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- [发明专利]同源重组方法和克隆方法以及试剂盒-CN200980108826.7有效
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矶部正治;黑泽信幸
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国立大学法人富山大学
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2009-03-06
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2011-04-06
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C12N15/09
- 本发明提供可以选择性地同源重组目标基因的方法、以及利用该方法得到的重组DNA分子。同源重组方法,该方法使用PCR产物和线性化载体,所述PCR产物包含两末端具有扩增用引物序列P1和P2的靶基因序列;所述线性化载体具有包含与该PCR产物的扩增用引物序列P1和P2同源的核苷酸序列的同源重组区VP1和VP2,在VP1的末端侧具有包含与P1内侧的部分序列T1同源的核苷酸序列的同源重组区VT1、和/或在VP2的末端侧具有包含与P2内侧的部分序列T2同源的核苷酸序列的同源重组区VT2(T1和T2的至少一方具有靶基因所特有的核苷酸序列),该方法包括:使上述PCR产物参与同源重组反应,以将其插入上述载体中,由此得到在载体中特异性地插入有目标PCR产物的重组DNA分子。克隆方法,该方法利用上述同源重组方法,制备在载体中特异性地插入有目标PCR产物的重组DNA分子,之后扩增所得的重组DNA分子。
- 同源重组方法克隆以及试剂盒
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