本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及毕赤酵母表达犬重组白蛋白及其纯化方法。本发明提供了经密码子优化后的犬白蛋白基因、表达载体、宿主菌及其应用，所述犬白蛋白基因具备如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明提供的宿主菌为包含所述犬白蛋白基因且能够高效表达犬白蛋白的毕赤酵母菌。本发明还提供了采用毕赤酵母经重组表达获得的犬白蛋白及经发酵生产的犬白蛋白的方法。本发明提供的犬白蛋白生产工艺简单、价格低廉、蛋白产率高、回收纯度高达97％以上，适用于工业化大规模生产重组犬白蛋白。
本发明提供用于检测犬副流感病毒、犬腺病毒Ⅱ型和犬支原体的引物探针组合物、试剂盒及其制备方法，所述引物探针组合物包括：针对犬副流感病毒设计的上下游引物和荧光探针，序列如SEQ ID NO.1‑3所示；针对犬腺病毒Ⅱ型设计的上下游引物和荧光探针，序列如SEQ ID NO.4‑6所示；针对犬支原体设计的上下游引物和荧光探针，序列如SEQ ID NO.7‑9所示；针对拟南芥SUC2基因设计外参的上下游引物和荧光探针，本发明可以同时检测犬副流感病毒、犬腺病毒Ⅱ型和犬支原体，且灵敏度高、特异性好。
