[发明专利]抗猫CTLA4单克隆抗体的制备及其用途

摘要

本发明公开了一种抗猫CTLA4单克隆抗体的制备及其用途。本发明合成了猫CTLA4多肽，偶联KLH蛋白后加入等体积的弗氏佐剂（200μl）混合乳化后作为小鼠免疫抗原，通过背部左腹皮下多点注射免疫Balb/c小鼠；其中只有首次小鼠免疫用弗氏完全佐剂，二次、三次、四次加强免疫都用弗氏不完全佐剂，最后一次用少量CTLA4多肽抗原冲击免疫。将ELISA检测中效价高的小鼠脾细胞，通过PEG方法与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合，采用选择培养基，筛选出细胞融合后的杂交瘤细胞；再通过间接酶联免疫法筛选细胞并进行四次亚克隆，最终得到1株抗猫CTLA4单克隆抗体细胞株，及其分泌的单克隆抗体。得到的抗猫CTLA4单克隆抗体亲和力高，能有效识别细胞表面的CTLA4蛋白，可用于Western Blot和流式检测应用。