[发明专利]文心兰花梗芽组培用的培养基和组培苗繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物生物技术中组培苗(试管苗)繁殖技术，具体而言，涉及一种文心 兰组培用的培养基及组培苗繁殖方法。

技术背景

文心兰是兰科文心兰属(Oncidium)植物的总称，该属植物原生种多达几百种， 但用于观赏的种类仅有几个。通过种间或与邻近属间种类的杂交，现已培育出众多观赏 价值高和商业价值大的杂交品种，尤其是罗汉文心兰(Onc.Aloha Iwanaga)，蜜糖文心 兰(Onc.Swcct Sugar)，罗斯文心兰(Onc.Gower Ramsey)，金西文心兰(Onc.Kinsei)， 沃尔卡诺女王文心兰(Onc.Volcano Queen)和香水文心兰(Onc.Sharab baby“sweet  france”)在我国花卉市场倍受青睐，是我国兰花产业的重要组成部分。

文心兰传统的繁殖方法是分株或播种繁殖，由于分株繁殖系数低，且播种的实生苗变异 大等缺点，使传统繁殖方法繁殖文心兰不能满足生产的需求。利用组织培养方法开辟了一条 既能大量生产文心兰种苗、又能保持该种苗性状稳定的途径。迄今为止，国内外对文心兰组 织培养进行了许多研究，分别在诱导文心兰丛生芽、原球茎或类原球茎(曾宋君等，2004， 专利号ZL 200410077727.6)和体细胞胚胎形成3个方面，开展了文心兰种苗快速繁殖的研究。 其中，诱导文心兰培养物形成原球茎或类原球茎的研究备受关注。李文玲(2004)取罗汉文 心兰幼苗侧芽的茎尖，培养在添加适宜的植物生长调节剂的MS培养基上，诱导外植体形成类 原球茎；崔广荣(2004)在MS培养基上诱导金西文心兰试管苗的茎尖分化为类原球茎；Chen (2000)将蜜糖文心兰花梗节间培养在1/2MS培养基上，诱导花梗形成愈伤组织，再诱导愈 伤组织分化为类原球茎；魏翠华(2007)以蜜糖文心兰顶芽和侧芽生长的小苗为材料，研究 了改良1号，改良KC，MS培养基对类原球茎分化的影响；杨金凤(2009)、郑维全(2009) 各采用1/2MS和MS基本培养基与适宜植物生长调节剂，分别诱导蜜糖文心兰侧芽茎尖分化类 原球茎。对于罗斯文心兰来说，侧芽茎尖和带2～3个花蕾的花穗培养在MS培养基上(陈兴贻， 1989)，假球茎茎段培养在MS和VW培养基上(Bagde等，1997；Kanika等，2003)，茎尖和带 2花芽花梗茎段培养在MS和N₆培养基上(彭晓明等，2000)，茎尖胚性愈伤组织培养在MS培 养基上(Jheng等，2006)，无菌幼苗茎尖培养在1/2MS培养基上(张超等，2008)，分别在各 培养基中添加适宜的植物生长调节剂诱导下形成类原球茎。

综上所述，通过原球茎或类原球茎途径繁殖文心兰杂种品种所使用过的培养基是VW、 改良1号，改良KC、N₆、1/2MS和MS；使用过的外植体多数为幼苗侧芽茎尖、组培苗茎尖， 少数为花穗、带花芽花梗茎段和假球茎茎段，而具有100～150朵花的文心兰花梗芽外植体未 得到充分利用；研究数据表明文心兰原球茎的增殖率尚低于不定芽的，例如在N₆和MS培养 基上不定芽的增殖率高达450％，而原球茎的增殖率较低，为250％(彭晓明等，2000)。明 显可见，从利用花梗芽外植体和提高原球茎增殖率方面进行组培技术的改进，可以使提高文 心兰通过原球茎繁殖途径繁殖组培苗的效率，促进文心兰种苗的产业化生产。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于克服上述现有技术中的不足，而提出一种文心兰杂种品 种组培用的培养基及组培苗繁殖方法，使用该培养基及方法繁殖文心兰杂种品种种苗，能诱 导罗汉文心兰(Onc.Aloha Iwanaga)，蜜糖文心兰(Onc.Swcct Sugar)和香水文心兰(Onc. Sharab Baby“sweet france”)等品种花梗芽形成愈伤组织及其原球茎的分化，在继代增殖培养过 程中，原球茎的增殖可达到5～8倍，同时原球茎相继萌发生长为组培苗。本发明不但减少了 因取茎尖外植体引起的母株损失、或减少了从培养组培苗后再取茎尖诱导原球茎的组培环节， 而且提高了原球茎的增殖率，加快文心兰组培苗的繁殖速度。

本发明所提供的技术方案是：

一种文心兰花梗芽组培用的培养基，用于诱导花梗芽愈伤组织及其原球茎分化和组培苗 的生长，包含下列成分：

(1)大量元素成分