本发明提供了一种同时检测10种虫媒病病原的试剂盒及其应用，属于液相芯片检测技术领域。本发明的试剂盒含有针对10种常见虫媒病病原的特异性引物和与荧光标记微球偶联的探针，特异性引物对的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑20所示，探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.21‑30所示。本发明试剂盒通过设置多重不对称PCR体系，优化杂交反应条件，实现了对10种虫媒病病原的准确检测。本发明的试剂盒具有检测准确，灵敏度高、特异性强，简便快速的优点，适合口岸检验检疫及虫媒病流行病学调查，具有良好的应用前景。
本发明具体公开了一种同时检测8种虫媒脑炎病毒的RT‑PCR引物和探针组合及试剂盒，所述引物和探针的序列如SEQ ID NO：1～24所示。以所述引物和探针组合为基础，结合实时定量PCR技术灵敏可靠的优势以及微列阵技术同时检测多种基因表达量的优势，开发一种同时检测8种虫媒脑炎病毒的RT‑PCR阵列试剂盒，一次RT‑PCR反应可以同时快速检出8种虫媒脑炎病毒，以实现RT‑PCR检测多种病原体的集成化和高通量。可以应用于大规模病原体筛查，为致病性脑炎虫媒病毒感染诊断和确定感染源提供技术支持，对致病性脑炎临床防控具有重要的现实意义。
