[发明专利]一种富集大鼠浆细胞及建立浆细胞杂交瘤的方法在审

专利信息
申请号: 202210003945.3 申请日: 2022-01-05
公开(公告)号: CN114350606A 公开(公告)日: 2022-04-15
发明(设计)人: 罗芳芳;陆青玲;王德宁;姬山泉;焦洪亮;梅芹;顾继杰 申请(专利权)人: 上海药明生物医药有限公司;上海药明生物技术有限公司
主分类号: C12N5/0781 分类号: C12N5/0781;C12N5/20;C07K16/28;C12Q1/02
代理公司: 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 代理人: 刘昌荣
地址: 201403 上海市奉*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明公开了一种富集大鼠浆细胞及建立浆细胞杂交瘤的方法,包括以下步骤:S1、以大鼠CD138为靶点,利用杂交瘤技术开发特异性抗大鼠CD138单克隆抗体;S2、使用抗大鼠CD138抗体对大鼠浆细胞进行富集,抗大鼠CD138抗体中包含EZ‑Link NHS‑PEG4‑生物素;S3、对小鼠骨髓瘤细胞和大鼠浆细胞进行处理,将处理后的小鼠骨髓瘤细胞和大鼠浆细胞进行细胞电融合;S4、将融合细胞转移至HAT筛选培养基中,在CO2培养箱中培养1~2小时,再铺于96孔细胞培养板中培养,7~14天后进行杂交瘤抗体筛选。本发明提供的方法富集度高,且改良了大鼠浆细胞杂交瘤融合技术,使杂交瘤抗体阳性率提高了10‑20倍,极大地提高融合效率和大鼠浆细胞的生物利用度,且本方法铺板数量低,节约了人力和物力成本。
搜索关键词: 一种 富集 大鼠 浆细胞 建立 杂交瘤 方法
【主权项】:
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