[发明专利]一种低免疫原性的CRISPR-Cas9核酸蛋白复合物的制备方法及其应用在审
| 申请号： | 202210368648.9 | 申请日： | 2022-04-08 |
| 公开（公告）号： | CN114807132A | 公开（公告）日： | 2022-07-29 |
| 发明（设计）人： | 刘奕;乔洁;殷文浩;王馨萍;吴克 | 申请（专利权）人： | 武汉博沃生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/55;C12N15/70;C12N9/22;C12N15/65;C12N15/85;C12N5/10 |
| 代理公司： | 湖南乔熹知识产权代理事务所(普通合伙) 43262 | 代理人： | 安曼 |
| 地址： | 430075 湖北省武汉市东湖高新区*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种低免疫原性的CRISPR‑Cas9核酸蛋白复合物的制备方法及其应用，其中，适用于临床的低免疫原性的重组Cas9RNP制备方法，通过将Cas9RNP表达载体和碱性磷酸酶表达载体共转到大肠杆菌，进行双抗性标记筛选和诱导表达，并通过亲和纯化制备Cas9RNP。本发明制备的Cas9核酸蛋白复合物具有较强的稳定性和优异的细胞内基因编辑活性，相较于传统的体外重组生产Cas9RNP的方法，本发明方法在大肠杆菌细胞内直接获得5’‑OH的gRNA，省去了合成gRNA昂贵的生产成本，因而更加经济、简便，为实现Cas9RNP的大规模生产奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 免疫原性 crispr cas9 核酸 蛋白 复合物 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
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