[发明专利]一种ADAR蛋白细胞内高效结合底物及应用在审
申请号: | 202210342659.X | 申请日: | 2020-03-09 |
公开(公告)号: | CN114958834A | 公开(公告)日: | 2022-08-30 |
发明(设计)人: | 张锐;杨文兵;宋玉龙 | 申请(专利权)人: | 中山大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/113;C12Q1/6809 |
代理公司: | 北京市万慧达律师事务所 11111 | 代理人: | 谢敏楠 |
地址: | 510275 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种获取ADAR蛋白细胞内高效结合的底物序列的方法及底物序列和应用。所述方法包括如下步骤:S1.细胞准备及蛋白与RNA交联反应;S2.免疫共沉淀及双链RNA消化,连接,和逆转录;S3.cDNA环化、建库和高通量测序;S4.ADAR底物拼装;S5.高效结合底物的评估。本发明首次开发了一种获取ADAR蛋白细胞内高效结合的底物序列的方法irCLASH,本发明从实验及生物信息学的角度填补现有ADAR1结合底物研究存在的空缺,与现有其他研究蛋白与RNA相互作用的方法相比,可显著提高嵌合体读长的得率,可最大限度提高了ADAR蛋白作用底物的构建数量,同时缩短实验耗时、简化了实验操作。 | ||
搜索关键词: | 一种 adar 蛋白 细胞内 高效 结合 应用 | ||
【主权项】:
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