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[发明专利]离体胃粘膜细胞分离方法及相应的纯化方法-CN03114260.5无效
发明人：宋于刚;孙凤蓬 -专利权人：宋于刚;孙凤蓬
申请日： 2003-04-21 - 公布日： 2004-10-27 - 主分类号： C12N5/06 文献下载
摘要：一种离体胃粘膜细胞分离方法及相应的纯化方法，其特征为：所述的分离方法依次包括粘膜细胞收集、溶液纯化稀释、物理因素分离三个步骤；其中，粘膜细胞收集步骤包括刮取胃粘膜上皮的操作；溶液纯化稀释步骤依次包括获得洁净粘膜上皮的初步清洗操作、为获得的洁净粘膜上皮碎末而进行的机械破碎操作、为获得粘膜细胞沉淀而进行的初步机械分离操作、以及为得到粘膜细胞悬液进行的纯化/稀释与离心分离交替操作，而且纯化/稀释与离心分离交替操作中采用了向离心分离管中所盛的粘膜细胞溶液进行通气兼搅拌方法；物理因素分离步骤是为获得粘膜细胞清液进行的过筛操作。本发明的分离方法对胃粘膜细胞伤害最轻、且简单快捷。
离体胃粘膜细胞分离方法相应纯化

[发明专利]一种复合口腔粘膜上皮细胞的口腔补片制备方法-CN201810450337.0在审
发明人：李康乐;汪文涛;葛翠兰 -专利权人：上海白衣缘生物工程有限公司
申请日： 2018-05-11 - 公布日： 2018-09-07 - 主分类号： A61L27/36 文献下载
摘要：本发明公开一种复合口腔粘膜上皮细胞的口腔补片制备方法，包括以下步骤：采用粘膜下层制备口腔补片，通过传代培养法培养口腔粘膜上皮细胞，将口腔粘膜上皮细胞接种至放有口腔补片的细胞培养皿中，37℃，5%CO2细胞培养箱中培养，培养终止后即得到复合口腔粘膜上皮细胞的口腔补片。本发明所提供的一种复合口腔粘膜上皮细胞的口腔补片制备方法，材料来源充分，能够使口腔粘膜上皮细胞在口腔补片中大量增殖，为临床上口腔粘膜大面积缺损的修复重建提供新的途径。
口腔粘膜上皮细胞口腔补片制备复合培养口腔粘膜细胞培养皿细胞培养箱材料来源传代培养口腔粘膜上皮细胞粘膜缺损下层增殖接种修复重建

[发明专利]一种检测人鼻粘膜调节性T淋巴细胞的方法-CN201210219643.6有效
发明人：李文秀;白素娟;金姝;闫佩毅;庞权 -专利权人：上海市普陀区人民医院
申请日： 2012-06-29 - 公布日： 2012-10-03 - 主分类号： G01N15/14 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，本发明公开了一种检测人鼻粘膜调节性T淋巴细胞（Treg）的方法，其包括如下步骤：1）鼻粘膜细胞的获取：将鼻粘膜刮匙的勺状末端伸入鼻腔至下鼻甲的中下端，将所述刮匙轻轻按压在粘膜表面，然后向外移动4-5mm，重复此动作2-3次，取出刮匙，可见勺状末端内有白色粘性物，获得鼻粘膜标本；2）单细胞悬液的制备：将所述鼻粘膜标本置于生理盐水中，轻轻吹打，使细胞分散混匀得到单细胞悬液；3）调节性T淋巴细胞检测：采用流式细胞术分析所述单细胞悬液的T淋巴细胞。
一种检测粘膜调节淋巴细胞方法

[发明专利]从口腔组织中培养间质干细胞的方法-CN200710009405.1无效
发明人：黄显成 -专利权人：黄显成
申请日： 2007-08-22 - 公布日： 2008-03-19 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明公开一种从口腔组织中培养间质干细胞的方法，先准备牙髓或牙龈粘膜样本，再由牙齿的牙髓组织中分离出牙髓间质干细胞或由牙龈粘膜组织中分离出牙龈粘膜间质干细胞，然后，进行细胞培养，细胞即呈现牙髓间质干细胞型态或牙龈粘膜间质干细胞型态由本发明的方法所分离出的牙髓间质干细胞与牙龈粘膜间质干细胞都具有群集能力、分化为骨质能力、分化为脂肪能力及分化为神经能力。本发明的方法降低了污染机会，且使间质干细胞易于培养与保存。
口腔组织培养间质干细胞方法

[发明专利]一种鱼类肠道粘膜细胞分离和原代培养方法-CN201010620104.4无效
发明人：叶元土;蔡春芳;张宝彤;周志刚;姚仕彬;秦杰 -专利权人：苏州大学
申请日： 2010-12-31 - 公布日： 2011-08-31 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明属于动物肠道粘膜细胞分离和培养领域，具体涉及一种鱼类肠道粘膜细胞分离和原代培养方法，包括取材和培养两个步骤：按照常规方法取出鱼的肠道，清除肠道外脂肪，然后采用下述两种方法中的任一种消化分离鱼类肠道粘膜细胞，得到含有游离粘膜细胞、细胞团的消化液：将所得含有游离粘膜细胞、细胞团的消化液，离心得到粘膜细胞和细胞团的混合物，作为原代培养的接种材料细胞；所述培养步骤中，以鱼皮胶原蛋白作为培养支持载体，以改良的DMEM采用本发明所得鱼类肠道粘膜细胞生长良好，结构和功能性标志性指标体系完善。
一种鱼类肠道粘膜细胞分离培养方法

[发明专利]自体来源的间充质干细胞向鼻粘膜样上皮细胞分化方法及试剂盒-CN201710279216.X有效
发明人：汤苏阳 -专利权人：徐子雁
申请日： 2017-04-25 - 公布日： 2021-05-07 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供一种自体来源的间充质干细胞向鼻粘膜样上皮细胞分化方法及试剂盒。本发明提供的分化方法采用自体来源丰富的脂肪间充质干细胞或其他干细胞经过分离、培养、诱导分化等步骤得到数量充足的鼻粘膜样上皮细胞，用于鼻粘膜受损患者进行鼻粘膜下细胞移植，可以对受损的鼻粘膜进行有效修复，恢复鼻粘膜生理功能、增加鼻腔容积和鼻腔阻力，阻断ENS慢性功能衰竭的发生和发展，有效缓解病人的不适症状；而用于移植的细胞来源于患者自身组织，具有取材容易、安全可靠、避免免疫反应等优点。
来源间充质干细胞粘膜上皮细胞分化方法试剂盒

[发明专利]一种测定肠粘膜上皮细胞紧密连接膜微区域脂肪酸组成的方法及其应用-CN200610005534.9无效
发明人：李秋荣;谭力;黎介寿 -专利权人：中国人民解放军南京军区南京总医院
申请日： 2006-01-10 - 公布日： 2006-08-23 - 主分类号： G01N30/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种测定肠粘膜上皮细胞紧密连接膜微区域脂肪酸组成的方法及其应用。该方法的步骤为培养人类肠粘膜上皮细胞T84细胞，破裂细胞，将肠粘膜上皮细胞紧密连接分离，采用不连续蔗糖密度梯度超速离心法分离肠粘膜上皮细胞紧密连接膜微区域，提取经分离的肠粘膜上皮细胞紧密连接膜微区域的脂肪酸该方法能够简单、有效、准确地测定肠粘膜上皮细胞紧密连接部微区域的脂肪酸组成，为深入研究肠屏障功能的机制和提升基础科学理论具有重要意义，可用于研究肠屏障功能和肠粘膜屏障损伤情况测定。
一种测定粘膜上皮细胞紧密连接区域脂肪酸组成方法及其应用

[发明专利]一种葡聚糖硫酸钠联合脂多糖诱导的小鼠原代结肠粘膜上皮细胞炎症模型的建立方法-CN201910063587.3有效
发明人：郭世宁;黎增权;晁利民;陈文谦;李岳飞;吕伟杰 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2019-01-23 - 公布日： 2021-02-19 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开一种葡聚糖硫酸钠联合脂多糖诱导的小鼠原代结肠粘膜上皮细胞炎症模型的建立方法，属于细胞炎性模型技术领域。本发明首次使用葡聚糖硫酸钠联合脂多糖作为刺激物诱导处理小鼠原代结肠粘膜上皮细胞建立细胞炎症模型，且首次使用结肠粘膜上皮细胞作为DSS联合LPS诱导炎症模型的造模细胞，通过测定细胞抑制率和细胞上清液TNF‑α，IL‑1β水平确定了葡聚糖硫酸钠和脂多糖溶液的最佳使用浓度和细胞孵育时间，操作容易、成本较低，可帮助初次进行小鼠原代结肠粘膜上皮细胞培养和细胞炎症激模型的研究人员比较顺利的完成小鼠原代结肠粘膜上皮细胞的培养和细胞炎症模型的建立
一种聚糖硫酸钠联合多糖诱导小鼠结肠粘膜上皮细胞炎症模型建立方法

[发明专利]一种药物粘膜局部使用的安全性评价方法-CN201010155153.5无效
发明人：张晓燕;李亮助;徐建青 -专利权人：复旦大学
申请日： 2010-04-22 - 公布日： 2011-04-06 - 主分类号： A61K49/00 文献下载
摘要：本发明属于传染病预防和粘膜用药安全性评价领域，涉及一种药物粘膜局部使用的安全性评价方法，尤其是一种基于细胞因子的粘膜使用的药物安全性评价方法。该评价方法通过测定给药部位粘膜的灌洗液中细胞因子的表达水平，以判断所用药物粘膜使用的安全性。本发明基于免疫活化和细胞因子调控网络的复杂性，使用了一系列细胞因子作为测定分析指标，能够准确地衡量粘膜用药物的粘膜毒性，可以快速灵敏地反映药物诱导粘膜产生炎症的情况，并能够反映粘膜局部的免疫异常活化。本发明的评价方法可以用于粘膜用候选药物的临床前安全性评价。
一种药物粘膜局部使用安全性评价方法

[发明专利]一种眼表修复膜及其制备方法-CN201811433175.6有效
发明人：凌友;杨景;刘小敏 -专利权人：广州聚明生物科技有限公司
申请日： 2018-11-28 - 公布日： 2021-12-03 - 主分类号： A61L27/36 文献下载
摘要：该制备方法包括：(1)取猪小肠空肠段，清洗，径向切开，去除粘膜层、肌膜层、浆膜层，获得猪小肠粘膜下层组织膜；(2)将步骤(1)所得猪小肠粘膜下层组织膜分别置于过氧乙酸溶液和氢氧化钠溶液中浸泡，取出清洗，获得猪小肠粘膜下层组织脱细胞基质；(3)用多巴胺溶液浸泡步骤(2)所得猪小肠粘膜下层组织脱细胞基质，获得猪小肠粘膜下层组织脱细胞基质材料。该制备方法获得的猪小肠粘膜下层组织脱细胞基质材料具有较合适的机械硬度，这样的机械硬度能保证猪小肠粘膜下层组织脱细胞基质能够很好的贴附在眼表上。
一种修复及其制备方法

[发明专利]一种抗菌抗降解的猪小肠粘膜脱细胞基质制备方法及其应用-CN201410008075.4有效
发明人：葛良鹏;邢孟秋;林保忠;刘作华;刘禄斌 -专利权人：重庆市畜牧科学院
申请日： 2014-01-08 - 公布日： 2014-04-30 - 主分类号： A61L27/36 文献下载
摘要：本发明公开了一种抗菌抗降解的猪小肠粘膜脱细胞基质制备方法，包括以下步骤：1）使用京尼平交联猪小肠粘膜脱细胞基质，然后漂洗干燥；2）将步骤1）得到的经京尼平交联的猪小肠粘膜脱细胞基质置于多巴胺溶液中浸泡，然后漂洗干燥；3）将经过步骤2）处理的猪小肠粘膜脱细胞基质置于硝酸银溶液中浸泡，然后漂洗干燥。本发明还公开了所述的抗菌抗降解的猪小肠粘膜脱细胞基质在高应力部位组织修复中的应用。本发明同时对猪小肠粘膜脱细胞基质进行了抗降解和抗菌改性，并且证明了其抗降解性能和抗菌性能均相对于天然的猪小肠粘膜脱细胞基质显著增强，仍然保持良好的生物相容性，能够在高应力部位组织修复中应用。
一种抗菌降解小肠粘膜细胞基质制备方法及其应用

[发明专利]一种鼻粘膜类器官培养基及培养方法-CN202010019555.6有效
发明人：李刚;汪珂;王显文 -专利权人：南方医科大学南方医院
申请日： 2020-01-08 - 公布日： 2022-03-22 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种鼻粘膜组织的培养基及培养方法，首次将上皮和间充质/基质成分都整合到了基于气液界面法的类器官培养系统中，通过诱导新鲜鼻粘膜上皮组织中的成体干细胞的增殖和分化，能够获得包括纤毛细胞、杯状细胞、棒状细胞和基底细胞等多种细胞组成的，接近体内粘膜结构和功能的类器官，成为具有增殖和多谱系分化能力的鼻粘膜体外模型。
一种粘膜器官培养基培养方法

[发明专利]一种仿生双层敷料及其制备方法-CN201710814871.0有效
发明人：王量;廖建贵;王文平;曹川;李世荣 -专利权人：中国人民解放军第三军医大学第一附属医院
申请日： 2017-09-12 - 公布日： 2021-07-06 - 主分类号： A61L27/60 文献下载
摘要：本发明提供了一种仿生双层敷料，包括脱细胞动物小肠粘膜下层和交联在膜层上的凝胶层，所述膜层与凝胶层共同构成呈双层结构的仿生双层敷料；其制备步骤为包括脱细胞小肠粘膜下层制备、脱细胞小肠粘膜下层粉末制备、脱细胞小肠粘膜下层溶液制备和仿生双层敷料制备步骤，将、脱细胞小肠粘膜下层溶液与交联液混合后加至脱细胞小肠粘膜下层表面，冷冻交联后得到仿生双层敷料。
一种仿生双层敷料及其制备方法

[发明专利]人嗅粘膜嗅鞘细胞分离、传代、冻存、分化技术-CN201510516055.2在审
发明人：黄红云;高文勇;肖娟 -专利权人：黄红云
申请日： 2015-08-21 - 公布日： 2015-11-18 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供了人嗅粘膜嗅鞘细胞培养、传代、冻存、分化技术。特色步骤包括：1、用含DMEM/DF12等神经营养因子配制嗅粘膜嗅鞘细胞培养基；2、鼻粘膜的获取；3、双酶组合消化。4、原代培养：加入嗅粘膜嗅鞘细胞培养基制成的细胞悬液，转移细胞到培养瓶中，在CO2恒温恒湿培养箱培养；5、传代培养：收集过滤培养基上清液，配制传代培养基；6、超低温冻存：收集过滤培养基上清液，配制专用冻存液本发明选取人上鼻甲嗅区粘膜进行培养增殖、传代、冻存、分化，能获得高纯度嗅粘膜嗅鞘细胞，该细胞具有综合神经修复作用，临床治疗研究显示，这种细胞能有效修复神经疾病和损害丧失的神经功能并改善患者的生存质量。
粘膜细胞分离传代分化技术

[发明专利]粘膜给予用疫苗组合物-CN201410042764.7在审
发明人：冈崎有道;松下恭平;浅利大介;宍户卓矢;前田佳己;大久保胜之;李文婧;堀光彦;杉山治夫 -专利权人：日东电工株式会社
申请日： 2014-01-29 - 公布日： 2014-08-06 - 主分类号： A61K39/39 文献下载
摘要：本发明涉及粘膜给予用疫苗组合物。提供包含细胞免疫诱导促进剂、且通过粘膜给予而发挥高的细胞免疫诱导效果的疫苗组合物，所述细胞免疫诱导促进剂在利用抗原的粘膜给予来进行的细胞免疫诱导中能够相对于各种抗原普遍地使用。本发明提供一种粘膜给予用疫苗组合物，其用于细胞免疫诱导，所述组合物包含（i）抗原；以及（ii）选自由TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽以及免疫调节低分子药物组成的组中的1种以上细胞免疫诱导促进剂。
粘膜给予疫苗组合

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