苏云金芽孢杆菌vip3A‑6基因、表达蛋白及其应用,属于生物化学技术领域,vip3A‑6基因表达蛋白对甜菜夜蛾生物活性试验进行初筛和复筛,7d后分别调查死、活虫数,计算校正死亡率和LC50;结果可知,苏云金芽孢杆菌的vip3A‑6基因表达蛋白在复筛时对甜菜夜蛾半致死浓度为4.783μg/g(2.234‑7.784μg/g),当表达蛋白浓度达到81μg/g时,所有甜菜夜蛾均死亡,可见苏云金芽孢杆菌的vip3A‑6基因表达蛋白对甜菜夜蛾具有高毒力,其特征在于苏云金芽孢杆菌vip3A‑6基因、表达蛋白及其应用的核苷酸序列如Seq ID No:1所示,vip3A‑6基因为一新基因。
一种苏云金芽胞杆菌营养期强启动子Prsi及其应用。本发明发现了一个在苏云金芽胞杆菌营养期工作的强启动子Prsi,具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,其核心位点如图1所示。本发明发现的启动子为组成型强启动子,该启动子在苏云金芽胞杆菌中表达β‑半乳糖苷酶的活性是芽胞杆菌强启动子Phj3(SEQ ID NO:2所示核苷酸序列)的5倍。该启动子可以在大肠杆菌、枯草芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌等细菌中用于构建高效表达外源蛋白。本发明还涉及基因操作所需的质粒载体,利用该启动子构建基因工程菌株的方法及相应的菌株等。