[发明专利]微生物溶菌酶在预防猪疾病的药物及添加剂中的应用方法

说明书

技术领域

本发明涉及畜牧行业，尤其涉及一种微生物溶菌酶在预防猪疾病的药物及添加剂中的应用方法。

背景技术

仔猪腹泻是养猪生产中的一种典型的多因素疾病，据统计，仔猪腹泻的发病率为35％，其间接损失又表现在治愈仔猪生长发育迟缓，饲料转化率低，严重威胁养猪业的发展。自2006年5月以来，在全国各地先后爆发流行猪高热病，引起大批猪只发病死亡，造成重大的经济损失。直至目前，高热病仍在全国22个省份的猪群中发生流行，危害猪只的健康生长，威胁着养猪业的发展。抗生素在养殖中的使用所带来的不良后果大家都已充分认识。许多专家都认为在全国很多地区广泛流行的“猪高热病”的一个重要原因是猪的免疫力低下，抗病力低，而长期地、大剂量地使用抗生素是导致猪免疫力低下的一个重要原因。

发明内容

本发明的目的在于提供一种微生物溶菌酶在预防猪疾病的药物及添加剂中的应用方法，利用该方法得到的药物和添加剂能有效抗菌，治疗仔猪的细菌性疾病、促生长、可应用、提高猪免疫力，而且无残留、无污染。

为了实现上述目的本发明采用的技术方案如下：

本发明微生物溶菌酶在预防猪疾病的药物及添加剂中的应用方法，在药物和添加剂中加入溶菌酶，并且保证浓度在300ppm。

本发明的另一个技术方案如下：

本发明微生物溶菌酶在预防猪疾病的药物及添加剂中的应用方法，在药物和添加剂中加入溶菌酶，并且保证仔猪每天采食溶菌酶1-2g。

本发明的再一个技术方案如下：

本发明微生物溶菌酶在预防猪疾病的药物及添加剂中的应用方法，在药物和添加剂中加入溶菌酶，保证浓度在300ppm，同时添加氟本尼考，溶菌酶配比氟本尼考的比例为2∶1～1∶1。

本发明的有益效果如下：

本发明有效治疗猪的细菌性疾病及高热病，缓解症状，显著提高猪的免疫力，减缓应激反应，改善维护胃肠道菌群平衡。疗效好、安全性高，成本低廉，无耐药性、无药物残留、无毒副作用、是绿色环保的活性物质。

具体实施方式

溶菌酶是能溶解细菌细胞壁的一种酶，是一类物质的的总称。作为非特异性免疫的重要成员，溶菌酶在防御外源微生物入侵方面发挥重要的作用，其在动物的免疫细胞和巨噬细胞中含量比较高。溶菌酶对革兰氏阳性菌、好气性孢子形成的菌、枯草杆菌、耐辐射微球菌均具有良好的分解作用，对大肠杆菌、普通变球菌和副血性弧菌等革兰氏阴性菌也具有溶解作用。基于此，本发明将溶菌酶添加到用于预防猪疾病的药物和添加剂中，来预防猪的细菌性疾病。

本专利所用的溶菌酶的要求为：通过药敏试验，在100ppm时应有明显的抑菌圈，即抑菌圈的直径＞10mm。药敏试验方法如下：

做不同细菌的药敏试验可选择不同的培养基，如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦糠凯培养基。做沙门氏菌可选择血清培养基。

一、一般LB培养基的配制

1、液体培养基的配制

蛋白胨1g、NaCl 1g、酵母提取物0.5g(建议选用国外公司产品)溶于100ml水中。

2、固体培养基的配制

在液体培养基的基础上每100ml中添加琼脂1.7g或琼脂粉2g。

二、灭菌

整个实验过程中所用的培养基、平板、枪头、棉签、生理盐水以及缓冲溶液均需要灭菌。

三、操作过程

1、将指示菌(大肠杆菌、沙门氏菌等等)从培养液(基)中接种于平板活化培养，待菌落长出后在平板上挑选典型菌落接种于试管中的液体培养基中培养4-6小时后比浊。

2、用涂菌棒(或者灭菌棉签)将待检细菌混悬液涂抹于平皿培养基表面，要求涂布均匀致密。

3、以无菌操作将灭菌的不锈钢小管(也可用玻璃管、瓷管)，放置在培养基上打孔，将孔中的培养基用针头挑出，并以火焰封底，使培养基能充分的与平皿融合(以防药液渗漏，影响结果)。

4、将配制好的待测样品液80微升加入样孔中，样品加完后放入30-37℃的培养箱中培养12-18小时后观察结果。

注意：试验的过程在无菌的条件下操作。

四、溶菌酶样品液的配制

1、粉状样品的配制：

取溶菌酶样品用灭菌好的生理盐水逐级稀释到浓度梯度为300ppm，200ppm，100ppm，50ppm然后分别取80微升稀释好的溶液置于样品孔中。(注：在温度较低的情况下，可能会出现稍微的不溶的情况，可加热至35-40℃即可溶解)

2、注意事项