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[发明专利]一种固氮酶催化乙炔还原反应的快速终止方法-CN202310037728.0在审
发明人：李培武;梁美娟;唐晓倩 -专利权人：中国农业科学院油料作物研究所
申请日： 2023-01-10 - 公布日： 2023-04-21 - 主分类号： C12Q1/26 文献下载
摘要：本发明涉及一种固氮酶催化乙炔生成乙烯反应的快速终止方法。本发明提供了混合型固氮酶活性阻断剂在乙炔还原法测定固氮酶活性中乙炔还原反应快速终止中的应用，所述的混合型固氮酶活性阻断剂为体系中草苷膦终浓度为2.0‑12％和有效氯浓度为0.1‑1％的溶液。本发明具有操作简单、固氮酶催化乙炔还原法终止速度快、终止效率高、阻断剂浓度低的优点，能够实现对农作物中根瘤样品中的固氮酶活性的准确检测。
一种固氮酶催化乙炔还原反应快速终止方法

[实用新型]一种便携式固氮酶活性测定装置-CN202320177474.8有效
发明人：李培武;王督;张文;张奇;张兆威;唐晓倩;岳小凤;梁美娟;姜俊 -专利权人：中国农业科学院油料作物研究所
申请日： 2023-01-19 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： C12M1/34 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种便携式固氮酶活性测定装置。该装置包括：反应单元：检测样品中固氮酶催化乙炔气体还原成乙烯；净化单元：用于将反应后的混合乙烯乙炔气体分离净化成为待检乙烯气体；检测单元：用于检测待检乙烯气体的乙烯含量。本发明能够实现固氮酶活性的快速测定，可用于田间地头等现场农作物固氮酶活性检测，也能够用于其他检测样品的固氮酶活性测定，具有操作简单、快速、便携移动等特点。
一种便携式固氮酶活性测定装置

[发明专利]一种测定甘蔗体内固氮菌固氮酶活性的方法-CN202011254175.7在审
发明人：李长宁;农倩;林丽;谢金兰;莫璋红 -专利权人：广西壮族自治区农业科学院
申请日： 2020-11-11 - 公布日： 2021-02-09 - 主分类号： C12Q1/26 文献下载
摘要：本发明公开了一种测定甘蔗体内固氮菌固氮酶活性的方法，包括取样与样品处理、培养、取其叶片和蔗茎消毒、灭菌、加入液体培养基，注入乙炔气体、封口、再挑选单菌落继续培养，测定其固氮酶活性。本发明通过将测定的甘蔗体样品进行取样与样品处理、培养、取其叶片和蔗茎消毒、灭菌、加入液体培养基，注入乙炔气体、封口、再挑选单菌落继续培养，测定其固氮酶活性，用于测定甘蔗体内的固氮菌固氮酶活性的液体/NFb培养基组成简单、易于配制、成本低，且液体/NFb培养基对甘蔗体内固氮菌的选择性较小，通过不施氮肥和消毒使得试验结果更加准确，防止试验结果差异大，且乙炔的注入量，方便对固氮菌固氮酶活性的检测。
一种测定甘蔗体内固氮菌固氮酶活性方法

[发明专利]一种测定甘蔗体内固氮菌固氮酶活性的方法-CN200810073865.5无效
发明人：李杨瑞;杨荣仲;方锋学;桂意云;周会;刘惜辉 -专利权人：广西壮族自治区甘蔗研究所
申请日： 2008-10-30 - 公布日： 2009-03-11 - 主分类号： C12Q1/25 文献下载
摘要：本发明公开了一种测定甘蔗体内固氮菌固氮酶活性的方法，该方法是：用蒸馏水和蔗糖配制成含10％蔗糖、pH为5.8的培养基，简称SH培养基；经取样与样品处理、温育、测定乙烯含量的标准曲线制作、乙烯含量测定和固氮酶活性计算等步骤，计算出样品的固氮酶活性值。2.本发明SH培养基的对甘蔗体内固氮菌选择性较小。3.本发明SH培养基能更准确反应不同品种间的固氮酶活性差异。
一种测定甘蔗体内固氮菌固氮酶活性方法

[发明专利]一株可降解石油并耐受石油的固氮菌PJ12及其应用-CN201810298786.8有效
发明人：王磊;陈琳;陈宏坤;张心昱;郑国砥 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2018-04-04 - 公布日： 2021-06-29 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及微生物领域，具体公开了一株可降解石油并耐受石油的固氮菌PJ 12，其保藏编号为：CGMCC No.14659。经固氮酶活性分析表明，本发明所提供的菌株具有较强的固氮酶活性，且在5‑21％氧浓度条件下，均有较高的固氮酶活性。在1％‑5％的石油浓度下，仍可以保持其固氮酶活性。
一株可降解石油耐受固氮菌 pj12 及其应用

[发明专利]一株可降解石油并耐受石油的固氮菌PJ3-5及其应用-CN201810298858.9有效
发明人：王磊;陈琳;陈宏坤;张心昱;郑国砥 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2018-04-04 - 公布日： 2021-06-29 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及微生物领域，具体公开了一株可降解石油并耐受石油的固氮菌PJ 3‑5，其保藏编号为：CGMCC No.14658。经固氮酶活性分析表明，本发明所述菌株具有较强的固氮酶活性，且在5％的氧浓度条件下，依然可以维持75％的固氮酶活性。当在1％‑5％石油浓度的石油污染环境中，所述菌株仍可以保持其固氮酶活性。
一株可降解石油耐受固氮菌 pj3 及其应用

[发明专利]增加豆科作物根部具固氮酶活性根瘤数量的方法及其在豆科作物上的应用-CN202111217143.4有效
发明人：李培武;张奇;岳晓凤 -专利权人：中国农业科学院油料作物研究所
申请日： 2021-10-19 - 公布日： 2023-06-20 - 主分类号： A01N63/22 文献下载
摘要：本发明涉及增加豆科植物根部具固氮酶活性根瘤数量的方法及其在豆科作物上的应用。将解淀粉芽孢杆菌、侧孢短芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌中的2种或3种与路德维希肠杆菌混合后，施入豆科作物田间，增加豆科作物根部具固氮酶活性根瘤数量。其应用于增加花生等豆科作物根部具固氮酶活性根瘤数量，使用简单，增产效益与生态效益显著，容易推广应用。
增加豆科作物根部固氮酶活性根瘤数量方法及其应用

[发明专利]增加大豆根瘤固氮酶活性和产量的方法-CN202310850523.4在审
发明人：关跃峰;汪鑫;邱智敏;王南;匡华琴 -专利权人：广州大学
申请日： 2023-07-12 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C07K14/415 文献下载
摘要：本发明属于植物育种领域，具体涉及一种增加大豆根瘤固氮酶活性和/或产量的方法。本发明公开了与大豆结瘤相关的基因，以及通过编辑该基因增加大豆根瘤固氮酶活性和/或产量的方法。
增加大豆根瘤固氮酶活性产量方法

[发明专利]一种促进豆科作物增加根瘤数量与根瘤固氮酶活性的微生物菌剂及其应用-CN202111344653.8在审
发明人：李培武;岳晓凤;张奇;唐晓倩;周扬;白艺珍;姜俊 -专利权人：中国农业科学院油料作物研究所
申请日： 2021-11-15 - 公布日： 2022-01-28 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明属微生物技术领域，具体涉及一种促进豆科作物增加根瘤数量与根瘤固氮酶活性的微生物菌剂及其应用，所述微生物菌剂由解淀粉芽孢杆菌、侧孢短芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌和路德维希肠杆菌4种微生物菌分别经发酵培养后浓缩混合复配而成该微生物菌剂能有效促进具固氮酶活性的根瘤数量与固氮酶活性的增加，促进作物生长，提高作物产量和产品品质。
一种促进豆科作物增加根瘤数量固氮酶活性微生物及其应用

[发明专利]一种在真核细胞中表达固氮酶基因的方法-CN201710546428.X有效
发明人：程奇;孙文丽 -专利权人：浙江善测禾骑士生物科技有限公司
申请日： 2017-07-06 - 公布日： 2021-03-30 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明涉及一种在真核细胞中表达固氮酶基因的方法，属于基因工程技术领域。该在真核细胞中表达固氮酶基因的方法，包括以下步骤:步骤一：扩增所述固氮酶基因片段；步骤二，构建重组载体：将所述固氮酶基因片段连接至病毒转化载体；步骤三：用步骤二构建的重组载体转染所述真核细胞；步骤四：筛选表达所述固氮酶基因的植物细胞本发明实现了固氮酶基因在植物中的表达，从而为植物自主固氮奠定基础。
一种真核细胞表达固氮酶基因方法

[发明专利]一株耐盐短杆菌及其在土壤生态修复中的应用-CN201611117566.8有效
发明人：张春禹;范天立;赵平;孙建光 -专利权人：北京复地中业环境科技有限公司;中国农业科学院农业资源与农业区划研究所
申请日： 2016-12-07 - 公布日： 2019-08-02 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一株具有较高固氮酶活性的耐盐短杆菌及其在生态修复中的应用。本发明从农田作物根际土壤中分离固氮菌，进一步筛选较高固氮酶活性的菌株，最终筛选到高效固氮菌耐盐短杆菌GDSD21，本发明的耐盐短杆菌GDSD21的固氮酶活性极显著高于微生物肥料常用生产菌种圆褐固氮菌ACCC11103，在改良土壤、提高土壤肥力、生荒地生态修复、蔬菜工厂化育苗接种剂、固氮微生物菌剂和生物有机肥生产中具有广阔的应用前景。
一株耐盐短杆菌及其土壤生态修复中的应用

[发明专利]兼具防控黄曲霉及毒素与增加固氮酶活根瘤数方法及应用-CN202111217051.6有效
发明人：张奇;李培武;岳晓凤 -专利权人：中国农业科学院油料作物研究所
申请日： 2021-10-19 - 公布日： 2023-06-13 - 主分类号： A01G7/06 文献下载
摘要：本发明涉及兼具防控黄曲霉及其毒素与增加豆科根部固氮酶活性根瘤数量的方法。获取具有黄曲霉及其毒素防控效果的解淀粉芽孢杆菌、侧孢短芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌和路德维希肠杆菌；将解淀粉芽孢杆菌、侧孢短芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌中的2种或3种与路德维希肠杆菌混合后，施入豆科作物田间，增加豆科作物根部具固氮酶活性根瘤数量其应用于增加花生等豆科作物根部具固氮酶活性根瘤数量，且同时降低黄曲霉及黄曲霉毒素水平，使用简单，增产效益及生态效益显著，容易推广应用。
兼具黄曲霉毒素增加固氮酶根瘤方法应用

[发明专利]一株产ACC脱氨酶的固氮菌及其在土壤生态修复中的应用-CN201610960300.3有效
发明人：孙建光;张春禹;冀春雷;王自力;蔡飞;徐军;赵晋灵 -专利权人：中国农业科学院农业资源与农业区划研究所;亿利首建生态科技有限公司;北京北林先进生态环保技术研究院有限公司
申请日： 2016-10-28 - 公布日： 2019-08-02 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一株产ACC脱氨酶的固氮菌及其在土壤生态修复中的应用。该固氮菌是云南微球菌(Micrococcus yunnanensis)GD1925，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.12397。本发明从农田作物根际土壤中分离固氮菌，进一步筛选较高固氮酶活性的菌株，筛选到高效固氮菌微球菌GD1925，本发明的微球菌GD1925的固氮酶活性和ACC脱氨酶活性均极显著高于微球菌GD192和微生物肥料常用生产菌种圆褐固氮菌ACCC11103，在改良土壤、提高土壤肥力、生荒地生态修复、蔬菜工厂化育苗接种剂、固氮微生物菌剂和生物有机肥生产中具有广阔的应用前景。
一株产 acc 脱氨酶固氮菌及其土壤生态修复中的应用

[发明专利]一种增强微生物固氮能力的人工非编码RNA模块-CN202010545585.0有效
发明人：林敏;战嵛华;燕永亮;柯秀彬 -专利权人：中国农业科学院生物技术研究所
申请日： 2020-06-16 - 公布日： 2022-06-28 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明涉及利用合成生物学方法创建的人工非编码RNA模块及其在人工固氮体系构建中的用途。所述RNA模块通过与固氮酶编码基因nifHDK mRNA的相互作用，增强nifHDK mRNA转录后的稳定性，进而提高了底盘微生物的固氮能力。本发明构建了人工RNA模块的融合表达载体，并转入到不同的底盘固氮微生物中。实验证实，在固氮条件下，本发明的人工RNA模块能够显著提高重组工程菌株固氮酶活性。
一种增强微生物固氮能力人工编码 rna 模块

[发明专利]用于植物的自生固氮基因、固氮酶表达盒、其制备方法及应用-CN202010883945.8有效
发明人：姚泉洪;彭日荷;高建杰;田永生;王波;王丽娟;付晓燕;李振军;韩红娟;许晶;张福建;张文惠 -专利权人：上海市农业科学院
申请日： 2020-08-28 - 公布日： 2022-11-29 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：用于植物的自生固氮基因、固氮酶表达盒、其制备方法及应用，通过合成生物学，将类芽胞杆菌属固氮基因簇的固氮酶相关基因按植物表达模式进行特定的优化设计，获得自生固氮基因，利用CaMV35SΩ启动子控制所有优化后固氮基因的表达，构建成植物组成型表达单元，通过同尾克隆，将所有表达单元组装在一个植物表达载体中，获得的固氮酶表达盒中各表达单元连接稳定，不易断裂，将其转化到植物细胞内，使固氮酶在细胞质中表达，培育出能够将氮气转化为氨的植物，实现植物的自生固氮。
用于植物自生固氮基因固氮酶表达制备方法应用

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