[发明专利]用CRISPR-Cas9技术构建的重组大肠杆菌及其在制备磷脂酶D中的应用在审
| 申请号： | 202210574619.8 | 申请日： | 2022-05-25 |
| 公开（公告）号： | CN114921395A | 公开（公告）日： | 2022-08-19 |
| 发明（设计）人： | 凌雪萍;陈少锋;卢英华;姚传义;陈翠雪;赵旭蕊 | 申请（专利权）人： | 厦门大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/56;C12N15/55;C12N15/70;C12N9/16;C12R1/19 |
| 代理公司： | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人： | 秦彦苏 |
| 地址： | 361000 *** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明公开了用CRISPR‑Cas9技术构建的重组大肠杆菌及其在制备磷脂酶D中的应用。本发明涵盖敲除三个海藻糖酶基因treA、treC及treF构建耐盐菌株和磷脂酶D表达菌株及优化磷脂酶D表达条件两部分。所述磷脂酶D表达菌株构建采用质粒pBADKP‑pld2，优化表达条件包含诱导条件优化、培养基优化、氯化钠及氯化镁胁迫。在优选的表达条件下，一方面获得高水平磷脂酶D产量，另一方面极大地减少了磷脂酶D的细胞泄露问题，维持细胞的表达活性。本发明能实现短时间内磷脂酶D高表达，具有优良的时空产率。 | ||
| 搜索关键词： | crispr cas9 技术 构建 重组 大肠杆菌 及其 制备 磷脂酶 中的 应用 | ||
【主权项】：
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