[发明专利]一种虹鳟鱼肝细胞系的建立方法在审
| 申请号： | 202210297354.1 | 申请日： | 2022-03-24 |
| 公开（公告）号： | CN114621913A | 公开（公告）日： | 2022-06-14 |
| 发明（设计）人： | 刘哲;赵桂研;权金强 | 申请（专利权）人： | 甘肃农业大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12Q1/02;C12Q1/04;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京盛凡佳华专利代理事务所(普通合伙) 11947 | 代理人： | 胡欢 |
| 地址： | 730070 *** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种虹鳟鱼肝细胞系的建立方法，属于鱼类细胞培养技术领域。本发明通过组织块培养法、酶消化法、肝细胞原代培养基的优化、台盼蓝染色、CCK‑8法、糖原染色、透射电镜鉴定、虹鳟肝细胞支原体检测这八个步骤予以实现。本发明组织块分离法并不适用于虹鳟鱼肝细胞分离，在培养过程中未见细胞从组织块中迁出，而胰蛋白酶消化法获得良好稳定的分离效果，经0.25％胰蛋白酶消化25min，每克肝重可收集细胞数量达到1.8×108个，平均细胞存活率达到95％；不同培养基和不同血清浓度均会影响细胞贴壁以及生长，含15％FBS DMEM培养基生长效果明显优于MEM、M199以及L15培养基。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 虹鳟鱼 肝细胞 建立 方法 | ||
【主权项】：
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