[发明专利]过山蕨有效成分及其提取方法和用途

说明书

技术领域：

本发明属于医药技术领域，涉及中草药过山蕨的有效成分提取方法和用途，以及过山蕨有效成分制剂的生产加工方法。 

背景技术：

过山蕨(Camptosorus sibiricus Rupr.)，又名马蹬草，还阳草，过桥草，为铁角蕨科，过山蕨属多年生草本植物。本属全世界共两种，中国产一种。过山蕨是一种传统草药，民间用于治疗外伤出血，子宫出血，血栓闭塞性脉管炎，肾炎，神经性皮炎，脑栓塞引起的偏瘫以及糖尿病并发症等，具有确切疗效。实验表明，该草药毒性很小，对血压无明显影响，长期给药对家兔肝功能未见不良影响。其有效成分的提取及利用其有效成分生产加工成制剂未有报道。 

发明内容：

本发明的目的在于提供过山蕨有效成分的提取方法，以及利用其有效成分生产加工数种制剂，将其作为治疗血栓闭塞性脉管炎，肾炎，外伤出血，子宫出血，神经性皮炎，脑栓塞引起的偏瘫以及糖尿病并发症的药物。 

过山蕨有效成分组成如下： 

本发明是是通过如下方案实现的：所述过山蕨有效成分的制备方法分 四种： 

方法1：取原药材去杂后，加15至30倍量水煎煮不少于两次，每次提取时间不少于1小时，提取液浓缩至药液体积的五分之一至二十分之一，在0-10℃下低温静置6-24小时至沉淀完全，除去沉淀，取上清液加乙醇沉淀1-2次，控制提取液中乙醇浓度在50％-90％，在0-10℃下低温静置12-48小时至沉淀完全，再次过滤，滤液回收乙醇至无醇味，所得上清液经大孔树脂(HPD 100或D101)进行分离纯化，分别以水，5％-30％乙醇，30％-60％乙醇，60％-95％乙醇洗脱，5％-30％乙醇洗脱物为有效成分组1，30％-60％乙醇洗脱物为有效成分组2，60％-95％乙醇洗脱物为有效成分组3，三者按折合生药材量1∶1∶1组合为过山蕨有效提取物。 

方法2：取原药材去杂后，加15至30倍量的5％-95％的乙醇煎煮不少于两次，每次提取时间不少于1小时，提取液浓缩至药液体积的五分之一至二十分之一，在0-10℃下低温静置12-24小时至沉淀完全，除去沉淀，所得上清液经大孔树脂(HPD 100或D101)进行分离纯化，分别以水，5％-30％乙醇，30％-60％乙醇，60％-95％乙醇洗脱，5％-30％乙醇洗脱物为有效成分组1，30％-60％乙醇洗脱物为有效成分组2，60％-95％乙醇洗脱物为有效成分组3，三者按折合生药材量1∶1∶1组合为过山蕨有效提取物。 

方法3：取原药材去杂后，加15至30倍量的5％-95％的乙醇煎煮不少于两次，每次提取时间不少于1小时，提取液浓缩至药液体积的五分之一至二十分之一，在0-10℃下低温静置12-24小时至沉淀完全，除去沉淀，取上清液分别用石油醚(或环己烷、正己烷)、乙酸乙酯、正丁醇萃取两次以上至萃取完全。回收溶媒，所得正丁醇萃取层经大孔树脂(HPD 100或D101)纯化，分别以水，5％-95％乙醇，乙醇洗脱，5％-95％乙醇洗脱物为有效成分组分1，乙酸乙酯萃取层为有效成分组2，二者按折合生药材量1∶1组合为过山蕨有效提取物。 

方法4：取原药材去杂后，加15至30倍量水煎煮不少于两次，每次提取时间不少于1小时，提取液浓缩至药液体积的五分之一至二十分之一，在0-10℃下低温静置6-24小时至沉淀完全，除去沉淀，取上清液分别用石油醚(或环己烷、正己烷)、乙酸乙酯、正丁醇萃取两次以上至萃取完全。回收溶媒，所得正丁醇萃取层经大孔树脂纯化，分别以水，5％-95％乙醇，乙醇洗脱，5％-95％乙醇洗脱物为有效成分组分1，乙酸乙酯萃取层为有效成分组2，二者按折合生药材量1∶1组合为过山蕨有效提取物。 

所得过山蕨有效成分提取物中，总黄酮含量为1％-35％，总皂苷含量为1％-25％，总酚酸含量为1％-3％。 

由上述方法可见，过山蕨有效成分提取物由总黄酮、总皂苷和总酚酸组成，可通过上述四种方法制备，可简述为方法一：水提-水沉-醇沉-大孔树脂分段纯化；方法二：醇提-水沉-大孔树脂分段纯化；方法三：醇提-溶剂分段萃取-大孔树脂纯化；方法四：水提-溶剂分段萃取-大孔树脂纯化。 

本发明所述提取物具有抗氧化、清除自由基、醛糖还原酶抑制、扩张血管等活性，可用于治疗血栓闭塞性脉管炎、糖尿病性肾炎、外伤出血等症 的治疗。利用本发明获得的过山蕨有效成分提取物中的部分单体化合物具有显著的抗氧化、清除自由基、醛糖还原酶抑制的活性。 

本发明的优点如下：