[发明专利]一种理性设计提升腈水解酶活性的方法及应用在审
| 申请号： | 202111478385.9 | 申请日： | 2021-12-06 |
| 公开（公告）号： | CN114250217A | 公开（公告）日： | 2022-03-29 |
| 发明（设计）人： | 周哲敏;韩来闯;刘欣悦;崔文璟;程中一;刘中美;周丽;郭军玲 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/78 | 分类号： | C12N9/78;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12P17/12;C12P7/40;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种理性设计提升腈水解酶活性的方法及应用，属于酶工程领域。本发明通过腈水解酶的晶体结构进行分析，通过底物对接确定了催化口袋附近与催化活性相关的位点，对每个点做饱和突变后，通过两种计算方法Rosetta‑Cartesian和FEP对获得的突变体进行稳定性和结合自由能分析，对满足要求的突变体做酶活测定。将单点突变酶活高于野生型的位点进行组合突变再进行计算，最终获得符合要求的突变体进行酶活测定。通过这种方法我们最后获得了两个单点突变体，比酶活为野生型的2、1.5倍，组合突变体F64YW170G比酶活为野生型的4.56倍。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 理性 设计 提升 水解 活性 方法 应用 | ||
【主权项】：
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