本发明涉及生物技术领域,具体来说涉及一种犬瘟热病毒纳米抗体及其应用,所述犬瘟热病毒纳米抗体所述纳米抗体能与犬瘟热病毒N蛋白结合;且骨架区含有如SEQ ID NO.1所示的共同特征氨基酸序列。本发明提供一种可用于检测犬瘟热病毒的纳米抗体,所述的抗体与犬瘟热病毒具有良好的亲和性,可以极其快速地检测出血液中犬瘟热病毒或其N蛋白,同时能够使得犬瘟热病毒检测用的配对抗体的制备变得容易,所制备的试剂盒成本更低,且更易于储藏和运输;本发明的试剂盒可以灵敏检测犬瘟热病毒抗原,重复性好,结果稳定,方便快捷,纳米抗体生产成本低且易于获得。
本发明公开了狐源犬瘟热病毒强毒HBF‑1株的感染性cDNA克隆及反向遗传系统的建立。本发明中的一种狐源犬瘟热病毒强毒HBF‑1株的感染性cDNA克隆,是通过反向遗传操作获得的狐源犬瘟热病毒强毒HBF‑1株的感染性cDNA克隆;所述感染性cDNA克隆的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示所述的反向遗传操作系统,是由含有所述的狐源犬瘟热病毒强毒HBF‑1株的感染性cDNA克隆的重组质粒和表达HBF‑1 N蛋白、P蛋白和L蛋白的三个辅助质粒组成。通过本发明的反向遗传操作系统拯救获得的重组病毒rHBF‑1与亲本病毒wtHBF‑1相比具有相似的生长特性,且大小、形态与典型的犬瘟热病毒的一致。本发明的提出为狐源犬瘟热病毒强毒HBF‑1株的拯救以及深入探索犬瘟热病毒的致病致弱分子机制提供了基础和技术手段。
本发明公开了一种对于犬瘟热病毒及抗体的ELISA检测方法,本发明利用犬瘟热病毒N蛋白在制备犬瘟热检测试剂盒,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明仅使用犬瘟热病毒的N蛋白作为抗原建立ELISA检测方法,N蛋白作为犬瘟热病毒保守蛋白具有较好的抗原性,其能够在防止病毒扩散的前提下对于血清样品中的抗犬瘟热病毒抗体进行量化,检测血液来源机体对于犬瘟热病毒的免疫状态或是细胞所分泌犬瘟热病毒的免疫水平,相比较于其他产品更为安全高效,对于犬瘟热病毒的基础研究以及临床检测具有积极意义。