[发明专利]一种手足口病病毒疫苗

说明书

技术领域

本发明属于人用疫苗的技术领域。本发明公开了一种能预防手足口病病毒EV71感染的灭活疫苗的制备及应用方法。

技术背景

手足口病(Hand-foot-mouth disease，HFMD)是肠道病毒引起的儿童期常见传染病之一，多发生于5岁以下的婴幼儿，可引起发热和手足、口腔等部位的皮疹、溃疡，个别患者可引起心肌炎、肺水肿、脑炎等致命性并发症。可引发手足口病的肠道病毒有20多种，柯萨奇病毒(CoxAsckie virus)A16型(CoxA16)和EV71是最常见的两种。

已知引起手足口病(HFMD)的病毒型别很多，均属于小核糖核酸病毒科(Picorna)人肠道病毒属的病毒，其型别有CoxA5、A10、A16、A19型及EV71型和新肠道病毒，最常见的型别为CoxA16及EV71型。有关资料表明，HFMD的病原体经历了较大的变迁。1957年在加拿大流行时首次分离出CoxA16，1959年英国、美国加利福尼亚也发生流行，数年后的报导几乎都是由CoxA16引起HFMD流行。1972年肠道病毒71型(EV 71)在美国被首次确认，此后EV71感染与CoxA16感染交替出现，成为手足口病的主要病原体。日本从1968-1974年散发HFMD病人仍以CoxA16分离阳性率最高，病原学研究证实日本HFMD的流行是由CoxA16及其变异株和EV71型交替出现造成的，有时也可同时出现，但以其中1个型为主。实验室研究证明，各地分离的CoxA16野病毒与实验室保存的标准毒株在血清学上有一定差异，而每次大流行中分离的病毒株其性状也不完全一致，说明病毒在传播过程中出现了变异。1972-1973年、1986年和1999年澳大利亚均发生过EV71流行，重症病人大多伴有中枢神经系统症状，一些病人还有严重的呼吸系统症状。

20世纪70年代中期，保加利亚、匈牙利相继爆发以中枢神经系统症状为主要临床特征的EV71流行，仅保加利亚就超过750例发病，149人致瘫，44人死亡。英国1994年4季度爆发了一起遍布英格兰威尔士由CoxAl6引起的手足口病流行，监测哨点共观察到952个病例，为该国有记录以来的最大一次。患者大多1-4岁。该国1963年以来的流行病资料数据显示，该病流行的间隔为2-3年。意大利、法国、荷兰、西班牙、罗马尼亚、巴西、加拿大、德国等国家也经常发生由各型柯萨奇、埃可病毒和EV71引起的手足口病。

20世纪90年代后期，EV71开始肆虐东亚地区。1997年以来，EV71感染为主的手足口病在马来西亚、台湾、新加坡等地大规模爆发流行，并发中枢神经系统症状而导致死亡病例增多，引起世界各国关注和警惕。1997年4-8月马来西亚共有2628例发病，4～6月死亡29例。

1998年EV71感染在我国台湾省引发大量手足口病和疱疹性咽峡炎，在6月和10月两次流行中，共监测到129106例病例，重症病人405例，死亡78例，大多为5岁以下的儿童，并发症包括脑炎、无菌性脑膜炎、肺水肿或肺出血、急性软瘫和心肌炎。

我国大陆地区自1981年在上海始见本病，以后北京、河北、天津、福建、吉林、山东、湖北、西宁、广东等十几个省市均有报导。

1983年厦门市曾发生手足口病流行，用猴肾细胞等从患者标本中分离出柯萨奇A16病毒。同年天津也发生7000余病例，经过2年散发流行，1986年又出现爆发，在托儿所和幼儿园2次爆发的发病率分别达2.3％和1.9％。1995年3月至9月，丹东地区暴发手足口病，幼儿园中发病较多，家庭中亦有散在发病。门诊患者368例，5月及7月两个发病高峰期，每个高峰期持续半个月左右。此外，1995年中国科学院武汉病毒学研究所从手足口病人中分离出EV71病毒，1998年深圳市卫生防疫站也从手足口病患者中分离出2株EV71病毒。

2000年5--8月山东省招远市暴发了小儿手足口病大流行。在3个多月里，招远市人民医院接诊患儿1698例。其中男1025例，女673例，男女之比为1.5∶1。年龄最小5个月，最大14岁。首例发生于5月10日，7月份达高峰，末例发生于8月28日。128例住院治疗患儿，平均住院天数5.1天。其中3例合并急性心肌炎死亡。

2007年山东省临沂市、济宁市发生大面积的手足口病流行，未波及到全国，2008年3月份安徽阜阳市开始大量出现EV71引起的手足口病病人，累计发病人数4000多人，截至到2008年5月份，全国各省市均有大规模的流行，累计发病人数超过17万人，卫生部于2008年的5月份已将手足口病列为丙类法定上报的传染病，足见手足口病的危害日渐严重，已经引起了我国各级政府的高度重视。