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[发明专利]在ORF中插入蛋白标签的方法以及计算机存储介质-CN202010923795.9在审
发明人：蓝田;蒙伟能;施金秀;丘佳倩;岑文杰;谢宁 -专利权人：云舟生物科技（广州）有限公司
申请日： 2020-09-04 - 公布日： 2021-01-01 - 主分类号： G16B20/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种在ORF中插入蛋白标签的方法以及计算机存储介质，在ORF中插入蛋白标签的方法包括以下步骤：S1、获取蛋白标签的标签信息，并根据标签信息对蛋白标签进行分类；S2、对分类后的蛋白标签进行封装，构建蛋白标签库；S3、从蛋白标签库中选择目标蛋白标签，并确认目标蛋白标签插入ORF序列中的位置；S4、根据位置在ORF序列中插入目标蛋白标签。根据本发明实施例的方法，有效降低使用计算机在ORF中插入蛋白标签的错误率，同时提高插入蛋白标签效率，进而提高用户体验。
orf 插入蛋白标签方法以及计算机存储介质

[发明专利]一种生物素化蛋白质的制备方法-CN200910192139.X无效
发明人：杨淑伟;李华平;寿建斐;林丹;黄冰 -专利权人：广州复能基因有限公司
申请日： 2009-09-08 - 公布日： 2011-04-13 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明涉及一种生物素化蛋白质的制备方法，包括以下步骤：(a)构建一种具有多功能的联合标签的蛋白表达载体，所述联合标签至少包括：便于重组蛋白纯化的标签，含有特异蛋白酶切位点的标签，以及生物素化标签；(b)把目的蛋白的编码序列克隆到步骤(a)所述的蛋白表达载体中，所述联合标签与目的蛋白进行融合表达，获得在体内或体外对融合蛋白中的生物素化标签进行生物素化的重组蛋白；以及(c)采用与联合标签相适应的特异性蛋白酶切除融合蛋白中的便于重组蛋白纯化的标签，并切断联合标签中的特异蛋白酶切位点，获得高纯度的生物素化蛋白质。本发明具有过程集成、工艺简单、生物素化效率高、蛋白结构和活性不受生物素化影响等优点。
一种生物素蛋白质制备方法

[发明专利]MBP标签、Spy标签或MBP-Spy串联标签在辅助重组蛋白表达中的应用-CN202310188653.6在审
发明人：田江杰;王晶晶;张丽娟 -专利权人：广州普言生物科技有限公司
申请日： 2023-03-02 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了MBP标签、Spy标签或MBP‑Spy串联标签在辅助重组蛋白表达中的应用。还公开了一种重组蛋白，为在蛋白的N端连接上述标签而成。以及相应的编码基因、表达载体和宿主菌。本发明使用Spy标签或MBP标签来促进重组蛋白的溶解性，协助蛋白进行正确折叠，且有助于提高蛋白的表达量。其中MBP‑Spy串联标签的效果明显优于单独的Spy标签或MBP标签。
mbp 标签 spy 串联辅助重组蛋白表达中的应用

[发明专利]一种GST-like标签蛋白在大肠杆菌表达体系中的应用-CN201811288350.7在审
发明人：王峰 -专利权人：无锡佰翱得生物科学有限公司
申请日： 2019-01-18 - 公布日： 2019-05-24 - 主分类号： C12N15/65 文献下载
摘要：本发明涉及一种新的GST‑like亲和标签蛋白(Δ4)的研究方法与应用，属于生物技术领域。昆虫内源性蛋白GST‑like标签蛋白在大肠杆菌表达体系中的应用，该GST‑like标签蛋白的序列如SEQUENCE No.1所示。该GST‑like标签蛋白与L‑Glutathione(Reduced)(GSH)结合能力强，能作为标签蛋白，替代GST标签蛋白。
标签蛋白大肠杆菌表达蛋白应用生物技术领域内源性蛋白结合能力亲和标签昆虫替代研究

[发明专利]多功能标签融合蛋白及其表达方法和应用-CN201510601534.4在审
发明人：马永;王安良;赵百学 -专利权人：江苏众红生物工程创药研究院有限公司;常州京森生物医药研究所有限公司
申请日： 2015-09-18 - 公布日： 2017-03-29 - 主分类号： C07K14/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种多标签融合蛋白及其编码基因，以及其表达、纯化方法。所述多标签融合蛋白从N端到C端包括His，Trx，3×FLAG，GST，strep(II)，HA，GFP，cMyc，His中的两种以上的蛋白标签。本发明选用的多功能标签的编码基因序列兼顾了各标签的功能、大小和插入的位点对目的蛋白的影响，多标签融合蛋白的排列顺序及插入位点的选择有利于多功能标签蛋白的高效表达；多标签串联的方式，有利于采用两种以上的纯化标签中进行两步或多步法纯化，以产生高纯蛋白。由此可见，本发明的融合蛋白不仅表达量较高，纯度高，并且融合蛋白中所串联的各个蛋白标签都具有生物学活性，可作为含有多标签融合蛋白中一种或多种其他融合蛋白定性或定量检测时的阳性对照，测试检测系统的适用性。
多功能标签融合蛋白及其表达方法应用

[发明专利]标签蛋白或含标签的融合蛋白的定量检测方法-CN200610041751.3无效
发明人：金伯泉;徐竹蔚;宋朝君 -专利权人：中国人民解放军第四军医大学
申请日： 2006-01-28 - 公布日： 2006-08-30 - 主分类号： G01N33/577 文献下载
摘要：本发明涉及一种利用双抗体夹心酶联免疫吸附试验来定量检测标签蛋白或含标签的融合蛋白的方法，其定量检测方法是：它利用在制备抗标签蛋白单克隆抗体的基础上，经过配对抗体的筛选，建立的双抗体夹心酶联免疫吸附试验，来定量检测标签蛋白或含标签的融合蛋白。为了克服免疫印迹法的不足，本发明提供一种标签蛋白或含标签的融合蛋白的定量检测方法，它不仅可以定量检测，而且特异性强、灵敏度高、重复性好、简便易行，非常适合于快速定量检测标签蛋白或含标签的融合蛋白。
标签蛋白融合定量检测方法

[发明专利]用于表达、纯化小肽的双标签重组蛋白及其制备方法和应用-CN202211564784.1在审
发明人：王朝;高甜甜 -专利权人：中国科学技术大学
申请日： 2022-12-07 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于表达、纯化小肽的双标签重组蛋白及其制备方法和应用，属于重组蛋白技术领域，这种双标签重组蛋白包括纯化标签、目的蛋白、于目的蛋白的一端依次连接的第一蛋白酶切位点和第一促溶标签、以及于目的蛋白的另一端依次连接的第二蛋白酶切位点、第二促溶标签；通过构建双标签重组蛋白表达载体，制备双标签重组蛋白，应用于小肽的表达、纯化，以解决蛋白质体外可溶性表达时，结构简单的小肽序列在体外易降解，不易被纯化的问题。
用于表达纯化标签重组蛋白及其制备方法应用

[发明专利]一种融合标签蛋白-CN201610331686.1有效
发明人：何冰芳;成骋;吴珊珊;吴斌;崔禄鹏;储建林 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2016-05-18 - 公布日： 2019-07-26 - 主分类号： C12N9/24 文献下载
摘要：本发明公开了一种融合标签蛋白，本发明的融合标签蛋白bff基于耐有机糖苷酶Fru6构建，为截断至耐有机糖苷酶Fru6N端前n个氨基酸截短体，所述n＜452。本发明还提供了基于本发明的融合标签蛋白构建的融合蛋白表达系统，并选择bff312，bff209，bff217，bff243，bff350作为本发明优选的融合标签蛋白，构建融合蛋白表达系统，验证本发明融合标签蛋白的效果本发明通过融合标签的连接能有效提高后接蛋白的表达及蛋白折叠，有效提高可溶性蛋白量。
一种融合标签蛋白

[发明专利]硫氧还蛋白标签融合蛋白免疫亲和柱的制备方法、免疫亲和柱及其运用-CN202010199366.1在审
发明人：方卫斌;张海灵 -专利权人：天德瑞（北京）生物科技有限公司
申请日： 2020-03-20 - 公布日： 2020-10-30 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种硫氧还蛋白标签融合蛋白免疫亲和柱的制备方法，其包括如下步骤：S1、制备N个硫氧还蛋白单克隆抗体；S2、针对每一所述硫氧还蛋白单克隆抗体制备与其对应的免疫亲和柱，以获得N个免疫亲和柱；以及S3、运用N个免疫亲和柱中的一个或多个对同一硫氧还蛋白标签融合蛋白进行纯化，选取纯化效果达到预期值的免疫亲和柱作为目标硫氧还蛋白标签融合蛋白免疫亲和柱。其运用多个免疫亲和柱对同一硫氧还蛋白标签融合蛋白进行纯化，选取纯化效果达到预期值的免疫亲和柱作为目标硫氧还蛋白标签融合蛋白免疫亲和柱，再通过该目标硫氧还蛋白标签融合蛋白免疫亲和柱对硫氧还蛋白标签融合蛋白进行纯化
硫氧还蛋白标签融合蛋白免疫亲和制备方法及其运用

[发明专利]一种提高蛋白表达的融合标签蛋白及其应用-CN201811625148.9有效
发明人：季朝能;刘阳;王丹;李媛;顾少华;李继喜 -专利权人：复旦大学
申请日： 2018-12-28 - 公布日： 2022-12-16 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种提高蛋白表达的融合标签蛋白及其应用，属于基因工程领域。本发明的融合标签蛋白FJ1来自于Gramella forsetii，本发明还提供了基于本发明的融合标签蛋白构建的融合蛋白表达系统，并选择了Lysyl‑tRNA synthetase(mycobacteriumtuberculosis)作为应用实例，构建融合蛋白表达系统，并将表达载体导入大肠杆菌表达宿主中，验证本发明融合标签蛋白的效果。本发明通过融合标签蛋白与目的蛋白的连接，能够有效提高目的蛋白的表达及目的蛋白折叠，可以提高目的蛋白的可溶性。本发明所述融合标签蛋白可广泛运用于目的基因的表达和目的蛋白的可溶性研究，以及应用于工业化生产蛋白质药物以及分子生物学、生物化学和遗传学等基础研究领域。
一种提高蛋白表达融合标签及其应用

[发明专利]使用冷冻电子显微镜解析蛋白质结构的方法-CN202310466753.0在审
发明人：霍斯特·梵格;饶智丽;王学颖;张小康;袁曙光;张华威 -专利权人：中国科学院深圳先进技术研究院
申请日： 2023-04-23 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本申请提供一种利用冷冻电镜进行蛋白质结构解析的方法，包括：使目标蛋白包含标签；使包含有所述标签的所述目标蛋白与支架蛋白结合以形成所述目标蛋白与所述支架蛋白的复合物；以及使用冷冻电子显微镜进行单粒子成像，以解析与所述支架蛋白复合的所述目标蛋白质结构。所述支架蛋白为链霉亲和素、亲和素或者其衍生物中的任意一种。所述标签用于选择性地与支架蛋白结合。所述标签选自以下组成的组中的一者：生物素标签，其包含生物素；生物素化的蛋白质或多肽标签，其包含蛋白质序列和与所述蛋白质序列共价连接的生物素；链霉菌标签(Strep‑tag)；以及生物素化或链球菌标记的抗体
使用冷冻电子显微镜解析蛋白质结构方法

[发明专利]杂交瘤细胞株4C9及其产生的抗His标签蛋白单克隆抗体-CN201610175113.4有效
发明人：张金阳;靳子安;宋玉竹;韩芹芹;陈强;夏雪山 -专利权人：昆明理工大学
申请日： 2016-03-25 - 公布日： 2019-07-16 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种杂交瘤细胞株4C9及其产生的抗His标签蛋白单克隆抗体，该杂交瘤细胞株4C9保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为：CCTCC NO.C2015198，其可以用于制备高效价抗His标签蛋白单克隆抗体，抗His 标签蛋白鼠腹水抗体酶联免疫吸附分析（ELISA）法测得的效价可达10⁶；本发明提供的抗His标签蛋白单克隆抗体灵敏度高、特异性好，对His标签蛋白的表达分析准确，可应用于测定带His标签蛋白的重组蛋白的表达情况验证及His标签重组蛋白的浓度测定。
杂交瘤细胞株 c9 及其产生 his 标签蛋白单克隆抗体

[发明专利]一种重组TRPV4蛋白及制备方法-CN202110589647.2在审
发明人：高小康;张晓燕;李欧 -专利权人：湖北医药学院
申请日： 2021-05-27 - 公布日： 2021-10-01 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明提供一种重组TRPV4蛋白及制备方法，所述重组TRPV4蛋白含有TRPV4蛋白、GST标签及6his标签。与现有技术相比，本发明的有益效果在于，将TRPV4蛋白同时添加GST标签及6his标签，可以保证重组TRPV4蛋白在制备过程中保留完整的TRPV4蛋白的片段。
一种重组 trpv4 蛋白制备方法

[发明专利]制备无融合标签包涵体蛋白纳米颗粒的方法-CN201610529226.X有效
发明人：熊思东;齐兴梅 -专利权人：苏州大学
申请日： 2016-07-07 - 公布日： 2019-12-13 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种制备无融合标签包涵体蛋白纳米颗粒的方法，包括以下步骤：将自发断裂蛋白质内含子的C端与目的蛋白基因融合，N端与增强目的蛋白表达的标签蛋白融合，得到融合蛋白编码基因；将融合蛋白编码基因在大肠杆菌中诱导表达，通过自发断裂蛋白质内含子的C端自发断裂，释放所述目的蛋白，形成包涵体蛋白；将大肠杆菌细胞破碎，离心，弃掉上清液，得到无融合标签包涵体蛋白纳米颗粒。本发明解决了在包涵体蛋白颗粒水平上实现标签蛋白的移除，填补了制备无标签包涵体蛋白纳米颗粒的技术空白，并且蛋白质内含子的自发断裂在大肠杆菌体内完成，后处理简单。
制备融合标签包涵蛋白纳米颗粒方法

[发明专利]组氨酸标签蛋白或含组氨酸标签的融合蛋白的免疫学定量检测方法-CN200810235706.0无效
发明人：陈亚利;张韫;宋诗雨 -专利权人：江苏先声药物研究有限公司
申请日： 2008-12-04 - 公布日： 2009-04-22 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种双抗体夹心免疫吸附试验来定量检测组氨酸标签蛋白或含组氨酸标签的融合蛋白的方法，其定量检测方法是：它利用在制备抗标签蛋白多克隆抗体的基础上，经过与多聚组氨酸单克隆抗体及相应酶标抗抗体的浓度配伍试验，建立双抗体夹心酶联免疫吸附方法，来定量检测组氨酸标签蛋白或含组氨酸标签的融合蛋白。此方法不仅可以定量检测，而且适用范围广、特异性强、灵敏度高、重复性好、非常适合于快速定量检测组氨酸标签蛋白或含组氨酸标签的融合蛋白。
组氨酸标签蛋白融合免疫学定量检测方法

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