所述试剂盒包括一组B族链球菌荧光定量PCR检测引物和探针,所述引物及探针包括GBS扩增引物对GBS‑F和GBS‑R,GBS检测探针GBS‑P,内参引物对β‑actin‑F和β‑actin‑R,内参探针β‑actin‑P;所述GBS‑F、GBS‑R、GBS‑P、β‑actin‑F、β‑actin‑R和β‑actin‑P的核苷酸序列分别依次如SEQ ID NO1~SEQ ID NO6所示。本发明所提供的试剂盒能从成分复杂的样本中检测出GBS,还能检测单拷贝的模板,得到更广的线性范围,降低了由于扩增产物污染而导致的假阳性,具有灵敏度高、特异性强的优点。
本发明属于医药领域,具体涉及一种针对所有GBS血清型的多表位亚单位疫苗。本发明首先提供一种针对所有GBS血清型的多表位嵌合蛋白MVSA,所述的多表位嵌合蛋白MVSA的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示。小鼠体内主动免疫保护试验显示,MVSA可为小鼠抵抗致死量GBS感染提供100%保护率。同时小鼠被动免疫保护试验显示,提前注射MVSA抗体能明显的降低GBS攻毒后小鼠的脏器载菌量及脏器的促炎细胞因子水平,且为小鼠抵抗致死量GBS感染提供100%保护率。在体外,MVSA抗体可明显抑制不同血清型GBS的生长。因此,MVSA作为一种多表位疫苗,刺激机体产生的保护性抗体能抵御GBS的感染,具有良好的应用前景。
本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及一种链球菌广谱嵌合裂解酶GBS‑V12b及其编码基因和应用。一种链球菌广谱嵌合裂解酶GBS‑V12b,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;一种链球菌广谱嵌合裂解酶GBS‑V12b编码基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明公开的链球菌广谱嵌合裂解酶GBS‑V12b可用于杀灭多种链球菌和葡萄球菌,特别是肺炎链球菌、化脓链球菌、猪链球菌、无乳链球菌、停乳链球菌、变形链球菌、海豚链球菌等以及多种肠球菌和金黄色葡萄球菌;GBS‑V12b稳定性好,对高浓度的NaCl不敏感,重组蛋白GBS‑V12b能很好的在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,高剂量的GBS‑V12b没有明显的细胞毒性。因此,GBS‑V12b能单独,或者作为添加剂用于多种链球菌的控制以及治疗由这些菌导致的感染,具有广泛的应用前景。
本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及一种广谱新型嵌合裂解酶GBS‑PlySb及其编码基因和应用。一种广谱新型嵌合裂解酶GBS‑PlySb,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;一种广谱新型嵌合裂解酶GBS‑PlySb编码基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明采用基因拼接的手段,构建了一个全新的嵌合裂解酶,可用于杀灭多种链球菌和葡萄球菌,特别是肺炎链球菌、化脓链球菌、猪链球菌、无乳链球菌、停乳链球菌、变形链球菌、海豚链球菌等以及多种肠球菌和金黄色葡萄球菌;GBS‑PlySb稳定性好,对高浓度的NaCl不敏感,重组蛋白GBS‑PlySb能很好的在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,高剂量的GBS‑PlySb没有明显的细胞毒性。因此,GBS‑PlySb能单独,或者作为添加剂用于多种链球菌的控制以及治疗由这些菌导致的感染,具有广泛的应用前景。