本发明涉及一种制备细菌菌影以及基因工程亚单位疫苗的方法,包括将INP信号序列和外源基因以及裂解盒基因E‑lysis克隆到同一个表达载体,转化细菌,其中INP的信号序列为SEQ ID NO:1表示的序列,裂解盒基因E‑lysis的序列为SEQ ID NO:2表示的序列,以及表达外源基因的重组细菌菌影在制备疫苗中的应用。
本发明公开了一种草鱼呼肠孤病毒类纤突VP56蛋白亚单位疫苗及其制备方法和应用,属于基因工程及分子免疫学技术领域。本发明的技术方案要点为:一种草鱼呼肠孤病毒类纤突VP56蛋白亚单位疫苗,该亚单位疫苗蛋白由草鱼呼肠孤病毒S7基因节段编码,该草鱼呼肠孤病毒S7基因节段的碱基序列如序列表SEQ ID No.1所示,其编码的蛋白即为草鱼呼肠孤病毒类纤突VP56蛋白亚单位疫苗蛋白,该亚单位疫苗蛋白的氨基酸序列如序列表SEQ ID No.4所示。本发明的亚单位疫苗蛋白注射草鱼鱼体后能够显著刺激鱼体免疫细胞增殖、抗病毒相关基因上调表达以及特异性抗体大量产生,有效提高草鱼抗草鱼呼肠孤病毒感染的能力,进而用于预防水产养殖中因病毒引起的草鱼出血病。
本发明提供了鲍曼不动杆菌翻译延伸因子重组蛋白、制备方法及应用,涉及生物技术领域,该重组蛋白包括EF‑Ts蛋白,所述EF‑Ts蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ本发明产物成分单一,纯度高,相对而言安全性较高;本发明的EF‑Ts重组蛋白对动物具有显著的保护作用,且能诱导动物产生较高效价特异性抗体。本发明将鲍曼不动杆菌EF‑Ts作为重组蛋白亚单位疫苗的研究不但为研制高效预防感染或治疗性疫苗奠定了基础,同时也开拓了对鲍曼不动杆菌疫苗研究的新思路。
本发明公开了一种鸭坦布苏病毒E蛋白第三结构域重组蛋白,该重组蛋白具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列,编码该重组蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了诊断鸭坦布苏病毒病的试剂盒和抗鸭坦布苏病毒病疫苗。本发明的鸭坦布苏病毒E蛋白第三结构域重组蛋白,不仅可以作为诊断抗原检测鸭坦布苏病毒病抗体,而且还可以作为鸭坦布苏病毒病的亚单位疫苗接种动物诱导产生中和抗体,应用前景广阔。
本发明公开了一种抗羊包虫病感染的基因工程亚单位疫苗的制备方法,包括以下步骤:S1:从NCBI搜索并下载细粒棘球绦虫的EG95基因序列如SEQ ID NO.2所示,EG95氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示,然后进行氨基酸序列修饰,得到修饰后的EG95氨基酸序列;S2:将多个修饰后的EG95氨基酸序列的基因序列通过柔性linker进行串联表达,形成重组后的多EG95基因序列;S3:将重组后的多EG95基因序列克隆到pET28b质粒载体中,再转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,采用添加标签的融合表达方式进行诱导表达得到重组蛋白;S4:将重组蛋白进行蛋白纯化后即得抗羊包虫病感染的基因工程亚单位疫苗原液。