[发明专利]真菌来源的α-L-鼠李糖苷酶在高效生产淫羊藿苷中的应用在审
| 申请号： | 202111434208.0 | 申请日： | 2021-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN114107341A | 公开（公告）日： | 2022-03-01 |
| 发明（设计）人： | 田灵芝;董洪钢 | 申请（专利权）人： | 浙江熙正霖生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/56 | 分类号： | C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/60;C12R1/19 |
| 代理公司： | 无锡科嘉知信专利代理事务所(普通合伙) 32515 | 代理人： | 顾翰林 |
| 地址： | 311100 浙江省杭州市余*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及α‑L‑鼠李糖苷酶的应用技术，特别涉及一种真菌来源的α‑L‑鼠李糖苷酶在高效生产淫羊藿苷中的应用，包括如下步骤：步骤一、AmRhaE基因合成及重组表达α‑L鼠李糖苷酶大肠杆菌构建；步骤二、50mL体系诱导重组大肠杆菌发酵产α‑L鼠李糖苷酶；步骤三、5L发酵罐诱导重组大肠杆菌发酵产α‑L鼠李糖苷酶；步骤四、重组大肠杆菌全细胞催化水解淫羊藿提取物样品；还可以包括步骤五、重组AmRhaE粗酶液催化水解淫羊藿提取物样品；本发明通过将编码α‑L‑鼠李糖苷酶的基因序列连接至大肠杆菌表达载体pET28a上，在大肠杆菌宿主BL21(DE3)进行诱导表达。以0.5mMIPTG25℃诱导12h，获得重组酶酶活力为32U/mL，通过5L发酵罐优化放大，以0.5mMIPTG诱导12h，获得重组酶酶活力达197U/mL，相比于放大化表达前，酶活提高了6.15倍。 | ||
| 搜索关键词： | 真菌 来源 糖苷酶 高效 生产 淫羊藿 中的 应用 | ||
【主权项】：
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