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[发明专利]一种干细胞外泌体在制备精华液方面的应用-CN202110135477.0在审
发明人：朱学义;刘岩 -专利权人：菲尔生物工程技术有限公司
申请日： 2021-02-01 - 公布日： 2021-04-16 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种干细胞外泌体在制备精华液方面的应用，所述干细胞外泌体为皮肤干细胞外泌体，所述干细胞外泌体的制备方法包括以下步骤：取人皮肤干细胞，备用；将皮肤干细胞与电转染工作液混合，得到混合液，将所述混合液与CTF1质粒混合，得到预转染物；对预转染物进行电击，得到转染CTF1基因的皮肤干细胞；该干细胞外泌体将皮肤干细胞外泌体，用于精华液中，可以极大的提高，精华液对皮肤的锁水能力，提高皮肤细腻程度，而且加入了改性木糖醇，进一步增加效果，解决了皮肤干细胞外泌体用于制备精华液，可以极大的提高皮肤水分的保持、提高皮肤细腻程度，但是现有的精华液并没有用到干细胞外泌体，无法满足人们对皮肤的锁水能力的需求的问题。
一种干细胞外泌体制备精华液方面应用

[发明专利]一种干细胞外泌体在制备精华液方面的应用-CN202310630190.4在审
发明人：徐祎玲;陈明伟;程伟 -专利权人：北京伊情生物科技有限公司
申请日： 2023-05-30 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： A61K8/99 文献下载
摘要：本发明公开了一种干细胞外泌体在制备精华液方面的应用，所述干细胞外泌体为皮肤干细胞外泌体，外泌体作为细胞间的通讯物质，一般能取得比药物更好的效果:与细胞本身应用相比，效果基本相同，且应用具有更大的优势，该干细胞外泌体将皮肤干细胞外泌体，用于精华液中，可以极大的提高，精华液对皮肤的锁水能力，提高皮肤细腻程度，解决了皮肤干细胞外泌体用于制备精华液，可以极大的提高皮肤水分的保持、提高皮肤细腻程度，但是现有的精华液并没有用到干细胞外泌体，无法满足人们对皮肤的锁水能力的需求的问题
一种干细胞外泌体制备精华液方面应用

[发明专利]一种永生化间充质干细胞的构建方法及制备外泌体的方法-CN202110062621.2有效
发明人：夏玉龙;吴炯 -专利权人：苏州恒康生命科学有限公司
申请日： 2021-01-18 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本申请涉及间充质干细胞培养领域，具体公开了一种永生化间充质干细胞的构建方法及制备外泌体的方法。永生化间充质干细胞的构建方法包括：基因合成；构建重组慢病毒质粒；慢病毒包装；利用慢病毒转染间充质干细胞，即得永生化间充质干细胞。制备外泌体的方法包括：永生化间充质干细胞培养；分离纯化：收集上清液，离心，去除细胞碎片，收集上清液，过滤；再次离心，弃上清液，重悬外泌体沉淀，得外泌体重悬液；将外泌体重悬液离心，弃上清液，即得外泌体。本申请的永生化间充质干细胞的构建方法能够构建出永生化并且大量分泌外泌体的间充质干细胞，不需要大规模的培养细胞就能够获得大量的外泌体，一定程度上可降低细胞培养成本。
一种永生化间充质干细胞构建方法制备外泌体

[发明专利]一种脐带间充质干细胞外泌体培养以及分离方法-CN201811409319.4在审
发明人：刘年 -专利权人：北京太东生物科技有限公司
申请日： 2018-11-23 - 公布日： 2019-02-19 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：本发明涉及外泌体富集和分离领域，特别涉及一种脐带间充质干细胞外泌体培养以及分离方法。本发明提供的脐带间充质干细胞外泌体培养方法，包括以下步骤：脐带间充质干细胞传代培养8‑14h，吸走培养液和未贴壁的细胞，并进行清洗，然后加入外泌体专用完全培养液进行培养；72‑96h后收集培养液到离心管中，得到富含间充质干细胞外泌体的培养液。本发明采用外泌体专用完全培养液对传代后培养一段时间的脐带间充质干细胞进行培养，有效提升外泌体的含量，得到较多的间充质干细胞外泌体。然后对富含间充质干细胞外泌体的培养液进行分离，得到间充质干细胞外泌体，方法简便易行，为间充质干细胞外泌体的应用提供良好的基础。
培养液脐带间充质干细胞间充质干细胞富含传代传代培养分离领域应用提供离心管富集贴壁清洗细胞

[实用新型]一种双重梯度离心管-CN201821320017.5有效
发明人：千日成 -专利权人：艾尔斯（浙江）医学科技有限公司
申请日： 2018-08-13 - 公布日： 2019-04-16 - 主分类号： C12M1/24 文献下载
摘要：本实用新型涉及细胞提取技术领域，特别涉及一种双重梯度离心管，包括：外管、内管、存液壶及管盖；存液壶固定在外管的底端；内管设置在外管内部，内管与外管相配合；内管的底端与存液壶的上端平齐；管盖与内管及外管的顶端连接，用于密封内管及外管。本实用新型提供的双重梯度离心管，当内管与外管契合时，加入需要提取的原材料细胞液，盖上管盖，放入离心机离心。离心完成后，存液壶内为需要提取的有效细胞，存液壶以上为弃用的梯度液和原材料细胞液。弃用的梯度液和原材料细胞液均在内管内，上提管盖将内管从外管中抽出，废弃的梯度液和原材料液即与底层所需细胞液分离，可高纯度提取离心液底层细胞样品。
外管内管存液细胞液梯度离心梯度液本实用新型底端管盖离心机离心顶端连接密封内管细胞提取细胞样品有效细胞高纯度离心液上端放入管内平齐上管提管契合抽出废弃配合

[发明专利]一种高效生产脐带间充质干细胞来源的外泌体的方法-CN202211291940.1在审
发明人：吕品雷;李文瑞;司家霖;蒙玲莉;黄国军;朱一 -专利权人：海南启研干细胞抗衰老医院有限公司
申请日： 2022-10-20 - 公布日： 2022-12-02 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及一种高效生产脐带间充质干细胞来源的外泌体的方法，包括以下步骤：(1)、在体外培养时，将脐带间充质干细胞使用培养基A在低氧细胞培养箱内进行培养；(2)、待细胞融合至55～65％时，去除杂质，分离出培养上清液；(3)、将培养上清液移入无血清培养基中继续在低氧细胞培养箱内进行培养，直至细胞融合至至少95％，去除杂质，分离出细胞培养上清液；(4)、对细胞培养上清液预处理，得到含有外泌体的离心液；(5)、将含有外泌体的离心液置于外泌体提取系统进行纯化后即得到脐带间充质干细胞来源的外泌体纯化液本发明可以在短时间内获得高纯度，高产量且均一性良好的的脐带间充质干细胞来源外泌体。
一种高效生产脐带间充质干细胞来源外泌体方法

[发明专利]一种用于改善卵巢早衰的干细胞外泌体复合制剂制备系统-CN202210118697.7有效
发明人：芦福建 -专利权人：美亚宜彬生物科技（北京）有限公司
申请日： 2022-02-08 - 公布日： 2022-05-27 - 主分类号： C12M1/38 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于改善卵巢早衰的干细胞外泌体复合制剂制备系统，包括，子宫内膜干细胞外泌体培养装置，用于将第二代到第八代的子宫内膜干细胞培养成子宫内膜干细胞外泌体，脐带间充质干细胞单细胞悬液培养装置，用于将第二代到第六代的脐带间充质干细胞培养成脐带间充质干细胞单细胞悬液；干细胞外泌体复合制剂装置，用于将脐带间充质干细胞单细胞悬液和子宫内膜干细胞外泌体混合形成干细胞外泌体复合制剂；中控单元，其根据子宫内膜干细胞外泌体蛋白含量对各装置参数进行调节，以使生成的子宫内膜干细胞外泌体蛋白含量符合预设标准
一种用于改善卵巢早衰干细胞外泌体复合制剂制备系统

[发明专利]一种含有干细胞外泌体的电子烟烟液及其制备方法与应用-CN201710972166.3在审
发明人：闫旭;李柱;韩绪春;郭岗;黄国锋;吴进;许元基 -专利权人：厦门诺康得生物科技有限公司
申请日： 2017-10-18 - 公布日： 2017-12-26 - 主分类号： A24F47/00 文献下载
摘要：一种含有干细胞外泌体的电子烟烟液及其制备方法与应用，涉及电子烟。其原料组成按质量百分比为65％～80％丙二醇、1％～2％香料、15％～20％甘油、5％～15％水，另外包含脐带间充质干细胞外泌体，脐带间充质干细胞外泌体的含量为1mg/g。将丙二醇、香料、甘油和水混合，再加入脐带间充质干细胞外泌体，即得。含有干细胞外泌体的电子烟烟液中的干细胞外泌体通过电子烟雾化后被吸收入体内。间充质干细胞来源于脐带，从脐带中分离提取出间充质干细胞，再通过原代培养和传代培养获得。含有干细胞外泌体的电子烟烟液的应用。含有干细胞外泌体的电子烟烟液内的干细胞外泌体可通过雾化方式直接进入肺组织，改善肺部功能。
一种含有干细胞外泌体电子烟烟液及其制备方法应用

[发明专利]一种利用海藻酸钠加速中性粒细胞胞外诱捕网降解的方法-CN202211438779.6在审
发明人：宋阳;杨婷;韦越;杨石;徐秀丽;王文辉;昝睿 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2022-11-17 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： A61K31/734 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用海藻酸钠加速中性粒细胞胞外诱捕网降解的方法，该方法包括如下步骤：将中低分子量海藻酸钠溶液与中性粒细胞胞外诱捕网按照一定比例混合后孵育，使中性粒细胞胞外诱捕网中的组蛋白与海藻酸钠形成液滴状的复合凝聚体；用无机盐溶液调控液滴状的复合凝聚体的形成，得到组蛋白/海藻酸钠复合凝聚体；将组蛋白/海藻酸钠复合凝聚体用阴离子表面活性剂洗涤，从而将中性粒细胞胞外诱捕网中的DNA释放，加速中性粒细胞胞外诱捕网的溶解。本发明揭示海藻酸钠诱导中性粒细胞胞外诱捕网发生液‑液相分离的条件和机制，即通过调控中性粒细胞胞外诱捕网的液‑液相分离过程来实现其加速消融，缓解中性粒细胞胞外诱捕网介导的炎症反应。
一种利用海藻加速中性粒细胞诱捕降解方法

[发明专利]一种对总的细胞外囊泡和/或其中含有特异性基因的细胞外囊泡进行绝对定量的方法-CN202011433536.4在审
发明人：盛滔;张亚楠;汤华军;姚广城 -专利权人：上海思路迪生物医学科技有限公司
申请日： 2020-12-10 - 公布日： 2022-06-14 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明涉及一种对总的细胞外囊泡和/或其中含有特异性基因的细胞外囊泡进行绝对定量的方法。具体而言，本发明涉及一种对样品中总的细胞外囊泡和/或其中含有特异性基因的细胞外囊泡进行定量的方法，其包括以下步骤：a)任选地对所述样品进行预处理；b)将所述样品用稀释液稀释；c)将稀释的样品与反应体系混合；d)生成液滴，使得大多数液滴，优选每个液滴包含不多于一个细胞外囊泡；e)裂解液滴中的细胞外囊泡；f)进行数字液滴PCR（ddPCR）的反应；和g)进行ddPCR检测。
一种总的细胞外囊泡其中含有特异性基因进行绝对定量方法

[发明专利]脂肪来源间充质干细胞外泌体在制备治疗脂肪组织炎症药物中的应用-CN201710202124.1在审
发明人：王群;赵汇;张利宁;朱法良;郭春;潘真真 -专利权人：山东大学
申请日： 2017-03-30 - 公布日： 2017-08-04 - 主分类号： A61K35/28 文献下载
摘要：本发明公开了脂肪来源间充质干细胞外泌体在制备治疗脂肪组织炎症药物中的应用，所述脂肪来源间充质干细胞外泌体由如下方法制备而成(1)将剥离的脂肪组织分散于消化液中，以产生细胞悬浮液；(2)离心细胞悬浮液，以形成细胞沉淀，分离沉淀，洗涤，得到含有脂肪来源间充质干细胞的脂肪组织基质细胞；(3)在体外培养体系中对ADSC进行扩增培养，收集扩增培养后的上清液进行浓缩，向浓缩后的上清液中加入外泌体提取试剂，即提取得到脂肪来源间充质干细胞外泌体本发明的脂肪来源间充质干细胞外泌体能够抑制腹内脂肪组织巨噬细胞的浸润活化，并抑制促炎细胞因子的产生和释放，对脂肪组织炎症具有很好的抑制效果。
脂肪来源间充质干细胞外泌体制备治疗组织炎症药物中的应用

[发明专利]一种外泌体的制备方法及含有外泌体的干细胞增殖试剂-CN201810473041.0在审
发明人：蒲锋星;刘世宇;邓志宏 -专利权人：广东芙金干细胞再生医学有限公司
申请日： 2018-05-17 - 公布日： 2018-10-12 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种外泌体的制备方法及含有外泌体的干细胞增殖试剂。该外泌体的制备方法包括：步骤一：将不含外泌体血清的培养基加入到骨髓间充质干细胞中，将其稀释成细胞悬液接种于细胞培养瓶中培养，收取培养后的上清液，进行外泌体的提取；步骤二：去除所述上清液中的细胞碎片、死细胞和杂质；去除上清液后加入磷酸缓冲盐溶液PBS溶解收集外泌体沉淀，使用无菌滤膜过滤，并将所得的所述外泌体沉淀分装于无菌离心管中，保存备用。该方法通过体外实验证明早代的骨髓间充质干细胞分泌的外泌体与人脐带间充质干细胞共培养可显著促进间充质干细胞的增殖活性及相关功能，是潜在改善大规模细胞培养过程中细胞功能的有效策略。
上清液制备骨髓间充质干细胞干细胞增殖去除沉淀人脐带间充质干细胞大规模细胞培养磷酸缓冲盐溶液间充质干细胞细胞悬液接种无菌离心管细胞培养瓶体外实验无菌滤膜细胞功能细胞碎片有效策略增殖活性培养基死细胞血清分装稀释分泌备用过滤溶解保存

[发明专利]一种外泌体的制备方法及含有外泌体的干细胞增殖试剂-CN202010918761.0在审
发明人：不公告发明人 -专利权人：广东芙金干细胞再生医学有限公司
申请日： 2018-05-17 - 公布日： 2021-01-29 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种外泌体的制备方法及含有外泌体的干细胞增殖试剂。该外泌体的制备方法包括：步骤一：将不含外泌体血清的培养基加入到骨髓间充质干细胞中，将其稀释成细胞悬液接种于细胞培养瓶中培养，收取培养后的上清液，进行外泌体的提取；步骤二：去除所述上清液中的细胞碎片、死细胞和杂质；去除上清液后加入磷酸缓冲盐溶液PBS溶解收集外泌体沉淀，使用无菌滤膜过滤，并将所得的所述外泌体沉淀分装于无菌离心管中，保存备用。该方法通过体外实验证明早代的骨髓间充质干细胞分泌的外泌体与人脐带间充质干细胞共培养可显著促进间充质干细胞的增殖活性及相关功能，是潜在改善大规模细胞培养过程中细胞功能的有效策略。
一种外泌体制备方法含有干细胞增殖试剂

[实用新型]一种用于外泌体分泌、分离和收集的生物反应器-CN201822200766.0有效
发明人：吴建国;吴迪;梁利国;武国华;王书崎 -专利权人：浙江大学
申请日： 2018-12-26 - 公布日： 2020-03-13 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种用于外泌体分泌、分离和收集的生物反应器，包括细胞培养装置、外泌体分离收集装置；细胞培养装置用于培养细胞并刺激细胞分泌外泌体；外泌体分离收集装置连接细胞培养装置，并能够将外泌体从细胞培养装置内的培养液中分离出来进行收集，分离后，细胞留于细胞培养装置内；细胞培养装置包括搅拌装置，用于向细胞培养装置中的培养液施加搅拌动力；细胞培养装置包括脉冲装置，可以向细胞培养装置以脉冲方式加入培养液。该生物反应器可以使培养液和细胞充分混合以保持足够供氧，搅拌装置不直接接触细胞，减小细胞所受剪切力，同时，本实用新型能够模拟体内细胞生长环境，刺激NK细胞或其他悬浮细胞大量分泌细胞产物。
一种用于外泌体分泌分离收集生物反应器

[发明专利]一种用于外泌体分泌、分离和收集的脉冲搅拌式生物反应器-CN201811601021.3有效
发明人：王书崎;吴建国;吴迪;梁利国;武国华 -专利权人：浙江大学
申请日： 2018-12-26 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于外泌体分泌、分离和收集的脉冲搅拌式生物反应器，包括细胞培养装置、外泌体分离收集装置；外泌体分离收集装置连接细胞培养装置，并能够将外泌体从细胞培养装置内的培养液中分离出来进行收集；细胞培养装置包括搅拌装置，用于向细胞培养装置中的培养液施加搅拌动力；细胞培养装置包括脉冲装置，可以向细胞培养装置以脉冲方式加入培养液。该生物反应器可以使培养液和细胞充分混合以保持足够供氧，而且搅拌装置不直接接触细胞，减小细胞所受剪切力，同时，本发明能够模拟体内细胞生长环境，刺激NK细胞或其他悬浮细胞大量分泌细胞产物。
一种用于外泌体分泌分离收集脉冲搅拌生物反应器

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