[发明专利]新型作物增产菌的筛选和生产方法

摘要

新型作物增产菌的选育和生产方法，它包括菌种选育和固体发酵工艺。菌种选育工艺中，采取从双子叶植物大豆的主根、主茎中分离筛选菌株以及从单子叶植物水稻根系中分离筛选菌株，这二种菌株分别经固体发酵工艺制得新型作物增产菌。经实验，它们可使双子叶类作物增产15～25％，单子叶作物增产15～20％，对块根、块茎或其他无性繁殖体增产20～30％，并可改善作物品质，提高抗病害能力，其固体发酵产品的含菌量达120亿/克，成本低，便于包装运输。

主权项

1、一种新型作物增产菌的筛选和生产方法，其特征在于它包括分离筛选和固体发酵工艺：(1)分离筛选方法：选大豆主根、主茎(从真叶出现至盛花期末)，剪取5～10cm段，经自来水冲洗，消毒，去皮，再将剩下的木质部削成长度0.5～1.0cm的薄片，约2～3克，装入无菌水试管中，65～70℃恒温水浴10分钟，再倒入300ml无菌水中，用组织捣碎机捣碎约15分钟，吸10ml清液，用90ml水稀释，接种，培养分离筛选出地衣芽孢杆菌菌株(BacillusLicheni-formis)(保存于CGMCC，保藏号NO.0154)，将菌株在温室内作生物测定，测定三次，测定时菌种的数目用牛肉蛋白胨液体培养液调至108cfu/ml，菌液拌双子叶植物，播种于花盆中，随机区组排列，以出现四片真叶为标志，记录株数和每盆重，性能优越菌种作拮抗性能测定，筛选出的菌种进行固体发酵。(2)固体发酵工艺：a.菌种活化，再转入扁瓶或摇瓶中扩大培养，无杂菌污染时，加入蛋白胨水刮下菌膜，准备接种到种子罐。b.种子罐发酵：采用高压蒸汽灭菌，压力为0.1～0.14MPa，温度为120℃～126℃，灭菌30分钟，冷却到45℃以下时，注射接种扁瓶菌种，在30～32℃温度和1∶0.8～1.0的通气量培养到对数期放入贮液槽。种子罐培养基配方：豆饼粉0.5%～0.6%；鱼粉0.4～0.6%；蚕蛹粉0.4～0.6%；葡萄糖0.2～0.4%；花生油或糠油0.25%，其余为水，调节PH为7.5，消毒灭菌，保证PH在6.8～7.2之间。c.固体培养基配料：将干燥的草碳粉碎，用风选机筛至160～200目/吋，以草碳为基数，再加入0.1～0.2%的蛋白胨，0.1%～0.2%的鱼粉，加水量为30～40%，以水量为基数，水内加入H3BO3200～286PPm，MnCl2·H2O100PPm，ZnSO4220PPm，CuSO480～120PPm，H2MoO420～40PPm，FeSO4112～150PPm，KI10～28PPm，MgSO4200～350PPm，将配成营养液喷雾加入草碳中，并用搅拌机混合均匀。d.装袋灭菌：将混合均匀的培养料500克装一聚丙烯塑料袋，装灭菌车121℃～126℃(0.1MPa～0.14MPa)高压蒸汽灭菌1～2小时，冷却到45℃以下接菌。e.接菌：将灭菌的培养料用传送带送入接菌室，用接在菌液贮槽的接菌器，每袋接菌27～33ml，保证每克固体培养基接菌1～1.2×108cfu/克，抖动混合均匀后，折口置30°～32℃培养室固体发酵，约培养24～36小时，保证菌剂含芽孢数超过100×108cfu/克时，进行包装，得到产品。