[发明专利]基于重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶的真核细胞凝集反应的流感病毒抗体检测方法

权利要求书

1.一种基于重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶的真核细胞凝集反应的流感病毒抗体的检测方法，其特征在于所述方法是将流感病毒血凝素基因和神经氨酸酶基因克隆后转染真核细胞，使真核细胞表面重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶蛋白，以此为凝集反应基质与待检样品中的流感病毒血凝素抗体和神经氨酸酶抗体结合，发生凝集反应，根据是否发生凝集反应来检测待检样品中的流感病毒抗体。

2.根据权利要求1所述的基于重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶的真核细胞凝集反应的流感病毒抗体的检测方法，其特征在于所述凝集反应基质为天然的重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶的真核细胞，或者是经过胰酶处理、机械分散、酶解分散、固定剂固定、稳定剂处理、防腐剂处理的方法同时或选择性处理后的重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶的真核细胞。

3.根据权利要求1所述的基于重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶的真核细胞凝集反应的流感病毒抗体的检测方法，其特征在于所述重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶的真核细胞为同时共同重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶，或者分别重组表达流感病毒血凝素的真核细胞与重组表达神经氨酸酶的真核细胞的混合。

4.根据权利要求1所述的基于重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶的真核细胞凝集反应的流感病毒抗体的检测方法，其特征在于所述真核细胞表面重组表达的流感病毒血凝素和神经氨酸酶蛋白为完整全长的流感病毒血凝素和神经氨酸酶蛋白，或流感病毒血凝素蛋白和神经氨酸酶的一部分，或流感病毒血凝素和神经氨酸酶的抗原表位，或将流感病毒血凝素和神经氨酸酶蛋白全长或部分肽段中的部分氨基酸进行突变或修饰，或者是流感病毒血凝素和神经氨酸酶蛋白与其它蛋白、多肽、肽段进行融合表达或共同独立表达。

5.根据权利要求1所述的基于重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶的真核细胞凝集反应的流感病毒抗体的检测方法，其特征在于所述重组表达为瞬时表达或稳定表达。

6.根据权利要求1所述的基于重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶的真核细胞凝集反应的流感病毒抗体的检测方法，其特征在于所述真核细胞表面重组表达的血凝素为甲型流感病毒的H1、H2、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H9、H10、H11、H12、H13、H14、H15、H16亚型、乙型流感病毒或丙型流感病毒的血凝素。

7.根据权利要求1所述的基于重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶的真核细胞凝集反应的流感病毒抗体的检测方法，其特征在于所述真核细胞表面重组表达的神经氨酸酶蛋白为甲型流感病毒的N1、N2、N3、N4、N5、N6、N7、N8、N9亚型、乙型流感病毒或丙型流感病毒的神经氨酸酶。

8.根据权利要求1所述的基于重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶的真核细胞凝集反应的流感病毒抗体的检测方法，其特征在于所述流感病毒血凝素抗体和神经氨酸酶抗体为IgG、IgM、IgA、IgE、IgD中的一种或几种的混合物。

9.根据权利要求1所述的基于重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶的真核细胞凝集反应的流感病毒抗体的检测方法，其特征在于所述真核细胞为酵母、哺乳动物细胞、昆虫细胞或其它真核细胞，重组表达的流感病毒血凝素位于细胞膜或细胞壁表面。

10.根据权利要求1～9中任意一条权利要求所述的基于重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶的真核细胞凝集反应的流感病毒抗体的检测方法，其特征在于所述真核细胞表面表达的流感病毒血凝素和神经氨酸酶的比例为1∶19～19∶1。