[发明专利]靶向敲除人TMEM121基因的sgRNA,构建该基因缺失细胞株的方法及应用有效

专利信息
申请号: 202211429717.9 申请日: 2022-11-15
公开(公告)号: CN115896112B 公开(公告)日: 2023-08-15
发明(设计)人: 周军媚;姚峰;李婉莲 申请(专利权)人: 桂林医学院
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/12;C12N9/22;C12N15/85;C12N5/10
代理公司: 北京律谱知识产权代理有限公司 11457 代理人: 黄莉
地址: 541199 广西*** 国省代码: 广西;45
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摘要: 发明公开了靶向敲除人TMEM121基因的sgRNA、构建TMEM121基因缺失细胞株的方法及应用,属于生物医药技术领域。通过Cas9系统构建pX459‑TMEM121重组质粒,将Cas9重组质粒转染HEK293T细胞,通过Puromycin进行筛选、有限稀释法结合HEK293T筛选,获得稳定的TMEM121基因敲除的细胞株HEK293T细胞和Huh7细胞。DNA检测显示,基因敲除的细胞株TMEM121基因出现缺失。另外,TMEM121基因敲除的细胞株迁移和侵袭能力明显下降。结果表明,利用Cas9系统成功敲除TMEM121基因后,可阻碍肝癌细胞的恶性转化。
搜索关键词: 靶向 tmem121 基因 sgrna 构建 缺失 细胞株 方法 应用
【主权项】:
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