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[发明专利]一种具有免疫保护作用的迟缓爱德华菌外膜蛋白TolC-CN201810133427.7有效
发明人：张志强;高桂生;吴同垒;史秋梅;肖丽荣;苏硕青 -专利权人：河北科技师范学院
申请日： 2018-02-09 - 公布日： 2021-07-20 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种具有免疫保护作用的迟缓爱德华菌外膜蛋白TolC具在亚单位疫苗和核酸疫苗中的应用，利用原核表达方法制备得到该重组蛋白，制备所述迟缓爱德华菌外膜蛋白TolC的步骤具体包括，pMD18‑T‑tolC载体的构建，重组表达载体体pET‑32a‑tolC的构建，迟缓爱德华菌外膜蛋白TolC的原核表达及验证，迟缓爱德华菌外膜蛋白TolC的验证，迟缓爱德华菌外膜蛋白TolC的可溶性分析及纯化；利用Westernblot检测迟缓爱德华菌外膜蛋白TolC，以及使用动物实验评估其免疫保护力。通过本发明公开的具有免疫保护作用的迟缓爱德华菌外膜蛋白TolC，为进一步研制迟缓爱德华菌亚单位疫苗和核酸疫苗靶点选择奠定基础。
一种具有免疫保护作用迟缓爱德华膜蛋白 tolc

[发明专利]表达鸡大肠杆菌外膜蛋白重组菌及其构建方法与应用-CN201510082560.0在审
发明人：王连民;刘珂飞;孙珊珊 -专利权人：天津生机集团股份有限公司
申请日： 2015-02-16 - 公布日： 2015-06-10 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种表达鸡大肠杆菌外膜蛋白重组菌及其构建方法与应用。本发明表达鸡大肠杆菌外膜蛋白重组菌导入了鸡大肠杆菌外膜蛋白操纵子基因重组质粒，通过如下步骤构建：1鸡大肠杆菌外膜蛋白结构基因及各功能性基因的PCR扩增；2重组质粒的构建。此外，本发明还公开了一种鸡大肠杆菌重组菌外膜蛋白基因工程亚单位疫苗。本发明的表达鸡大肠杆菌外膜蛋白重组菌，其表达产物产量高，成本低，易于实现疫苗产业化生产。
表达大肠杆菌膜蛋白重组及其构建方法应用

[发明专利]一种大口黑鲈源嗜水气单胞菌免疫原性外膜蛋白的鉴定方法-CN202110575565.2在审
发明人：袁翔雨;张雅琪;辛怡娆;杨顺;费辉 -专利权人：浙江理工大学
申请日： 2021-05-26 - 公布日： 2021-09-14 - 主分类号： C07K16/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于大口黑鲈源嗜水气单胞菌免疫原性外膜蛋白鉴定的方法，并成功鉴定出一个嗜水气单胞菌免疫原性外膜蛋白，所述鉴定的一个大口黑鲈源嗜水气单胞菌免疫原性外膜蛋白为AHA_3793(Genebank鉴定的方法具体如下：首先制备大口黑鲈抗嗜水气单胞菌血清，然后利用抗大口黑鲈IgM抗体为工具，采用western blotting结合质谱鉴定与大口黑鲈抗嗜水气单胞菌血清的嗜水气单胞菌外膜蛋白，再经原核表达表达获得相应的重组外膜蛋白，最后再经western blotting分析重组外膜蛋白与大口黑鲈抗嗜水气单胞菌血清的反应，筛选出所述外膜蛋白。本发明鉴定方法的建立及成功鉴定的嗜水气单胞菌免疫原性外膜蛋白为针对大口黑鲈的嗜水气单胞菌亚单位疫苗研制提供新思路和新方法。
一种大口黑鲈源嗜水气单胞菌免疫原性膜蛋白鉴定方法

[发明专利]牛布鲁菌外膜蛋白Omp22、编码基因及其克隆方法和应用-CN201410261161.6有效
发明人：李向阳;宋丽华;刘凯;王学理;张显华;霍晓伟;武迎红;张翠艳;梅花;金天明 -专利权人：内蒙古民族大学
申请日： 2014-06-13 - 公布日： 2014-11-19 - 主分类号： C07K14/23 文献下载
摘要：本发明公开了一种牛布鲁菌(Bovine brucellosis)外膜蛋白Omp22基因与制备方法及其应用，涉及一种基因，尤其是涉及一种在牛布鲁菌外膜上表达的外膜蛋白Omp22基因与制备方法及其用途。提供一种牛布鲁菌外膜蛋白Omp22及其编码基因，它是编码所述外膜蛋白Omp22的核苷酸序列和氨基酸序列；提供利用重组技术制备所述Omp22基因的方法，其步骤为将编码具有所述Omp22活性多肽的纯化的核苷酸序列可操作地连于表达调控序列，形成所述Omp22表达载体，将表达载体转入宿主细胞，形成、所述外膜蛋白Omp22的重组细胞；培养重组细胞；提供牛布鲁菌外膜蛋白Omp22及编码序列的应用。
牛布鲁菌外膜蛋白 omp22 编码基因及其克隆方法应用

[发明专利]基于反向疫苗学技术筛选嗜水气单胞菌保护性抗原的方法-CN202310502568.2在审
发明人：丁祝进;张婷;张敏颖;徐泽华;赵晓恒;程汉良;许建和;陈香凝 -专利权人：江苏海洋大学
申请日： 2023-05-06 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： G16B20/20 文献下载
摘要：本发明公开了基于反向疫苗学技术筛选嗜水气单胞菌保护性抗原的方法，S1：获取致病嗜水气单胞菌全基因组核苷酸编码序列；S2：利用在线软件预测外膜蛋白的粘附性、抗原性，筛选出超过指定阈值的蛋白，然后进行蛋白种间种内同源性比对，筛选出具有良好抗原性、粘附性、种间种内保守性高的外膜蛋白作为候选抗原；S3：进行外膜蛋白保守性验证，即采用PCR及测序检测主要外膜蛋白编码基因在不同基因型嗜水气单胞菌中的分布情况及其序列相似性。利用基因组数据通过生物信息学筛选和评估潜在嗜水气单胞菌外膜蛋白作为候选抗原；采用PCR及测序检测主要外膜蛋白编码基因在不同基因型嗜水气单胞菌中的分布情况及其序列保守性。
基于反向疫苗技术筛选水气单胞菌保护性抗原方法

[发明专利]一种适于获得大量高纯度沙门氏菌外膜蛋白的提取方法与应用-CN201811356245.2有效
发明人：曾振灵;蒋红霞;杨玲;林晓玲;史海洋 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2018-11-15 - 公布日： 2021-02-19 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明公开了一种适于获得大量高纯度沙门氏菌外膜蛋白的提取方法与应用。该方法包括以下步骤：(1)将沙门氏菌外膜蛋白的基因克隆到表达载体中，然后将得到的重组表达载体导入到宿主沙门菌中，得到重组菌株；(2)将重组菌株扩大培养，再离心收集菌体并冷冻保存，得到冷冻菌体；(3)向冷冻菌体中加入蛋白裂解液，并加入苯甲基磺酰氟溶液，恒温超声破碎，收集蛋白质沉淀；(4)向蛋白质沉淀中加入外膜蛋白提取液，混匀后置于4℃条件下孵育，然后离心，收集上清液；(5)将上清液分离纯化，得到沙门氏菌外膜蛋白。本发明方法步骤简单、操作方便，适用于高纯度高活性外膜蛋白的大量提取，可同时满足蛋白活性、结构和疫苗研发等后续实验要求。
一种适于获得大量纯度沙门氏菌膜蛋白提取方法应用

[发明专利]一种外膜蛋白在制备恶性肿瘤免疫治疗药物中的应用-CN201910791274.X有效
发明人：刘智;杨祥良;石林林 -专利权人：君维安（武汉）生命科技有限公司
申请日： 2019-08-26 - 公布日： 2021-08-20 - 主分类号： A61K38/16 文献下载
摘要：本发明公开一种外膜蛋白在制备恶性肿瘤免疫治疗药物中的应用，所述外膜蛋白为阿克曼氏菌外膜蛋白，本申请提供的外膜蛋白能够降低肿瘤负荷、抑制肿瘤生长，激活T细胞相关抗肿瘤免疫应答，可应用于多种恶性肿瘤免疫治疗药物的制备
一种膜蛋白制备恶性肿瘤免疫治疗药物中的应用

[发明专利]嗜麦芽窄食单胞菌外膜蛋白A在制备细胞凋亡模型中的应用-CN202010499247.8有效
发明人：李艳;王鑫;尚学义;曾雄飞;严勇 -专利权人：中国人民解放军总医院第五医学中心
申请日： 2020-06-04 - 公布日： 2022-04-26 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了嗜麦芽窄食单胞菌外膜蛋白A在制备细胞凋亡模型中的应用。本发明发现嗜麦芽窄食单胞菌外膜蛋白A可以诱导细胞的凋亡，嗜麦芽窄食单胞菌外膜蛋白A处理细胞后，采用流式细胞学和形态学(电镜)结果证实嗜麦芽窄食单胞菌外膜蛋白A能够诱导细胞发生凋亡，嗜麦芽窄食单胞菌OmpA可以上调线粒体内凋亡蛋白的表达，下调抗凋亡蛋白的表达水平，即嗜麦芽窄食单胞菌OmpA可以使凋亡蛋白Bax表达上调，抗凋亡蛋白Bcl‑xL表达下调，引起线粒体的膜通透性发生改变，Cyt c和AIF进入胞浆
麦芽窄食单胞菌外膜蛋白制备细胞模型中的应用

[发明专利]迟缓爱德华氏菌外膜蛋白疫苗及其制备和应用-CN202110226657.X有效
发明人：李墨非;金成东;孙黎 -专利权人：中国科学院海洋研究所
申请日： 2021-03-01 - 公布日： 2022-06-24 - 主分类号： A61K39/02 文献下载
摘要：本发明涉及分子疫苗学领域，具体的说是一种迟缓爱德华氏菌外膜蛋白疫苗及其制备方法和应用。外膜蛋白疫苗含SEQ ID No.1中氨基酸所示的迟缓爱德华氏菌外膜蛋白疫苗抗原。本发明所构建的重组蛋白疫苗可以保护牙鲆应对迟缓爱德华氏菌的感染，诱导产生特异性抗体，该蛋白对鱼类免疫细胞的免疫活性具有显著促进作用。
迟缓爱德华氏菌外膜蛋白疫苗及其制备应用

[发明专利]嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白及其应用-CN201510367203.9在审
发明人：郑宗林;黄朝芳;王广军 -专利权人：郑宗林;黄朝芳
申请日： 2015-06-29 - 公布日： 2015-10-07 - 主分类号： C07K14/195 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白及其应用，所述蛋白将外膜蛋白基因片段克隆入原核表达载体pET-30a得到重组表达载体，将重组表达载体转化大肠杆菌获得重组大肠杆菌，将所述重组大肠杆菌接种于Amp抗性的LB平板培养至OD₆₀₀达0.6时，加入IPTG至终浓度为1.0mmol/L进行诱导表达，经纯化后获得嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白。本发明方法成功构建了嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白，使其可作为对鱼具有保护作用的疫苗，比较研究了嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白pompA在不同FIA作用下对斑点叉尾鮰的免疫效果。
水气单胞菌外膜蛋白基因表达蛋白及其应用

[发明专利]迟钝爱德华菌外膜蛋白0245在制备疫苗中的应用-CN201110387154.7无效
发明人：彭宣宪;李惠;刘洋;张海丽 -专利权人：中山大学
申请日： 2011-11-29 - 公布日： 2012-04-04 - 主分类号： A61K39/02 文献下载
摘要：本发明公开了迟钝爱德华菌外膜蛋白0245在制备疫苗中的应用。实验研究发现，迟钝爱德华菌外膜蛋白0245具有明显的免疫保护作用，能够有效抵抗迟钝爱德华菌的感染，可作为亚单位疫苗的候选靶位。本发明还公开了迟钝爱德华菌外膜蛋白0245的表达及疫苗的制备方法，制备得到的疫苗对控制迟钝爱德华菌感染的免疫学防治具有十分重要的意义。
迟钝爱德华膜蛋白 0245 制备疫苗中的应用

[发明专利]一种弧菌外膜蛋白亚单位佐剂疫苗及规模化制备技术-CN201710156715.X在审
发明人：陶家发;孙承文;赖迎迢;江小燕;罗霞;赵长臣;巩华;刘春花;黄志斌 -专利权人：中国水产科学研究院珠江水产研究所
申请日： 2017-03-16 - 公布日： 2017-07-07 - 主分类号： A61K39/106 文献下载
摘要：本发明涉及一种哈氏弧菌外膜蛋白亚单位佐剂疫苗，具体涉及哈氏弧菌外膜蛋白亚单位佐剂疫苗及规模化制备技术。本发明所述哈氏弧菌外膜蛋白亚单位佐剂疫苗，包括以下组分哈氏弧菌外膜蛋白Ompk、Montanide ISA 763A(763A)佐剂。本发明还提供了所述的哈氏弧菌外膜蛋白亚单位佐剂疫苗规模化制备方法。其特征在于通过携带含有弧菌外膜蛋白Ompk基因质粒的大肠杆菌(工程菌)以500L发酵罐高密度培养与诱导表达，提取纯化得到弧菌外膜蛋白Ompk，与Montanide ISA 763A(763A)按照一定比例乳化，无菌分装，制成弧菌外膜蛋白Ompk佐剂疫苗成品。
一种弧菌膜蛋白单位佐剂疫苗规模化制备技术

[发明专利]一种嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白的制备方法-CN201510366448.X在审
发明人：郑宗林;黄朝芳;王广军 -专利权人：郑宗林;黄朝芳
申请日： 2015-06-29 - 公布日： 2015-10-07 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白的制备方法，所述方法包括以下步骤：所述蛋白将外膜蛋白基因片段克隆入原核表达载体pET-30a得到重组表达载体，将重组表达载体转化大肠杆菌获得重组大肠杆菌，将所述重组大肠杆菌接种于Amp抗性的LB平板培养至OD₆₀₀达0.6时，加入IPTG至终浓度为1.0mmol/L进行诱导表达，经纯化后获得嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白。本发明方法成功构建了嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白，使其可作为对鱼具有保护作用的疫苗，比较研究了嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白pompA在不同FIA作用下对斑点叉尾鮰的免疫效果。
一种水气单胞菌外膜蛋白基因表达蛋白制备方法

[发明专利]伤寒、副伤寒外膜蛋白疫苗-CN200610111684.8有效
发明人：孔健;蒋先敏;黄颖 -专利权人：北京绿竹生物制药有限公司
申请日： 2006-08-22 - 公布日： 2007-02-14 - 主分类号： A61K39/112 文献下载
摘要：本发明涉及从伤寒杆菌、甲型副伤寒杆菌、乙型副伤寒杆菌培养液获得的菌体中制备菌体外膜蛋白的方法以及应该外膜蛋白制备的伤寒、副伤寒外膜蛋白疫苗，动物试验表明，采用本发明的方法制备的外膜蛋白免疫试验动物后，动物可以抵御致死剂量的同种活菌的攻击，用本发明的方法制备的外膜蛋白组合成疫苗免疫动物或人，可以预防由伤寒、甲型副伤寒杆菌、乙型副伤寒杆菌引起的感染。
伤寒副伤寒膜蛋白疫苗

[发明专利]一种鳗鲡创伤弧菌和迟钝爱德华氏菌二联重组蛋白及其制备方法-CN201610351570.4有效
发明人：郭松林;胡琳琳;冯建军;林鹏 -专利权人：集美大学
申请日： 2016-05-24 - 公布日： 2020-04-21 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种鳗鲡创伤弧菌和迟钝爱德华氏菌二联重组蛋白及其制备方法。本发明的二联重组蛋白包括连接在一起的创伤弧菌外膜蛋白OmpU膜外部分和迟顿爱德华氏菌外膜蛋白OmpA膜外部分，其氨基酸序列分别包括SEQ ID NO 01的第238～456位和第467～695所示的氨基酸序列本发明将创伤弧菌的外膜蛋白OmpU膜外部分和迟顿爱德华氏菌外膜蛋白OmpA膜外部分通过基因工程手段连接在一起构建二联重组蛋白，该蛋白免疫鳗鲡后，能同时防御创伤弧菌和迟钝爱德华氏菌的感染，相比二联灭活疫苗具有更高的相对免疫保护效果和更低的毒副作用
一种鳗鲡创伤弧菌迟钝爱德华二联重组蛋白及其制备方法

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