[发明专利]核酸扩增方法、核酸扩增方法用引物组、探针和试剂盒

摘要

核酸扩增方法，包括工序A、工序B和工序C。工序A：使包含由退火区域N3c、环区域BL、以及茎区域B1c和B1构成的结构(a)：5’‑B1c‑BL‑B1‑N3c‑3’的Bw衔接子引物、目标核酸的目标区域退火，以Bw衔接子引物的3’末端作为起点合成与所述目标区域的5’末端侧的碱基序列互补的碱基序列，获得在所述目标区域的互补链的5’末端添加了茎环结构的第一模板核酸。工序B：使包含由退火区域N5’、环区域FL、以及、茎区域F1c和F1构成的结构(c)：5’‑F1c‑FL‑F1‑N5’‑3’、且在3’末端进行了延伸阻碍修饰的Fw衔接子核苷酸、与第一模板核酸退火，以第一模板核酸的3’末端作为起点合成Fw衔接子核苷酸的互补链，获得由在第一模板核酸的3’末端添加了茎环结构的结构(d)：5’‑B1c‑BL‑B1‑N3c‑N5c‑F1c‑FLc‑F1‑3’构成的第二模板核酸。工序C：以第二模板核酸作为模板，使用包含结构(e)：5’‑F1c‑F2‑3’的Fw内引物和包含结构(f)：5’‑B1c‑B2‑3’的Bw内引物，通过LAMP法扩增包含第二模板核酸的N3c和N5c的碱基序列Nc。