[发明专利]一种广谱性狂犬病病毒样颗粒抗原的设计及其稳定表达细胞株HEK-293在审
| 申请号： | 202111469929.5 | 申请日： | 2021-12-03 |
| 公开（公告）号： | CN114262365A | 公开（公告）日： | 2022-04-01 |
| 发明（设计）人： | 马兴元;赵章婷;郑文云;邓昌平 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学 |
| 主分类号： | C07K14/145 | 分类号： | C07K14/145;C12N15/85;C12N15/47;C12N15/65;C12N5/10;A61K39/205;A61P31/14 |
| 代理公司： | 上海顺华专利代理有限责任公司 31203 | 代理人： | 李鸿儒 |
| 地址： | 200237 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明先利用CVS株狂犬病病毒RABV的糖蛋白RVGP和基质蛋白RVMP自组装成的RVLPs为抗原，设计一种广谱性狂犬病病毒样颗粒抗原；然后将RVGP、RVMP和EGFP共同构建到真核表达载体pcDNA3.1(+)中，命名为pcDNA3.1(+)‑RVLPs‑EGFP。每个蛋白都具有独立的启动子(CMV)、核糖体结合位点(Kozak序列)和PloyA尾(PA)，以保证每个蛋白的表水平，同时利用EGFP实时监测目的蛋白的表达，构建真核重组表达质粒；而后将真核重组表达质粒转染HEK‑293细胞，细胞经扩增和传代后，进行筛选和鉴定，筛选得到稳定高效表达RVLPs的阳性单克隆细胞株HEK‑293/RVLPs。获得抗原具有哺乳动物细胞的翻译后修饰，克服了细菌、酵母、昆虫以及植物细胞来源的RVLPs由于糖基化修饰不正确而表现出低免疫原性，为RVLPs抗原的规模化生产奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 广谱 狂犬病 病毒 颗粒 抗原 设计 及其 稳定 表达 细胞株 hek 293 | ||
【主权项】：
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