活化的双歧杆菌在液体培养基中厌氧培养24 小时，离心收集菌体，用0.85%的生理盐水洗涤制备菌悬液；

步骤二：制备保护剂，每1000 mL保护剂添加有1.23 g类人胶原蛋白、11.50 g海藻糖、以及4.65 mL甘油，其余为蒸馏水；

步骤三：将经过灭菌处理的保护剂与菌悬液按2:1的体积比混合均匀，静置30分钟，在-20℃的温度条件下预冻2 小时，然后在-50℃、真空度为75毫托的真空冷冻干燥箱中干燥48小时，制备得到冻干菌粉；

步骤四：向质量分数为1.5%的海藻酸钠溶液中加入0.1 g冻干菌粉，冻干菌粉与海藻酸钠质量比为1∶4，混合均匀后得到菌胶混合液；

步骤五：将菌胶混合液逐滴加入到含有0.2%的吐温-80的大豆油中，菌胶混合液与大豆油的体积比为1∶5，乳化并快速加入到摩尔浓度为0.1 mol/L的氯化钙溶液中，静置30分钟；乳化的搅拌速度为400 rpm/min，乳化时间为10分钟，CaCl₂溶液的加入速度为20 mL/s；

步骤六：离心收集微胶囊，用质量分数为0.85%的生理盐水洗涤，将制备好的微胶囊置于真空冷冻干燥箱中干燥；离心收集微胶囊的条件为350 g，10分钟，4℃；真空冷冻干燥的条件为-20℃预冻2小时，然后在-50℃、真空度为75毫托的真空冷冻干燥箱中干燥12 小时。

6.如权利要求1所述的一种双歧杆菌微胶囊。