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[发明专利]藻种培养系统及藻种传代培养方法-CN202210166779.9有效
发明人：叶乃好;王依涛;范晓;张晓雯;徐东;孙科;王巍;马建;张燕 -专利权人：中国水产科学研究院黄海水产研究所
申请日： 2022-02-23 - 公布日： 2023-09-01 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本发明提出一种藻种培养系统及藻种传代培养方法，属于微藻生物技术领域，能够解决现有的海洋藻类培养系统无法实现海洋藻类生长环境的精准模拟和藻类长期稳定传代的技术问题。该藻种培养系统包括：CO2光照培养箱和传代培养装置，其中，传代培养装置为微藻传代培养装置或大藻传代培养装置；微藻传代培养装置或大藻传代培养装置进一步包括：预处理槽、传代槽、供气装置、搅拌装置以及光源等部件。本发明能够应用于海洋藻类稳定传代培养方面。
培养系统传代方法

[发明专利]一种人羊膜组织来源间充质细胞提取及传代培养方法-CN200810113836.7有效
发明人：李荣旗 -专利权人：李荣旗
申请日： 2008-05-30 - 公布日： 2009-12-02 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明涉及“一种人羊膜组织来源间充质细胞提取及传代培养方法”属于再生医学工程领域。羊膜组织来源间充质细胞hAMCs的提取方法，包括去除羊膜上皮细胞和分离纯化间充质细胞步骤，其特征在于：所述分离纯化间充质细胞步骤中是采用0.1％胶原酶III、IV和V进行消化处理；间充质细胞hAMCs的体外传代培养方法，采用DMEM/F₁₂培养基，所述该培养基中加入有生长因子和羊膜上皮细胞培液的上清液。本发明的传代培养方法，使间充质细胞的增殖又快又好，在培养了35天还有增殖趋向。
一种羊膜组织来源间充质细胞提取传代培养方法

[发明专利]体外软骨细胞的培养方法-CN201410784100.8在审
发明人：陈洁琳;王大平;段莉;朱伟民;黄江鸿;陈磊;熊建义 -专利权人：深圳市第二人民医院
申请日： 2014-12-16 - 公布日： 2015-04-15 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明提供了一种体外软骨细胞的培养方法，包括：获取软骨细胞样本；将软骨细胞样本进行原代培养；将原代培养所得的软骨细胞进行传代培养，并在待传代培养至软骨细胞汇合度达到70～80％时，更换新鲜培养基并加入莱菔硫烷采用本发明的体外软骨细胞培养方法，先通过原代培养在初期使其形态和特异分子表达水平最大化地维持与机体内相同，使其能更好地显示与亲体组织紧密结合的形态学特征；之后再通过传代培养进行大量增殖，并且在适当的时机采用SFN进行退化抑制，有效缓解软骨细胞体外单层培养时的退化现象，为临床用软骨细胞的培养提供一种新的优良方法。
体外软骨细胞培养方法

[发明专利]对虾白斑综合症病毒的鸡胚培养方法-CN201210018771.4无效
发明人：李登峰;刘联国;彭娇;陈炯;周永强;顾晓英 -专利权人：宁波大学
申请日： 2012-01-20 - 公布日： 2012-11-21 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明公开了对虾白斑综合症病毒的鸡胚培养方法，特点是采用SPF鸡胚作为对虾白斑综合症病毒的体外培养体系，选择预先培养了6-7天的健康鸡胚，将预先制备除菌了的对虾白斑综合症病毒接种液接种至鸡胚尿囊膜上，收集培养时间为5-10天的死亡鸡胚进行匀浆离心分离，得到含对虾白斑综合症病毒的上清液，优点是提供一种更高效、更适用的WSSV体外培养方法，以对WSSV进行快速、有效的体外传代培养，克服了在WSSV培养过程无合适培养体系，现有培养方法难以进行病毒传代培养的问题，因此鸡胚培养方法在WSSV中的应用将填补虾病毒鸡胚培养体系的空白，并为以后的研究与应用奠定基础。
对虾白斑综合症病毒培养方法

[发明专利]一种软骨细胞体外扩增方法-CN201910036568.1在审
发明人：段莉;王大平;李兴福;徐晓;陆伟;熊建义 -专利权人：深圳市第二人民医院
申请日： 2019-01-15 - 公布日： 2019-07-16 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开了一种软骨细胞体外扩增方法，所述方法包括细胞原代培养和细胞传代培养，其中，在原代培养基中加入bFGF和PDGF等生长因子促进原代细胞培养，在传代培养基中加入具有相互协同作用的具有相互协同作用的bFGF、PDGF和IGF‑I等生长因子促进传代细胞培养，这样，不仅促进细胞数量扩增，同时可以有效避免细胞肥大化；同时，原代采用二维培养使软骨细胞适宜扩增，并优选传代采用三维培养以恢复退变的软骨组织表型
扩增传代软骨细胞生长因子软骨表型外扩细胞原代培养原代细胞培养原代培养基细胞传代细胞软骨组织三维培养细胞传代正常组织培养基二维肥大退变优选恢复

[发明专利]一种刺激隐核虫的培养方法-CN202110755081.6在审
发明人：白立云;孙文朋 -专利权人：白立云;孙文朋
申请日： 2021-07-01 - 公布日： 2023-01-03 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明旨在解决鱼类刺激隐核虫无法体外培养、宿主传代培养方式成本较高的问题，提供了一种鱼类刺激隐核虫宿主传代培养和体外培养相结合的方式，不仅一定程度上实现了鱼类刺激隐核虫的体外培养，而且降低了刺激隐核虫的培养成本，培养出的刺激隐核虫毒力稳定，可用于刺激隐核虫的其它研究。本发明采用鱼体培养一代、体外培养两代交替培养的方式，解决了以往传代完全依靠鱼体培养的问题，降低了培养成本，大大方便了鱼类刺激隐核虫病的相关研究。
一种刺激隐核虫培养方法

[发明专利]一种长期培养、鉴定人成体睾丸间质细胞的方法-CN202310704667.9在审
发明人：李朋;韩厦;李铮;夏术阶;赵亮宇;姚晨成 -专利权人：上海市第一人民医院
申请日： 2023-06-14 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明涉及一种长期培养、鉴定人成体睾丸间质细胞的方法。通过体外传代培养间质细胞，培养后显示其特殊梭型形态；成体间质细胞通过特异免疫荧光染色NES，HSD3B，STAR进行鉴定，未见间质细胞激素分泌功能明显变化。从而该方案可用于研究睾丸体细胞功能建立体外模型，并为睾丸间质细胞研究提供理论依据和前期基础。
一种长期培养鉴定人成体睾丸间质细胞方法

[发明专利]一种长期培养、鉴定人睾丸管周细胞的方法-CN202310704675.3在审
发明人：韩厦;李朋;李铮;赵亮宇;罗嘉强;徐帅;姚晨成 -专利权人：上海市第一人民医院
申请日： 2023-06-14 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明涉及一种长期培养、鉴定人睾丸管周细胞的方法。通过体外传代培养管周细胞，培养后显示其特殊环形形态；通过管周细胞特异免疫荧光染色CNN1，SMA进行鉴定，可见成球成管功能未见显著变化。从而该方案可用于研究睾丸体细胞功能建立体外模型，并为睾丸管周细胞研究提供理论依据和前期基础。
一种长期培养鉴定人睾丸细胞方法

[发明专利]间充质干细胞传代培养方法-CN202011071841.3在审
发明人：程蕊苹;高迎凤;蒲锋星 -专利权人：广东芙金干细胞再生医学有限公司
申请日： 2020-10-09 - 公布日： 2021-04-09 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种间充质干细胞传代培养方法，其特征在于，包括以下步骤：1）配制无血清传代培养基，所述无血清传代培养基的组分为：α‑MEM培养基、血小板衍生因子、成纤维细胞生长因子和抗坏血酸；所述血小板衍生因子的浓度为10‑15ng/mL；所述成纤维细胞生长因子的浓度为10‑15ng/mL；2）取原代间充质干细胞，加入到T‑75有孔培养瓶中，加入所述无血清传代培养基，在37℃、5％CO2培养箱中进行培养，待细胞融合度达到80%‑90%时，用胰蛋白酶‑EDTA溶液进行消化，消化完成后按1:4‑5进行传代培养。本培养方法可以在短时间内获得纯度高、分化能力强、干性稳定、增殖能力强的人脐带间充质干细胞。
间充质干细胞传代培养方法

[发明专利]一种改良的PK-15细胞传代培养方法及其应用-CN201510783971.2在审
发明人：佘峥;陈瑞爱;黄红亮;任常宝;谢小雨 -专利权人：肇庆大华农生物药品有限公司;广东温氏大华农生物科技有限公司
申请日： 2015-11-13 - 公布日： 2016-01-20 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种改良的PK-15细胞传代培养方法，在PK-15细胞传代培养过程中，加入消泡剂，消泡剂能有效消除细胞传代操作过程中产生的泡沫，使细胞生长状态保持良好，且能有效减少细胞聚团。本发明还把所述改良的PK-15细胞传代培养方法用于猪圆环病毒2型的增殖，增殖后猪圆环病毒2型病毒含量高。
一种改良 pk 15 细胞传代培养方法及其应用

[发明专利]一种可用于临床治疗的人膝关节软骨细胞体外扩增方法-CN201310753473.4无效
发明人：段莉;王大平;朱伟民;陈洁琳;熊建义;陆伟;彭亮权 -专利权人：深圳市第二人民医院
申请日： 2013-12-31 - 公布日： 2014-06-25 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开了一种可供临床使用的人膝关节软骨细胞体外扩增方法，包括以下步骤：对患者的离体软骨进行分离提取，获得软骨细胞；将所述软骨细胞接种至培养基中进行细胞原代培养；待所述细胞原代培养中的所述软骨细胞的汇合度为70～80%时进行细胞传代培养;其中，所述细胞原代培养和所述细胞传代培养的培养基均含有体积分数5～20%的患者离体血清、20～40ng/mlFGF和20～40ng/mlPDGF。上述方法安全可靠，培养获得的软骨细胞适于临床使用。
一种用于临床治疗膝关节软骨细胞体外扩增方法

[发明专利]一种脐带间充质干细胞的培养方法-CN202211173443.1在审
发明人：赵耀;李小凡;周蕾 -专利权人：山西房火探生物科技有限公司
申请日： 2022-09-26 - 公布日： 2022-11-25 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种脐带间充质干细胞的培养方法，包括以下步骤：(1)自脐带中剥离华通氏胶组织，将华通氏胶组织剪碎后平铺于培养容器中；(2)向步骤(1)的培养容器中加入原代培养基进行培养，待细胞融合度达到80‑90％后用0.25％胰蛋白酶消化传代；(3)将步骤(2)收集的脐带间充质干细胞用传代培养基重悬，进行传代培养。本发明提供的培养方法分别在脐带间充质干细胞的原代和传代培养过程中采用不同成分的培养基。其中在原代培养过程中添加腺苷、瓜籽蛋白、芝麻酚等成分协同作用，有效缩短脐带间充质干细胞原代培养的时间，提高培养效率。在传代培养过程中添加白桦提取物和培养基中的其他成分共同作用，提高脐带间充质干细胞的增殖活性。
一种脐带间充质干细胞培养方法

[发明专利]可传代培养的羊睾丸传代细胞及其传代驯化培养方法及专用培养体系与应用-CN201710208123.8有效
发明人：路荣;刘国英;范秀丽;张燕红;高艳华 -专利权人：金宇保灵生物药品有限公司
申请日： 2017-03-31 - 公布日： 2021-03-19 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了可传代培养的羊睾丸细胞及其传代驯化培养方法及专用培养体系与应用，提供了一株可传代培养的羊睾丸传代细胞LT‑1(CGMCC No.12988)以及驯化培养获得该细胞的方法。本发明采用优化的细胞培养液对羊睾丸原代细胞(LT)进行传代驯化培养，可使羊睾丸原代细胞增加传代次数，适于批量生产；并利用该细胞对羊口疮病毒进行增殖培养，结果显示，羊口疮病毒能连续传代培养3代，均能产生明显的病变，病毒含量可达107.5TCID50/mL，可用于羊口疮病毒的增殖培养和疫苗制备。
传代培养睾丸细胞及其驯化方法专用体系应用

[发明专利]检测维生素C生产菌株传代培养过程中营养环境变化的方法-CN201210109628.6无效
发明人：元英进;高赟;邹旸;胡梦龙;任恒千 -专利权人：天津大学
申请日： 2012-04-13 - 公布日： 2012-08-15 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测维生素C生产菌株传代过程中营养环境变化的方法，包括如下步骤：(1)混菌传代培养；(2)营养环境中物质的测定；(3)主成分分析；(4)过程分析。利用本发明的方法可以从揭示混菌传代培养对巨大芽孢杆菌、氧化葡糖杆菌以及混菌体系产生的影响，找到影响传代培养营养环境中的重要物质，这些物质含量的变化规律为了解传代培养促进氧化葡糖杆菌生长及2-酮基-L-古龙酸生产的作用机理提供依据
检测维生素生产菌株传代培养过程营养环境变化方法

[发明专利]一种水蛭细胞体外培养基及其培养方法-CN201810268999.6有效
发明人：虞龙 -专利权人：苏州至汇生物科技有限公司
申请日： 2018-03-29 - 公布日： 2021-08-27 - 主分类号： C12N5/07 文献下载
摘要：本发明公开了一种水蛭细胞体外培养基及其培养方法，将剪碎后的水蛭组织块接种于细胞封闭培养瓶中，加入Insect‑CCulture昆虫细胞培养基，细胞培养箱中静置培养，再配合组织块回收法进行分离培养，最后通过胰酶消化法获得纯化的水蛭体细胞进一步培养与其他昆虫细胞培养基相比更加快速成功的获得水蛭纯化体细胞，为进一步进行水蛭细胞体外传代培养做准备，并且建设一套体外原代培养水蛭细胞体系。
一种水蛭细胞体外培养基及其培养方法

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