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[发明专利]一种融合蛋白及其在构建筛选冠状病毒3CL蛋白酶抑制剂的系统中的应用-CN202010614257.1有效
发明人：潘纪安;彭小雪;杜柳冰;蒋依伶 -专利权人：中山大学
申请日： 2020-06-30 - 公布日： 2022-04-01 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种融合蛋白及其在构建筛选冠状病毒3CL蛋白酶抑制剂的系统中的应用。本发明首先提供了一种融合蛋白，将N端的泛素化蛋白和C端的具有报告功能的蛋白通过3CL蛋白酶酶切位点氨基酸片段融合而成；所述3CL蛋白酶酶切位点氨基酸片段为3CL蛋白酶能够识别并进行酶切的氨基酸片段。利用该融合蛋白、其编码基因、包含其的载体或表达其的重组细胞构建得到了一种筛选冠状病毒3CL蛋白酶抑制剂的系统，该系统方便快捷、操作简单，具有良好的特异性和敏感性；利用该系统能够便捷有效的筛选冠状病毒3CL蛋白酶抑制剂，筛选机理明确，速度快，作用效果直观，且通用性强，重复性好，假阳性率低，在筛选冠状病毒3CL蛋白酶抑制剂中具有良好的应用前景。
一种融合蛋白及其构建筛选冠状病毒 cl 蛋白酶抑制剂系统中的应用

[发明专利]斑马鱼P-糖蛋白抑制剂筛选模型的建立方法及其应用-CN201110231726.2有效
发明人：朱晓宇;李春启;郭胜亚 -专利权人：杭州环特生物科技有限公司
申请日： 2011-08-12 - 公布日： 2011-12-21 - 主分类号： G01N33/543 文献下载
摘要：本发明涉及一种活体斑马鱼P-糖蛋白抑制剂筛选模型的建立以及评价或筛选P-糖蛋白抑制剂的方法，主要包括：斑马鱼选取，化合物处理，图像分析和/或微孔板分析几个步骤。本发明能显著提高P-糖蛋白抑制剂评价或筛选的速度，对加快大规模P-糖蛋白抑制剂的筛选和评价具有重要意义。
斑马糖蛋白抑制剂筛选模型建立方法及其应用

[发明专利]FRET荧光蛋白探针及其应用-CN202310441863.1在审
发明人：唐进法;王炜;张岱;韩冰;陈小菲;李伟霞;吴娅丽;王晓艳;张辉;王露;贾金浩;汪彬;孟高全 -专利权人：河南中医药大学第一附属医院
申请日： 2023-04-23 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种FRET荧光蛋白探针，包括Lssmorange、mKate2和连接多肽，该连接多肽的两端分别连接Lssmorange和mKate2，其中，所述连接多肽包括如SEQ ID NO:1～9所示的氨基酸序列本发明还提供了一种基于上述FRET荧光蛋白探针的重组质粒及转化体。本发明还提供了一种新型冠状病毒主蛋白酶抑制剂筛选模型及方法，主要利用SARS‑COV‑2 Mpro蛋白液对上述荧光蛋白探针的水解作用，引起的荧光强度的变化来筛选新型冠状病毒主蛋白酶抑制剂。所以，上述FRET荧光蛋白探针容易识别出SARS‑COV‑2 Mpro抑制剂药物筛选中的假阳性；在细胞内可表达，可以在细胞水平对SARS‑COV‑2 Mpro抑制剂进行筛选；从而使得采用上述荧光蛋白探针的新型冠状病毒主蛋白酶抑制剂筛选模型及方法，提高了SARS‑COV‑2 Mpro抑制剂筛选的准确性。
fret 荧光蛋白探针及其应用

[发明专利]α－突触核蛋白与Sph1的相互作用位点及其在筛选帕金森症药物中的应用-CN200710038085.2无效
发明人：胡红雨;谢圆圆;林东海 -专利权人：中国科学院上海生命科学研究院
申请日： 2007-03-15 - 公布日： 2008-09-17 - 主分类号： C07K14/47 文献下载
摘要：本发明公开了一种分离的多肽(Syn12)，所述的多肽可用于筛选抑制α－突触核蛋白与Sph1蛋白相互作用的物质。本发明还公开了一种筛选抑制α－突触核蛋白与Sph1蛋白相互作用的物质的方法，该方法以α－突触核蛋白N－端的12个氨基酸残基作为筛选的靶点。本发明首次发现α－突触核蛋白N－端的12个氨基酸残基是真正决定α－Syn与Sph1相互作用的位点，从而为筛选抗Lewy包涵体形成的物质提供了更为明确的靶点。
突触核蛋白 sph1 相互作用及其筛选帕金森药物中的应用

[发明专利]一种植物活性物质的筛选方法-CN201610532005.8有效
发明人：关心;彼得·尼克;谭飔;王嘉钰;胡楠;尹秋月 -专利权人：西南大学
申请日： 2016-07-07 - 公布日： 2018-11-13 - 主分类号： G01N21/84 文献下载
摘要：本发明提供了一种活性物质的筛选方法，包括：a)从猪脑中分离并纯化微管蛋白；b)对微管蛋白进行荧光标记，得到荧光标记的微管蛋白；c)将微管蛋白、荧光标记的微管蛋白和待筛选物质混合后进行聚合反应；d)对聚合产物进行显微观察，获得显微照片；运用计算机软件定量显微照片中微管蛋白的数量、长度和粗度；对数据进行转化分析，根据结果确定待筛选物质的活性。本发明在离体条件下对猪脑微管蛋白进行荧光标记，运用计算机软件定量聚合反应后微管蛋白的密度、长度频率分布等作为衡量影响微管蛋白成核化、伸长或缩减因素的评价指标，从而判断植物活性物质对微管蛋白聚合的影响，为发掘植物活性物质的高通量筛选研究提供了方法模型
一种植物活性物质筛选方法

[发明专利]一种筛选抗体的方法-CN201010257365.4有效
发明人：杭海英;邱俊康 -专利权人：中国科学院生物物理研究所
申请日： 2010-08-19 - 公布日： 2011-01-19 - 主分类号： C07K16/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种筛选抗体的方法。该方法包括如下步骤：1)将目标蛋白展示于离体真核细胞的细胞膜表面，得到表面展示有目标蛋白的真核细胞；2)将待筛选蛋白库中的各蛋白分别展示于细菌原生质体表面，得到表面展示有待筛选蛋白的细菌原生质体库。本发明提供了利用APEx展示技术应用于以完整的人细胞为抗原筛选特异识别人细胞表面抗原的抗体的一种筛选方法。此方法的建立，有助于筛选更多识别细胞表面分子标记的抗体，对疾病诊断和治疗都将起到巨大的推动作用。
一种筛选抗体方法

[发明专利]一种PROTAC药物的筛选方法及载体-CN202310527458.1有效
发明人：张霖;孟帅;任秀宝;郝希山 -专利权人：细胞生态海河实验室;天津市肿瘤医院（天津医科大学肿瘤医院）
申请日： 2023-05-11 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： G01N21/76 文献下载
摘要：本发明属于生物医药领域，涉及一种PROTAC药物的筛选方法及载体，包括如下步骤：S1.选用包括内参荧光基因及海肾荧光素酶基因的载体，并在所述载体的海肾荧光素酶基因下游克隆入靶蛋白基因，包装形成病毒后感染真核细胞，表达出内参荧光蛋白及海肾荧光素酶‑靶蛋白的融合蛋白；S2.将步骤S1感染后的真核细胞加入PROTAC药物，先后采用荧光检测法及海肾荧光素酶生物发光检测法，获得PROTAC药物降解靶蛋白的数据，完成PROTAC药物的筛选。与现有技术例如western blot相比，本发明所提供的筛选体系，筛选操作简单、快速，降低实验成本；本发明筛选实验通量大，可同时筛选多个PROTAC药物。
一种 protac 药物筛选方法载体

[发明专利]混合物中靶蛋白高亲和力配体指数富集技术-CN202210016682.X在审
发明人：廖飞;杨晓兰 -专利权人：重庆医科大学
申请日： 2022-01-07 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：混合物中靶蛋白高亲和力配体指数富集技术，特征在于：磁珠固定靶蛋白；首轮筛选，过量混合物样品竞争结合低浓度的固定化靶蛋白、磁分离结合配体、溶剂A加热变性靶蛋白提取结合配体、浓缩；此后，以10除以可定量配体回收率均值为比例指数递减固定化靶蛋白用量，将上轮筛选所得结合配体用于竞争结合、磁分离结合配体、溶剂A加热变性靶蛋白提取结合配体、浓缩，即迭代筛选；持续实施迭代筛选过程中，结合配体混合物中高亲和力配体丰度随迭代筛选次数呈指数增长即指数富集。
混合物蛋白亲和力指数富集技术

[发明专利]一种筛选稳定转染的克隆蛋白的方法-CN202110915337.5在审
发明人：高谋 -专利权人：高谋
申请日： 2021-08-10 - 公布日： 2021-11-26 - 主分类号： C12N15/79 文献下载
摘要：本发明公开了一种筛选稳定转染的克隆蛋白的方法，涉及克隆蛋白筛选技术领域，该筛选稳定转染的克隆蛋白的方法，包括细胞培养、传代培养、配制筛选培养基、转染、统计转染率、更换培养基、加药选择、换药培养、减药培养本发明通过将原代细胞经过培养分离并进行传代培养，形成多个对照组和实验组，同时通过筛选培养基进行筛选和转染，达到一定转染率之后，通过筛选培养基进行筛选培养，达到转染细胞群体并分离出转染效果较好的细胞群体，最后成功得到转染克隆蛋白的目的，在生物学和医学上具有重要意义。
一种筛选稳定转染克隆蛋白方法

[发明专利]家蚕肠道内中性蛋白酶产酶菌株、其中性蛋白酶基因和原核表达载体及制备方法-CN201110440214.7无效
发明人：刘朝良;王在贵;杨文静;朱保建;魏国清;李大辉;刘金阳 -专利权人：安徽农业大学
申请日： 2011-12-19 - 公布日： 2012-07-04 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明家蚕肠道内中性蛋白酶产酶菌株、其中性蛋白酶基因和原核表达载体及制备方法，属于基因工程技术领域。所述家蚕肠道内中性蛋白酶产酶菌株是对家蚕肠道内菌体进行富集培养，用NA酪蛋白筛选培养基进行筛选获得的。同时通过基因工程技术对菌株的DNA进行扩增、筛选得到中性蛋白酶基因，将该中性蛋白酶基因连接入pET-28(a+)构建了原核表达载体pET28a-npr。本发明筛选出的家蚕肠道内中性蛋白酶产酶菌株及其所产蛋白酶，属于动物饲料级微生物与酶制剂，具有较强的应用前景。
家蚕肠道中性蛋白酶菌株基因表达载体制备方法

[发明专利]p21启动子去乙酰化酶抑制剂筛选模型的构建及其应用-CN200810050709.7无效
发明人：陆军;黄百渠 -专利权人：东北师范大学
申请日： 2008-05-16 - 公布日： 2008-10-01 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂筛选系统，还提供了利用该系统筛选组蛋白去乙酰化酶抑制剂的方法。该筛选系统是将p21^WAF1基因启动子与荧光素酶报告基因连接，然后用连接后的重组质粒转入体外培养的细胞系，得到稳定转染的细胞株。药物处理该稳定转染细胞株后，测定荧光素酶的活性。选取荧光素酶活性较高的样品，进一步测定其组蛋白去乙酰化酶抑制剂活性，抑制率达到50％以上的样品，即为筛选得到的组蛋白去乙酰化酶抑制剂。此筛选模型具有较高的灵敏度，药物筛选直接、快速，操作简便，可用于高通量组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选。
p21 启动子乙酰化抑制剂筛选模型构建及其应用

[发明专利]基于靶点蛋白的多肽筛选方法-CN202011447276.6在审
发明人：周丽生;刘颖;贡卓琳;郭宝森;郑汉城 -专利权人：珠海碳云智能科技有限公司
申请日： 2020-12-11 - 公布日： 2021-04-09 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于靶点蛋白的多肽筛选方法。该筛选方法包括：利用多肽芯片技术对带有荧光标记的靶点蛋白进行检测，得到具有不同结合信号强度的多肽集合；按照结合信号强度对多肽集合中的多肽序列进行排序；选取排名靠前的预定数量的多肽序列作为靶点蛋白的候选多肽通过利用多肽芯片技术能够在短时间内对大量的靶点蛋白完成多个潜在候选的功能多肽的筛选，具有成本低、通量高、候选多肽结合率高及准确率高等特点。尤其对于新冠肺炎的靶点蛋白S，该筛选方法能够高通量地筛选出能够竞争性地降低或抑制S蛋白与ACE2蛋白结合的多肽，从而减弱或抑制新冠病毒对人体的感染作用。
基于蛋白多肽筛选方法

[发明专利]一种橡胶树白粉菌无毒基因的筛选方法、效应蛋白及应用-CN202111275789.8在审
发明人：李潇;刘梦瑶;殷金瑶;刘玉涵;林春花;缪卫国 -专利权人：海南大学
申请日： 2021-10-29 - 公布日： 2022-02-01 - 主分类号： C12N15/31 文献下载
摘要：本发明提供一种橡胶树白粉菌无毒基因的筛选方法、效应蛋白及应用，该筛选方法，包括：(1)由橡胶树白粉菌基因中选取潜在效应蛋白的编码基因A；(2)构建橡胶树白粉菌效应蛋白表达载体，在胶孢炭疽菌中表达转化该白粉菌的潜在效应蛋白基因A，得炭疽菌转化子；(3)将效应蛋白表达程度高的炭疽菌转化子培养，接种至离体的橡胶叶片，测定其致病能力；若相比野生型，胶孢炭疽菌转化子的致病力下降，则表明该效应蛋白编码基因A为无毒基因。本发明的筛选方法，可直接通过不同效应蛋白基因转化子的致病力筛选出白粉菌无毒基因，实现橡胶树白粉菌无毒基因的更加快速地筛选和鉴定，有利于加强橡胶白粉病的防控以及抗病品种选育。
一种橡胶树白粉无毒基因筛选方法效应蛋白应用

[发明专利]一种微球辅助的基于蛋白加热沉淀的药物靶蛋白筛选方法-CN202010841731.4在审
发明人：叶明亮;吕佳纹 -专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
申请日： 2020-08-20 - 公布日： 2022-02-22 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于微球辅助蛋白沉淀的药物靶蛋白筛选方法。该方法对复杂生物样品施加热沉淀处理，药物靶蛋白在可溶性部分中上调、在不可溶沉淀部分中下调的现象。在蛋白加热沉淀过程中，加入微米尺寸大小的材料颗粒，使得变性的蛋白沉淀到微球表面，再在微球表面进行烷基化、酶解等蛋白质组学样品前处理过程，再结合定量质谱技术，能够实现快速高灵敏度高通量的药物靶蛋白筛选。该方法建立在常规的热稳定性药物靶蛋白筛选方法之上，引入微球辅助蛋白沉淀这一策略，使得热沉淀蛋白样品更有利于后续的蛋白质组学分析，简化样品前处理过程，尽量避免样品损失，降低所需求的初始样品量，实现在次微克级别样品中进行药物靶蛋白筛选实验
一种辅助基于蛋白加热沉淀药物筛选方法

[发明专利]筛选靶蛋白配体的方法-CN201210422212.X在审
发明人：饶子和;水雯菁;杨诚;陈欣;李利新;傅晟;于飞;王新刚 -专利权人：天津市国际生物医药联合研究院有限公司;旭和（天津）医药科技有限公司
申请日： 2012-10-29 - 公布日： 2014-05-14 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用质谱筛选与靶蛋白结合的小分子配体的方法，包括以下步骤：将该靶蛋白与小分子化合物库接触以生成靶蛋白-小分子复合物，分离该靶蛋白-小分子复合物，将该靶蛋白-小分子复合物中的小分子解离，然后利用质谱检测从上述复合物中解离出的小分子，从而间接地筛选得到与该靶蛋白有结合作用的小分子，即该靶蛋白的配体。该方法可用于高通量筛选新的小分子药物。
筛选蛋白方法